四环素是放线菌产生的一种广谱抗生素,既可以用来进行动物疾病的治疗,还可以作为饲料的添加剂促进动物生长。然而,四环素的化学结构稳定,在动物体内并不能被完全吸收转化,大部分以尿液形式排出体外,易在环境中积累,造成污染。某研究人员欲从养鸡场粪便堆肥中筛选对四环素具有一定降解能力的菌株。回答下列问题:
(1)筛选四环素降解菌时,培养基除了加入碳源、氮源、水和无机盐外,还需加入___________ ,培养基配制后需进行___________ 灭菌。从用途上分析,该培养基属于___________ 培养基。
(2)若对四环素降解菌进行分离计数,需要将含有四环素降解菌的菌液采用___________ 法接种于固体培养基表面,选用该法的原因是_____________ ,所有操作都应在_____________ 附近进行。
(3)在培养四环素降解菌时,往往同时将一未接种的平板置于恒温箱中一起培养,目的是_____ 。
(4)该科研人员利用显微镜直接计数四环素降解菌,结果往往偏大,原因可能是___________ 。
(1)筛选四环素降解菌时,培养基除了加入碳源、氮源、水和无机盐外,还需加入
(2)若对四环素降解菌进行分离计数,需要将含有四环素降解菌的菌液采用
(3)在培养四环素降解菌时,往往同时将一未接种的平板置于恒温箱中一起培养,目的是
(4)该科研人员利用显微镜直接计数四环素降解菌,结果往往偏大,原因可能是
更新时间:2024-02-27 18:12:22
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【推荐1】 营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后,微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏,使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物,为工业生产提供大量的原料产物。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题:
(1)过程①的接种方法为_______________ ,为检验培养基灭菌是否成功应该____________ ;从培养基成分分析,基本培养基与完全培养基存在差异的成分是_____________ ;根据用途分类,图中基本培养基属于_______ 培养基。
(2)进行②过程培养时,应先将丝绒布转印至基本培养基上,目的是_______________ ,再从________ 培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。
(3)若将lmL菌液稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1mL稀释液,经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、57、58,据此可得出每升菌液中活菌数为_____ 个/L,通过此方法统计得到的数值往往比活菌实际数目_________ ,这是因为__________________ 。
(4)为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定,实验人员进行了如下操作:
①用接种针挑取__________ (选填“菌落A”或“菌落B”)接种于盛有完全培养液的离心管中,28℃振荡培养1~2天后,离心,取沉淀物用无菌水洗涤3次,并制成菌悬液。
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中,倾注15mL融化并冷却至50C左右的基本培养基,待其冷凝后用记号笔在_________ “皿盖”或“皿底”)划分五个区域,标记A、B、C、D、E。
③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸粉末(如下表所示),经培养后,观察生长圈出现的区域,从而确定属于何种氨基酸缺陷型。
在上述鉴定实验中,发现在培养基A、D区域出现生长圈,说明该营养缺陷型菌株属于________________ 。
(1)过程①的接种方法为
(2)进行②过程培养时,应先将丝绒布转印至基本培养基上,目的是
(3)若将lmL菌液稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1mL稀释液,经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、57、58,据此可得出每升菌液中活菌数为
(4)为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定,实验人员进行了如下操作:
①用接种针挑取
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中,倾注15mL融化并冷却至50C左右的基本培养基,待其冷凝后用记号笔在
③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸粉末(如下表所示),经培养后,观察生长圈出现的区域,从而确定属于何种氨基酸缺陷型。
