苜蓿是一种品质优良的多年生牧草作物，为提高苜蓿的耐盐性、增大种植范围，科研人员将盐生植物灰绿藜中的耐盐基因NHX1转入苜蓿中。回答下列问题。
(1)科研人员利用PCR获取和扩增耐盐基因NHX1，该过程需在含Mg2+的缓冲液中加入适量的模板DNA、4种脱氧核苷酸及____ 。
(2)构建基因表达载体是培育转基因耐盐苜蓿的核心工作，其目的是让基因在体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，同时使基因____ 。构建基因表达载体后，再通过农杆菌____ 转化法将基因表达载体导入至苜蓿细胞中，培养获得转基因苜蓿。
(3)在分子水平检测中，先以____ 为模板设计引物，对转基因苜蓿DNA进行PCR。再对PCR的产物进行琼脂糖凝胶电泳鉴定，凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的____ 和构象等有关。该过程需同时将标准参照物、标准NHX1基因（大小为1500bp，bp表示核苷酸对）、PCR扩增产物等分别加入不同点样孔中进行电泳。请将电泳图中相应的位置涂黑，以表示NHX1基因已成功导入苜蓿细胞。___
(4)若对该转基因苜蓿进行个体生物学水平的鉴定，实验思路是____ 。
(1)科研人员利用PCR获取和扩增耐盐基因NHX1，该过程需在含Mg2+的缓冲液中加入适量的模板DNA、4种脱氧核苷酸及
(2)构建基因表达载体是培育转基因耐盐苜蓿的核心工作，其目的是让基因在体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，同时使基因
(3)在分子水平检测中，先以
(4)若对该转基因苜蓿进行个体生物学水平的鉴定，实验思路是
更新时间：2024-03-24 08:00:45
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【推荐1】某植物蛋白酶抑制剂Ⅱ基因是重要的抗虫基因，该基因转录的mRNA下游序列已知，但其上游序列未知。现利用PCR等技术扩增该基因，具体原理如下图所示，其中①〜③表示有关过程，Ⅰ〜Ⅲ表示有关物质。请回答下列问题：
（1）过程①反应体系中，需要加入__________ 种引物，还需加入__________ 酶，生成杂合链物质Ⅰ。
（2）利用DNA末段转移酶催化过程②，使cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列（AAA(A)n），其目的是_________________ ，进而利于过程③扩增获得目的基因序列Ⅲ，过程③反应体系需要添加的新引物序列是____________________ 。
（3）与物质Ⅲ相比，物质Ⅰ化学组成不同的是____________________ 。与过程③相比，过程①中碱某配对方式的不同之处是__________ 。
（4）在物质Ⅲ的两端通常还需要增加__________ 序列，以便与相应的载体重组，再利用__________ 处理大肠杆菌等，以利于将重组质粒导入细胞，构建cDNA文库。
（1）过程①反应体系中，需要加入
（2）利用DNA末段转移酶催化过程②，使cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列（AAA(A)n），其目的是
（3）与物质Ⅲ相比，物质Ⅰ化学组成不同的是
（4）在物质Ⅲ的两端通常还需要增加
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【推荐2】屠呦呦因发现抗疟药青蒿素而获得诺贝尔奖。某课题组为得到青蒿素产量高的新品系，让青 蒿素合成过程的某一关键酶基因 fps 在野生青蒿素中过量表达，其过程图如下：
回答下列问题：
（1）图中酶 2 是_____________ 。利用 PCR 技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板 DNA 解链为单链 的条件是加热至 90-95℃，目的是破坏了 DNA 分子中的_____________ 键。在构建重组 Ti 质粒的过程 中，需将目的基因插入到 Ti 质粒的_______________________ 中。获得的 cDNA 与青蒿细胞中该基因 碱基序列__________________ （填相同或不同）。
（2）以 mRNA 为材料可以获得 cDNA，其原理是_____ 。
（3）检验目的基因是否整合到青蒿素基因组，可以将放射性同位素标记的__________ 做成分子探针与青蒿素基因组 DNA 杂交。理论上，与野生型相比，该探针与转 基因青蒿素 DNA 形成的杂交带的量_____ （填较多或较少）。
（4）据图分析，农杆菌的作用是_____ 。判断该课题组的研究目的是否达到，必须检测转基因青蒿素植株中的_________ 。
回答下列问题：
（1）图中酶 2 是
（2）以 mRNA 为材料可以获得 cDNA，其原理是
（3）检验目的基因是否整合到青蒿素基因组，可以将放射性同位素标记的
（4）据图分析，农杆菌的作用是
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【推荐3】PCR技术是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，其最大的特点是能将微量的DNA大幅增加。
I.如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如图1（以EcoRI酶切为例）所示。
(1)步骤Ⅱ中所用的DNA连接酶的作用是催化形成____________ ，从而形成环状DNA。
(2)步骤Ⅲ中的复性温度设定是成败的关键，温度过高会破坏______________________ 的碱基配对。
(3)若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是__________ （填数字“①、②、③、④”）。
(4)新冠病毒核酸定性检测原理：先以病毒RNA为模板利用__________ 酶合成cDNA，再通过PCR技术扩增相应的DNA片段，然后在扩增产物中加入特异的核酸探针。如果检测到特异的杂交分子则核酸检测为阳性。此方法为RT-PCR技术。
