组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本操作程序 > 基因表达载体的构建
题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:165 题号:22213901
番茄在低温下易出现冻伤从而影响品质。科学家利用基因工程技术将真菌的AFPs抗冻基因转入番茄植株,培育抗冻番茄。如图表示培育转基因番茄的部分流程。图中涉及的限制酶酶切位点分别为BamH I—G↓GATCC—,Bgl Ⅱ-A↓GATCT—,EcoRI—GAATTC—。回答下列问题:
   
(1)从寒冷地区土壤中筛选并培养含有抗冻基因的真菌,用于提取目的基因,需先配制含有____等营养物质的培养基,接种菌种后在____条件下培养。
(2)构建基因表达载体时切割质粒应选择的限制酶是____,理由是____。酶切后的目的基因存在正向与反向两种连接方式,可用____酶对两种重组质粒进行剪切,通过凝胶电泳分析产物大小进行区分,电泳结果出现长度为____的片段即为所需表达载体。
(3)取番茄体细胞经____过程可获得愈伤组织,该过程需____两种植物激素诱导。

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【推荐1】如图是生物技术制备抗体的两个途径模式图。请据图分析回答下列问题:

(1)在制备乙肝抗体之前,需要向健康人体注射乙肝疫苗,并且还需要在经过特定的时间段后重复注射,这样做的目的是______
(2)过程①为细胞融合,促进动物细胞融合的试剂为______,动物细胞融合的原理是______
(3)⑤过程为基因工程操作步骤中的______,它是基因工程的核心,其目的是______,需要用到的特定的酶是______
(4)如果某科研小组想用上述原理和过程生产具有抗棉铃虫能力的棉花,则通常需要将大肠杆菌换成______,检测转基因抗虫棉是否具有抗棉铃虫能力的方法是____________
2023-12-16更新 | 318次组卷
【推荐2】猴病毒40(SV-40)AgT基因表达的抗原AgT可以阻断小鼠抑癌基因的信号通路,诱导小鼠发生前列腺癌。科学家利用生物技术手段制备了前列腺癌转基因小鼠动物模型,为前列腺癌的发生、发展规律和防治研究提供了重要的平台。回答下列问题:
(1)下图为SV-40DNA分子的部分结构,利用PCR技术扩增AgT基因,应选择引物1和____,将该DNA分子加入到PCR扩增仪中,要获得8个等长的AgT基因片段,至少要经历____次循环。
   
(2)构建基因表达载体时,通常需要将目的基因与人工构建的诱导型启动子结合,其目的是____
(3)若需大量制备前列腺癌转基因小鼠,可以利用胚胎移植技术。通常导入了目的基因的小鼠受精卵细胞在体外发育至____时期才能用于胚胎移植,移植前应对供体小鼠和受体小鼠做____处理,目的是____
2024-03-09更新 | 128次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐3】斑马鱼的酶 D 由 17 号染色体上的 D 基因编码。利用转基因技术将绿色荧光蛋白基因(G)整合到斑马鱼 17 号染色体上,带有 G 基因的胚胎能够发出绿色荧光。具有纯合突变基因(dd)的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。未整合 G 基因的染色体的对应位点表示为 g。图 1 和图 2 所示分别为实验所用的质粒上相关酶切位点以及含绿色荧光蛋白基因(G)的外源 DNA 片段上具有的相关酶切位点。据图回答下列问题:

(1)将绿色荧光蛋白(G)基因整合到斑马鱼 17 号染色体上的实验过程中,首先要将G 基因与质粒重组,此过程需要的两种工具酶是限制酶和_________
(2)经筛选获得的重组质粒需要经显微注射到斑马鱼的_________细胞中加以培养、筛选。如果培养得到的胚胎能_________,说明 G 基因已经成功整合到染色体上并且该基因已经得以表达。
(3)用图 1 中质粒和图 2 外源 DNA 构建重组质粒,不能使用________切割,原因是 _______。如果要防止质粒和含目的基因的外源 DNA 片段自身环化,则应选择下列方法 ________为好。
①只使用 EcoR I 处理②使用 BamH I 和 SmaⅠ同时处理
③使用 BamH I 和 HindⅢ④使用 Sma I 和 HindⅢ同时处理
(4)现用转基因个体 N 和个体 M 进行如下杂交实验得到的子代胚胎表现型如图 3 所示,推测亲代 M 的基因型是_________

(5)子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括_________
①DDGG②DDGg③DdGg④DdGG
2020-01-03更新 | 234次组卷
共计 平均难度:一般