组别 | 所含氨基酸 | ||||
A | 组氨酸 | 苏氨酸 | 谷氨酸 | 天冬氨酸 | 亮氨酸 |
B | 精氨酸 | 苏氨酸 | 赖氨酸 | 甲硫氨酸 | 苯丙氨酸 |
C | 酪氨酸 | 谷氨酸 | 赖氨酸 | 色氨酸 | 丙氨酸 |
D | 甘氨酸 | 天冬氨酸 | 甲硫氨酸 | 色氨酸 | 丝氨酸 |
E | 半胱氨酸 | 亮氨酸 | 苯丙氨酸 | 丙氨酸 | 丝氨酸 |
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【推荐2】从土壤中分离的苯酚分解菌可降解工业污水中的苯酚,净化水体。富集苯酚分解菌的培养基如图所示。请回答:
(1)该培养基中,微生物生长繁殖所需的碳源和氮源依次来自__________ ,培养基中的K2HPO4和KH2PO4在微生物的培养过程中所具有的作用是____________________ (答出2点)。
(2)在苯酚分解菌的富集培养过程中,需将接种后的培养液在振荡器上做振荡处理,这种处理利于菌体的生长和繁殖,其原理是__________________ ;苯酚分解菌成为优势菌而其他微生物数量减少,原因是__________________ 。
(3)在分离苯酚分解菌时,除图中的化学成分外,在培养基中还需添加__________________ 。接种培养后,在平板上长出的菌落有大有小,一般应选择菌落较大的苯酚分解菌进行纯化培养。进行上述选择培养的理由是__________________ 。
(4)分解苯酚的关键酶是苯酚羟化酶,它是苯酚分解菌所产生的一种胞内酶。在用海藻酸钠固化苯酚分解菌时,若制作的凝胶珠呈“蝌蚪”状,出现“托尾”现象,此时应采取的改进措施是__________________ 。苯酚羟化酶的酶活力除受温度,pH和苯酚浓度的影响外,还受海藻酸钠浓度的影响。海藻酸钠浓度过高使苯酚羟化酶的酶活力下降,原因是__________________ 。
(1)该培养基中,微生物生长繁殖所需的碳源和氮源依次来自
(2)在苯酚分解菌的富集培养过程中,需将接种后的培养液在振荡器上做振荡处理,这种处理利于菌体的生长和繁殖,其原理是
(3)在分离苯酚分解菌时,除图中的化学成分外,在培养基中还需添加
(4)分解苯酚的关键酶是苯酚羟化酶,它是苯酚分解菌所产生的一种胞内酶。在用海藻酸钠固化苯酚分解菌时,若制作的凝胶珠呈“蝌蚪”状,出现“托尾”现象,此时应采取的改进措施是
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【推荐3】尿素是一种重要的农业氮肥,但尿素并不能直接被农作物吸收,只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后,才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数的过程如图1所示,图2是乙中的培养基配方。回答下列问题:
(1)从物理性质上讲,培养液甲与培养基乙的成分的区别是_____ ,培养基乙中尿素主要为微生物生长提供_____ 。
(2)若要对培养基乙中的微生物进行鉴定,可在培养基中加入_____ ,观察菌落周围是否有_____ 色出现。
(3)称取1.0g某土壤样品转入99mL无菌水中,再经100倍稀释后获得低密度菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在多个固体培养基上,若经培养后平均长出了46个酵母菌菌落,则该样品中每克土壤约含酵母菌_____ 个。该方法统计的菌落数往往比实际活菌数_____ (填“偏高”或“偏低”),原因是_____ 。
(1)从物理性质上讲,培养液甲与培养基乙的成分的区别是
(2)若要对培养基乙中的微生物进行鉴定,可在培养基中加入
(3)称取1.0g某土壤样品转入99mL无菌水中,再经100倍稀释后获得低密度菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在多个固体培养基上,若经培养后平均长出了46个酵母菌菌落,则该样品中每克土壤约含酵母菌
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【推荐1】315老坛酸菜的曝光再次引发人们对食品安全的关注。菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志,也可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对送检样品进行卫生学评估提供证据。如图是某样品培养简化流程图,请分析回答下列问题:
(1)培养基配制,基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、____ 法灭菌等。
(2)玻璃涂布器一般是在酒精中浸泡,然后在酒精灯火焰上引燃灭菌,不用灼烧灭菌的原因是________________ 。
(3)本实验用菌落计数的原理是基于_________ ,运 用这种方法统计的结果往往较实际值偏小,原因是_________________________ 。
(4)通常对获得的纯菌种可以依据菌落的_________ 等菌落特征对微生物进行初步鉴定(或分类)。