(5)如果探针是带有荧光标记的，即为“实时荧光RT-PCR技术”。在PCR反应体系中，加入的荧光探针与模板DNA的某条链互补结合，探针完整时，报告荧光基团发射的荧光信号被淬灭荧光基团吸收。当子链延伸至探针处，探针被TaqDNA聚合酶降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而发出荧光（如图2所示）。即每扩增1个DNA分子，就有1个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
①若最初该反应体系中只有1个DNA分子模板，进行第4次循环时，需要消耗荧光探针____________ 个。
②检测时，荧光强度一般要达到或超过阈值才能确诊。若检测出现假阴性，推测可能的一个原因__________________________________ 。
I.如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如图1（以EcoRI酶切为例）所示。
(1)步骤Ⅱ中所用的DNA连接酶的作用是催化形成
(2)步骤Ⅲ中的复性温度设定是成败的关键，温度过高会破坏
(3)若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是
| DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列） | |
| 已知序列 |  |
| PCR引物 | ①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′ ②5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′ ③5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′ ④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′ |
(5)如果探针是带有荧光标记的，即为“实时荧光RT-PCR技术”。在PCR反应体系中，加入的荧光探针与模板DNA的某条链互补结合，探针完整时，报告荧光基团发射的荧光信号被淬灭荧光基团吸收。当子链延伸至探针处，探针被TaqDNA聚合酶降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而发出荧光（如图2所示）。即每扩增1个DNA分子，就有1个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
①若最初该反应体系中只有1个DNA分子模板，进行第4次循环时，需要消耗荧光探针
②检测时，荧光强度一般要达到或超过阈值才能确诊。若检测出现假阴性，推测可能的一个原因
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(0.4)
【推荐1】拟南芥某突变体可用于验证相关基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色（TT），某突变体的种皮为黄色（tt）。下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因（Tn）功能的流程示意图。请据图回答下列问题：
（1）图中①为_______ ，形成过程中需要____________ 酶；Tn基因能够和质粒连接成①的主要原因是_________ 。
（2）拟南芥t基因的mRNA的末端序列为“－AGCGCGACCUGACUCUAA－”，而油菜Tn基因的mRNA与其相比，只有末端序列中的UGA变为AGA，则Tn比ｔ多编码______ 个氨基酸（起始密码子位置相同，UGA、UAA为终止密码子）。油菜Tn基因能在油菜突变体中表达的原因是__________________ 。
（3）若②不能在含抗生素Ｋan的培养基上生长，则原因是_________________ 。若转基因拟南芥的种皮颜色为_______________ ，则说明油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能可能相同。
（4）采用PCR技术扩增目的基因时，需在PCR反应体系加入引物等物质，若共用了引物30个，则目的基因扩增了___________ 代。
（1）图中①为
（2）拟南芥t基因的mRNA的末端序列为“－AGCGCGACCUGACUCUAA－”，而油菜Tn基因的mRNA与其相比，只有末端序列中的UGA变为AGA，则Tn比ｔ多编码
（3）若②不能在含抗生素Ｋan的培养基上生长，则原因是
（4）采用PCR技术扩增目的基因时，需在PCR反应体系加入引物等物质，若共用了引物30个，则目的基因扩增了
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(0.4)
真题
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【推荐2】PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0．9kb（1kb=1000碱基对），利用大肠杆菌表达该蛋白。回答下列问题：
(1)为获取phb2基因，提取该动物肝脏组织的总RNA，再经__________ 过程得到cDNA，将其作为PCR反应的模板，并设计一对特异性引物来扩增目的基因。
(2)图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点见下表。为使phb2基因（该基因序列不含图1中限制酶的识别序列）与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入__________ 和__________ 两种不同限制酶的识别序列。经过这两种酶酶切的phb2基因和载体进行连接时，可选用__________ （填“E．coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）。
相关限制酶的识别序列及切割位点