(5)用菌落计数的具体培养结果如下表。选取菌落数30~300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释梯度的平均菌落数符合此范围,以该培养皿菌落数X稀释倍数报告。当有两个梯度菌落值在30~300之间,报告结果由二者菌落数比值决定,若比值不大于2,则取平均数;若比值大于2,则报告稀释度较低(稀释次数越多,稀释度越高)的培养皿菌落数。例次2、3中“?”处的菌落总数分别为__________________ 。
(1)培养基配制,基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、
(2)玻璃涂布器一般是在酒精中浸泡,然后在酒精灯火焰上引燃灭菌,不用灼烧灭菌的原因是
(3)本实验用菌落计数的原理是基于
(4)通常对获得的纯菌种可以依据菌落的
(5)用菌落计数的具体培养结果如下表。选取菌落数30~300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释梯度的平均菌落数符合此范围,以该培养皿菌落数X稀释倍数报告。当有两个梯度菌落值在30~300之间,报告结果由二者菌落数比值决定,若比值不大于2,则取平均数;若比值大于2,则报告稀释度较低(稀释次数越多,稀释度越高)的培养皿菌落数。例次2、3中“?”处的菌落总数分别为
例次 | 不同稀释度平均菌落数 | 两稀释度菌 落数之比 | 菌落总数 /[CFU/mL(g)] | ||
10-1 | 10-2 | 10-3 | |||
1 | 1365 | 164 | 20 | - | 16400 |
2 | 2760 | 293 | 46 | 1.6 | ? |
3 | 2890 | 269 | 60 | 2.2 | ? |
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【推荐2】家庭中泡菜的制作方法是:新鲜的蔬菜经过整理、清洁后,放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中,然后向坛中加入盐水、香辛料及些“陈泡菜水”,密封后置于温度适宜的地方。有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸”,前者是用盐过多,后者是用盐过少。请回答相关问题:
(1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是____________ ,密封泡菜坛的原因是:①__________________ ;②__________________ 。
(2)若制作的泡菜“咸而不酸”,最可能的原因是_________________ 。
(3)加入“陈泡菜水”的作用是____________________ 。
(4)制作泡菜的过程中,有机物的干重将_______________ ,菜坛内有机物的种类将______________ 。
(5)乳酸菌与酿制果醋的菌种在代谢方式上的主要区别是______________ 。
(1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是
(2)若制作的泡菜“咸而不酸”,最可能的原因是
(3)加入“陈泡菜水”的作用是
(4)制作泡菜的过程中,有机物的干重将
(5)乳酸菌与酿制果醋的菌种在代谢方式上的主要区别是
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【推荐3】市面上有一种药物——溶菌酶肠溶片,其说明书内容如下:溶菌细肠溶片的主要成分是一种水解酶,该水解酶最适PH值为5.3~6.4,是一种具有杀菌作用的天然抗感染物质,肠溶片为特殊片剂,和普通片剂相比肠溶片在胃液中不溶解,而到达小肠部位被溶解吸收,为了研究溶菌酶的抗菌种类,研究人员做了如下实验。
(1)溶菌酶抗菌种类的实验:
①对照组的处理是取2ml枯草芽孢杆菌培养液、2ml大肠杆菌培养液,分别滴加2滴生理盐水。实验组的处理是______ 。
②将处理后的菌液分别接种到培养基表面,待菌液被培养基吸收后,将平板______ ,放入恒温培养箱培养30min,结果如下图,统计观察______ 数量。
③实验结果表明______ 。
(2)实验过程中用到的培养基、培养皿和涂布器分别采用的灭菌方式为______ 。
(3)实验结束后,为了防止病原微生物污染环境和感染科研工作者,应采取的防护措施有______ (答出2项即可)。
(4)某人感染枯草芽孢杆菌而患病,胃口服溶菌酶的______ (填“普通片剂”或“肠溶片剂”)有更好的治疗效果,理由是______ 。
(1)溶菌酶抗菌种类的实验:
①对照组的处理是取2ml枯草芽孢杆菌培养液、2ml大肠杆菌培养液,分别滴加2滴生理盐水。实验组的处理是
②将处理后的菌液分别接种到培养基表面,待菌液被培养基吸收后,将平板
③实验结果表明
(2)实验过程中用到的培养基、培养皿和涂布器分别采用的灭菌方式为
(3)实验结束后,为了防止病原微生物污染环境和感染科研工作者,应采取的防护措施有
(4)某人感染枯草芽孢杆菌而患病,胃口服溶菌酶的