注：箭头表示切割位点
(3)转化前需用CaCl2处理大肠杆菌细胞，使其处于__________ 的生理状态，以提高转化效率。
(4)将转化后的大肠杆菌接种在含氨苄青霉素的培养基上进行培养，随机挑取菌落（分别编号为1、2、3、4）培养并提取质粒，用（2）中选用的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电分离，结果如图2，________ 号菌落的质粒很可能是含目的基因的重组质粒。
注：M为指示分子大小的标准参照物；小于0．2kb的DNA分子条带未出现在图中
(5)将纯化得到的PHB2蛋白以一定浓度添加到人宫颈癌细胞培养液中，培养24小时后，检测处于细胞周期（示意图见图3）不同时期的细胞数量，统计结果如图4。分析该蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖可能的原因是将细胞阻滞在细胞周期的__________ （填“G1”或“S”或“G2/M”）期。
(1)为获取phb2基因，提取该动物肝脏组织的总RNA，再经
(2)图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点见下表。为使phb2基因（该基因序列不含图1中限制酶的识别序列）与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入
相关限制酶的识别序列及切割位点
名称 | 识别序列及切割位点 | 名称 | 识别序列及切割位点 |
HindⅢ | A↓AGCTT TTCGA↑A | EcoRI | G↓AATTC CTTAA↑G |
PvitⅡ | CAG↓CTG GTC↑GAC | PstI | CTGC↓AG GA↑CGTC |
KpnI | G↓GTACC CCATG↑G | BamHI | G↓GATCC CCTAG↑G |
(3)转化前需用CaCl2处理大肠杆菌细胞，使其处于
(4)将转化后的大肠杆菌接种在含氨苄青霉素的培养基上进行培养，随机挑取菌落（分别编号为1、2、3、4）培养并提取质粒，用（2）中选用的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电分离，结果如图2，
注：M为指示分子大小的标准参照物；小于0．2kb的DNA分子条带未出现在图中
(5)将纯化得到的PHB2蛋白以一定浓度添加到人宫颈癌细胞培养液中，培养24小时后，检测处于细胞周期（示意图见图3）不同时期的细胞数量，统计结果如图4。分析该蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖可能的原因是将细胞阻滞在细胞周期的
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(0.4)
【推荐3】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）分析表中6种限制酶识别的序列特点，其不同点是：_________ ，共同点是：___________ 。
（2）限制酶__________ 和_________ 的切割后产生的黏性末端是一样的。（填限制酶的序号）
（3）在用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时，不能使用EcoR I切割的原因是___________ 。
（4）如果用限制酶HindⅢ与BamHI和DNA连接酶将图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时，则此过程可获得_______ 种环状DNA.（只考虑质粒和目的基因之间的连接）
（5）图2中的外源DNA用限制酶②和⑥同时切割，能产生___________ 种DNA片段。
（6）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的_______________________ 。
（7）如果要初步筛选出导入上述重组质粒的某种细菌，则应该在培养基中加入适量______________ 。
（1）分析表中6种限制酶识别的序列特点，其不同点是：
（2）限制酶
（3）在用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时，不能使用EcoR I切割的原因是
（4）如果用限制酶HindⅢ与BamHI和DNA连接酶将图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时，则此过程可获得
（5）图2中的外源DNA用限制酶②和⑥同时切割，能产生
（6）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的
（7）如果要初步筛选出导入上述重组质粒的某种细菌，则应该在培养基中加入适量
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(0.4)
【推荐1】研究人员利用一种从鱼体内分离出的抗冻基因，培育出抗冻番茄植株，使得其幼苗的致死低温下降了2°C。具体研发过程如下图（其中ampr为氨苄青霉素抗性基因）。回答下列问题：
(1)不用限制酶Alu I切割鱼抗冻基因的原因是_______________________ ，选择Sma I和Pst I两种限制酶切割鱼抗冻基因和质粒，而不是只选择Pst I一种酶切割抗冻基因和质粒的优点是__________________ 。
(2)研究人员用Sma I和Pst I两种限制酶切割抗冻基因和质粒，获得含抗冻基因的重组质粒后，又用不同的限制酶对原质粒和重组质粒进行酶切，获得片段大小如下表：（1 kb=1000bp，1 bp为一个碱基对，注意：DNA片段大小与图中所画比例一致）
由表中数据可知，鱼抗冻基因的长度为_____________ ，若不考虑终止密码子，抗冻基因合成的抗冻蛋白最多由_____________ 个氨基酸组成。
(3)图中的步骤②为_____________ ，步骤③表示植物组织培养的__________ 过程。