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【推荐1】硝基苯酚是工业污水中重要污染物,某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题:
(1)为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌,在配制培养基时应选择________ (硝基苯酚,硝基苯酚+牛肉膏,硝基苯酚+葡萄糖)作为碳源,不采用其他两组的原因是________________________________ 。
(2)纯化菌株时划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是________ (答一点即可)。
(3)进行梯度稀释时的一般操作是________________ ;常用稀释涂布平板法进行活菌计数,其原理是________________ ,但统计的菌落数往往少于稀释液中的活菌数,原因是________________ 。
(1)为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌,在配制培养基时应选择
(2)纯化菌株时划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是
(3)进行梯度稀释时的一般操作是
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【推荐2】胡萝卜素用途广泛,价格不菲。下图为胡萝卜素的结构式。利用紫外线诱变选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌,未突变菌不能在含有浓度为10-5M的β-紫罗酮的培养基上生长。该菌体随β-胡萝卜素含量增加会从黄色加深至橙红色。图甲为选育及提取获得β—胡萝卜素流程。请回答下列有关胡萝卜素的问题:
(1)培养基中需添加浓度为10-5M的β-紫罗酮,目的是_________________________________ 。
(2)进行③过程时,应选取___________ 色的菌落接种至液体培养基。某同学进行过程甲的正确操作,平板经培养后的菌落分布如图乙所示。只有少数菌能生长形成菌落的原因是______________________ 。
(3)另一同学为了获得高产菌株的单个菌落,接种时可用接种环在固体培养基上进行___________ 操作,为了使聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面,进行该操作时应该特别注意两点,一是____________ ,二是_______________ 。
(4)利用筛选出的优质菌种进行生产时,研究人员测得培养过程中的细菌胡萝卜素产量、培养液中的残碳量和残氮置如下图所示。与B 线相比,A曲线下降更快的主要原因是______________________ 。
(5)图甲中省略的⑤步骤包括将细菌裂解,释放出胡萝卜素。随后进行的步骤是萃取,为何不用水蒸气蒸馏法?_______________________________________________________ 。
(1)培养基中需添加浓度为10-5M的β-紫罗酮,目的是
(2)进行③过程时,应选取
(3)另一同学为了获得高产菌株的单个菌落,接种时可用接种环在固体培养基上进行
(4)利用筛选出的优质菌种进行生产时,研究人员测得培养过程中的细菌胡萝卜素产量、培养液中的残碳量和残氮置如下图所示。与B 线相比,A曲线下降更快的主要原因是
(5)图甲中省略的⑤步骤包括将细菌裂解,释放出胡萝卜素。随后进行的步骤是萃取,为何不用水蒸气蒸馏法?
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【推荐3】下表是某种微生物培养基的配方表,请据表回答:
(1)此培养基的营养成分有五类,其中蛋白胨提供的营养物质是________________ 。
(2)在培养基制备过程中,各种成分溶化后分装前,必须的操作是______________ 。
(3)微生物培养最基本的要求是无菌操作,下列对培养基、培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌消毒方法的正确顺序依次是______________ 。(填序号)
①化学消毒 ②高压蒸汽灭菌 ③干热灭菌 ④紫外灭菌 ⑤灼烧灭菌 ⑥巴氏消毒法
(4)巴氏消毒法与煮沸消毒法相比,其优点是___________________ 。
(5)用稀释涂布平板法统计菌落数目时,最好选择群落在__________ 的平板进行计数。若统计出在一稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个,所用稀释液的体积为0.2mL,则每毫升样品中的细菌数为_______________________________________ 。
(6)纯化菌株时,通常使用的划线工具是_____________ 。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有______________ 。
牛肉膏 | 蛋白胨 | NaCl | 琼脂 | 水 |
0.5g | 1g | 0.5g | 2g | 200mL |