(4)若鱼抗冻基因整合进二倍体番茄细胞的某一条染色体上（基因型记为Aa），则通过______ （答出1种）的方法对抗冻番茄进行处理后获得的后代一定保留有抗冻基因。
(1)不用限制酶Alu I切割鱼抗冻基因的原因是
(2)研究人员用Sma I和Pst I两种限制酶切割抗冻基因和质粒，获得含抗冻基因的重组质粒后，又用不同的限制酶对原质粒和重组质粒进行酶切，获得片段大小如下表：（1 kb=1000bp，1 bp为一个碱基对，注意：DNA片段大小与图中所画比例一致）
| 限制酶 | Alu I | Sma I和Pst I |
| 原质粒 | 7.7kb | 2.3kb、5.4kb |
| 重组质粒 | 3.0kb、4.8kb |
由表中数据可知，鱼抗冻基因的长度为
(3)图中的步骤②为
(4)若鱼抗冻基因整合进二倍体番茄细胞的某一条染色体上（基因型记为Aa），则通过
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(0.4)
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【推荐2】基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：
(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心，其目的是___________________________________ ，一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、___________________ 、标记基因等。
(2)动物基因工程常用的受体细胞是___________ ，因为该细胞的全能性高，一般用______ 法将目的基因导入受体细胞。
(3)欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检的方法及结果是从转基因牛中提取________ ，用_________________ 杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗原蛋白。
(4)胚胎工程最后一道工序处是胚胎移植，其实质是____________________ 。
(5)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行分割_________ ？
(6)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用_______________________ 技术获得更多具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。
(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心，其目的是
(2)动物基因工程常用的受体细胞是
(3)欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检的方法及结果是从转基因牛中提取
(4)胚胎工程最后一道工序处是胚胎移植，其实质是
(5)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行分割
(6)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用
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(0.4)
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【推荐3】鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是__________ 。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________ 和__________ 序列，以便于后续的剪切和连接，一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有__________ 个。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是__________ 。
A. Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
B. 目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
C. 酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同
D. 酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有__________ ，步骤③中需先用__________ 处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过__________ 获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是__________ 。
（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是
A. Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
B. 目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
C. 酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同
D. 酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有
（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过
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(0.4)
【推荐1】成纤维细胞生长因子21（FGF21）是一种调节机体代谢的分泌型蛋白，具有降低血糖、提高胰岛素敏感性等生理活性。但由于FGF21稳定性差，导致FGF21药效较差。科研人员以含有FGF21基因（F）的重组质粒pSUMO-FGF21（p-F）为模板，对F进行定点突变，构建含突变基因的突变质粒PSUMO-mmtFGF21（p-mF），从而实现对FGF21的改造，部分过程如图1所示。据图回答下列问题：
(1)研究发现、改变FGF21中的氨基酸序列，可提高FGF21的稳定性。这首先需要在数据库中检索FGF21的氨基酸序列和____ ，据此设计突变位点并对蛋白质结构进行模拟验证。
(2)通过PCR技术可实现对FGF21基因（F）进行定点突变。
①将引物、p-F（DNA模版）、缓冲液、无菌水、4种脱氧核苷酸和____ 等加入微量离心管中，构成PCR体系进行反应。
②用于定点突变的引物长度不能过短，否则会由于____ ，导致定点突变失败。
③应选择图2中的哪对引物进行定点突变。____
A.1和4 B.2和3 C.1和3 D.2和4
(3)在转化大肠杆菌时，用低温和____ 溶液处理大肠杆菌细胞，使其成为感受态细胞，有利于突变质粒进入大肠杆菌中。培养一段时间后，取适量菌液涂布在含有____ 平板上筛选出含p-mF的细胞（菌落）。
(4)已筛选出含mF的大肠杆菌繁殖的后代中出现不含有mF的菌体，为了解决这一问题，最佳的方案是____ 。
(1)研究发现、改变FGF21中的氨基酸序列，可提高FGF21的稳定性。这首先需要在数据库中检索FGF21的氨基酸序列和
(2)通过PCR技术可实现对FGF21基因（F）进行定点突变。
①将引物、p-F（DNA模版）、缓冲液、无菌水、4种脱氧核苷酸和
②用于定点突变的引物长度不能过短，否则会由于
③应选择图2中的哪对引物进行定点突变。
A.1和4 B.2和3 C.1和3 D.2和4
(3)在转化大肠杆菌时，用低温和
(4)已筛选出含mF的大肠杆菌繁殖的后代中出现不含有mF的菌体，为了解决这一问题，最佳的方案是
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(0.4)
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【推荐2】科研人员从一些荒漠植物中成功克隆抗旱功能基因，培育出抗旱、耐盐碱和耐贫瘠能力的转基因紫花苜蓿新品系。它的研究成功，对改良与利用大面积盐荒地，改善生态环境，促进农牧业可持续发展具有现实意义。结合所学知识回答下列问题：
(1)克隆抗旱功能基因是应用______________ 技术，其原理为______________ 。
(2)获取目的基因的常用方法有从_______________ 中得到，也可人工合成。
(3)构建好的基因表达载体需含有目的基因、终止子、___________ 、___________ 和标记基因共五部分。
(4)紫花苜蓿为双子叶植物，常用的导入目的基因的方法是___________________ 。
(5)若进行个体水平的检测，需将该植株栽培于__________ 环境中，以观察其生长状况。
(6)某些地区在规划中违背了生态工程的______________ 原理,造成了“前面造林，后面砍林”的现象；我国西北土地沙化和盐渍化非常严重，主要原因是超载放牧，导致草地退化，当地的生产活动违背了生态工程的______________ 原理。
(1)克隆抗旱功能基因是应用
(2)获取目的基因的常用方法有从
(3)构建好的基因表达载体需含有目的基因、终止子、
(4)紫花苜蓿为双子叶植物，常用的导入目的基因的方法是
(5)若进行个体水平的检测，需将该植株栽培于
(6)某些地区在规划中违背了生态工程的
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(0.4)
【推荐3】(三）生物技术及生命科学的应用
严重联合性免疫缺陷症是一种T淋巴细胞缺乏腺苷脱氨酶（ADA）引起的疾病，通过基因工程的方法将正常ADA基因导入患者细胞中进行治疗。如图分别表示正常ADA基因、金属硫蛋白基因（含有该基因的细胞能在含重金属镉的培养基中生长）和质粒（总长为3.8kb，lkb=1000对碱基），ClaⅠ、XbaⅠ和SacⅠ均为限制酶。
1．基因工程的理论依据是不同生物______________ 。
A. 细胞结构相同 B. DNA结构相同
C. 都遵循中心法则 D. 共用一套密码子
2．为了筛选含有目的基因的受体细胞，需要先将目的基因和标记基因连接形成融合基因。首先用限制酶__________ 切割正常腺苷脱氨酶基因与金属硫蛋白基因，然后用__________ 酶将它们连接形成融合基因。
3．将上述融合基因与图的质粒构建成重组质粒时，应选用的限制酶是____________ 。
A. ClaⅠ B. SacⅠ和XbaⅠ C. ClaⅠ和XbaⅠ D. ClaⅠ和SacⅠ
4．若该融合基因长1.9kb，据图分析，此重组质粒大小为_______ kb。
5．重组质粒应导入的受体细胞是病人的__________ 细胞。为筛选出含重组质粒的受体细胞，需在培养基中添加的物质是____________ 。
严重联合性免疫缺陷症是一种T淋巴细胞缺乏腺苷脱氨酶（ADA）引起的疾病，通过基因工程的方法将正常ADA基因导入患者细胞中进行治疗。如图分别表示正常ADA基因、金属硫蛋白基因（含有该基因的细胞能在含重金属镉的培养基中生长）和质粒（总长为3.8kb，lkb=1000对碱基），ClaⅠ、XbaⅠ和SacⅠ均为限制酶。
1．基因工程的理论依据是不同生物
A. 细胞结构相同 B. DNA结构相同
C. 都遵循中心法则 D. 共用一套密码子
2．为了筛选含有目的基因的受体细胞，需要先将目的基因和标记基因连接形成融合基因。首先用限制酶
3．将上述融合基因与图的质粒构建成重组质粒时，应选用的限制酶是
A. ClaⅠ B. SacⅠ和XbaⅠ C. ClaⅠ和XbaⅠ D. ClaⅠ和SacⅠ
4．若该融合基因长1.9kb，据图分析，此重组质粒大小为
5．重组质粒应导入的受体细胞是病人的
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