(1)此培养基的营养成分有五类,其中蛋白胨提供的营养物质是
(2)在培养基制备过程中,各种成分溶化后分装前,必须的操作是
(3)微生物培养最基本的要求是无菌操作,下列对培养基、培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌消毒方法的正确顺序依次是
①化学消毒 ②高压蒸汽灭菌 ③干热灭菌 ④紫外灭菌 ⑤灼烧灭菌 ⑥巴氏消毒法
(4)巴氏消毒法与煮沸消毒法相比,其优点是
(5)用稀释涂布平板法统计菌落数目时,最好选择群落在
(6)纯化菌株时,通常使用的划线工具是
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【推荐1】放线菌是一类具有分枝菌丝的特殊菌群,其生长比一般细菌缓慢,在筛选中它的生长经常会受到快速生长菌的抑制,因此放线菌的分离筛选比较困难。自然界中绝大多数的抗生素都是放线菌产生的。回答下列问题:
(1)混合菌样品的预处理和培养条件是影响放线菌筛选的两个主要因素。常用到的预处理有加热、干燥、苯酚、强碱等,这说明放线菌相对于一般的细菌孢子,抗逆性___________ 。
(2)利用特殊的营养源,以及添加___________ 来抑制细菌生长从而选择培养放线菌也是常用的一种方法。另外,添加重铬酸钾的培养基也可以有效地抑制样品中的细菌和真菌。这两种方法用到的培养基都从功能上属于_________________________ 。
(3)初步筛选后的放线菌可用改良后的高氏一号培养基(可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4 0.5g,MgSO4 7H20 0.01g,蒸馏水1L,琼脂18g,pH7.2- 7.4)进行纯化培养,其中可溶性淀粉是放线菌生长的主要___________ 源,_____________ 是氮源。配制培养基时,灭菌与调pH的先后顺序是________________ 。
(4)对放线菌实现分离后,如需对其进行活菌计数,可采用______________ 法,在此方法中,当样品稀释度足够高时,培养基表面生长的一个__________ ,来源于样品稀释液中的一个活菌。
(1)混合菌样品的预处理和培养条件是影响放线菌筛选的两个主要因素。常用到的预处理有加热、干燥、苯酚、强碱等,这说明放线菌相对于一般的细菌孢子,抗逆性
(2)利用特殊的营养源,以及添加
(3)初步筛选后的放线菌可用改良后的高氏一号培养基(可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4 0.5g,MgSO4 7H20 0.01g,蒸馏水1L,琼脂18g,pH7.2- 7.4)进行纯化培养,其中可溶性淀粉是放线菌生长的主要
(4)对放线菌实现分离后,如需对其进行活菌计数,可采用
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【推荐2】废弃的化工厂内,土壤会受到不同程度的污染,为了改善土壤结构,降解有害物质,可利用现代生物技术进行探索,寻求降解有毒有机物的菌种。请回答下列问题:
(1)若要分离土壤中某种微生物,请写出主要的实验步骤_________________________________ 。
(2)微生物的数量的测定方法中利用培养基中菌落数目计算的方法有稀释涂布平板法,其原理_________________ 。测定微生物数量的方法还有显微镜直接计数法,此方法利用特定的_________________ 或血细胞计数板,在显微镜下观察、计数,再计算等 。
(3)为了有效降解有毒物质,需要一定数量的活化菌种。在活化过程中,定时取样检测菌种生长情况。若某次样品经过3次10倍稀释,经过台盼蓝染色(体积不计),在16×25型血细胞计数板上计数________ 色细胞,4个中格中的细胞为102个,该样品中活菌的密度为________ 个细胞 /mL。
(1)若要分离土壤中某种微生物,请写出主要的实验步骤
(2)微生物的数量的测定方法中利用培养基中菌落数目计算的方法有稀释涂布平板法,其原理
(3)为了有效降解有毒物质,需要一定数量的活化菌种。在活化过程中,定时取样检测菌种生长情况。若某次样品经过3次10倍稀释,经过台盼蓝染色(体积不计),在16×25型血细胞计数板上计数
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解题方法
【推荐3】某中学生物兴趣小组在进行A细菌的培养过程中,发现了另一种B细菌,在B细菌周围A细菌的生长繁殖受到抑制,这有可能是B细菌产生了不利于(抑制)A细菌生存的物质。
(1)现在请你在以下实验的基础上,继续完成验证A细菌生长繁殖受到抑制的原因的实验过程:___________ (用序号、文字和箭头作答)。
(2)上图所示培养基中加入了________ ,该培养基属于固体培养基。培养微生物前,所用培养基一般需采用_________ 法进行灭菌,接种微生物常用的方法有________ 、________ 。
(1)现在请你在以下实验的基础上,继续完成验证A细菌生长繁殖受到抑制的原因的实验过程:
(2)上图所示培养基中加入了
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