【推荐1】水中细菌总数可以作为判定被检水样被有机物污染程度的标志。在水质卫生学检验中，细菌总数是指1mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中，经37℃、24h培养后，所生长出的菌菌落数。为初步测定某处池水中的细菌数目，实验大致流程为：水样采集→梯度稀释→接种培养→菌落计数。请回答：
(1)对采集的池水进行梯度稀释时，应先将1mL水样加入_______________中以获得稀释10倍的稀释液。实验中对采集的池水要进行稀释的原因是_____________________________。
(2)接种培养所用到培养基中，能为细菌同时提供碳源和氮源的物质是_______________。
(3)为保证菌落计数结果准确，一般选择菌落数在______的平板进行计数。用这种方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低，原因是________________________________。
(4)实验过程中为确保培养基上菌落来自所采集水样，避免杂菌污染。实验中需要注意的具体操作有：采集水样的容器要______，稀释和接种要在________________进行等等。

【推荐2】存在于土壤中的脂环酸芽孢杆菌需氧，耐热，生长温度 35-70℃。橙汁生产过程中若感染脂环酸芽孢杆菌，会影响橙汁的品质，导致巨大的经济损失。为优化橙汁生产的质量监控工艺，进行下述研究。
【实验一：脂环酸芽孢杆菌的筛选和鉴定】实验步骤：①配制 K 氏培养基;
②取果园土壤，制备土壤稀释液；
③将土壤稀释液接种在 K 氏培养基平板上，培养后获得单菌落。
④对获得的菌落进行筛选和鉴定。
(1)K 氏培养基的主要成分有酵母膏、蛋白胨和葡萄糖等，其中能提供生长因子的成分是__________________ 。

(2)将分离得到的可疑菌株制成菌悬液，于 80℃水浴中热处理 10min，再取 0.1mL 热处理后的菌液涂布接种到K 氏培养基平板上，45℃培养 48h。此操作过程的目的是（       ）

A．用 80℃水浴杀死杂菌和芽孢	B．分离纯化目标菌株
C．用 80℃水浴筛选出耐热菌株	D．给细菌补充新的营养物质

【实验二：脂环酸芽孢杆菌控制方法的研究】
实验步骤：
① 称取一定量的抑菌剂，配制成不同浓度的抑菌液。
② 将实验一得到的菌株原液稀释成一定浓度。
③ 分别取不同浓度的抑菌液和菌株稀释液，加入到 K 氏培养液中形成菌悬液（三种液体均为等量）。培养一段时间后，将上述菌悬液分别接种到 K 氏培养基平板上。
(3)实验二中，对照组的设置应该是_________________。
(4)为便于检测抑菌剂的抑菌效果，宜采用哪种接种方法？为什么？_______________。

【推荐3】花椰菜的维生素含量丰富，能帮助人体提高免疫力、预防高血压、降血糖、降血脂等作用，还是医学界推荐的抗癌食物。花椰菜 种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，而紫罗兰 具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种，如图所示。

请回答：
(1)下表是某同学为某植物组织培养提供的培养基配方，你认为该营养液还需补充含_________元素的化合物，培养基的浓度应_____________________(填“大于”“等于”或“小于”)植物细胞液浓度，理由是______________________________。

Ca(NO₃)₂	KH₂PO₄	(NH₄)₂SO₄	FeCl₃	微量元素	H₂O	琼脂
1.2g	0.3g	0.28g	0.08g	微量	1000mL	适量

(2)科研人员分别取紫罗兰叶肉细胞和黑暗处发芽的花椰菜胚轴细胞，过程①经___________________________酶处理后，得到两种原生质体。过程②用________________________试剂诱导两种原生质体融合。显微镜下选择_____________________________特征的细胞，通过植物组织培养技术形成试管苗。
(3)对部分杂合新植株的染色体计数，发现杂合新植株体细胞中有58条染色体。从细胞融合时发生的变化角度分析，出现这种现象的原因是___________________________(答出两点变化即可)。

【推荐1】研究发现，土壤中某种微生物能降解石油。分离降解石油的菌株和探索其降解机制的实验过程如图所示。回答下列问题：

(1)该实验所用的振荡培养的培养基只能以石油作为唯一碳源，其原因是____________。
(2)振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，原因是振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。
(3)若要测定活菌数量，可选用________法进行计数；若要测定培养液中微生物的菌体数，可在显微镜下用________直接计数。
(4)为探究石油的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是____________________，该实验设计是否合理？为什么？ ____________

【推荐2】制备培养基方法：将蛋白胨、NaCl和牛肉膏放入烧杯内，加200mL蒸馏水，用玻璃棒搅匀后，在酒精灯上加热。当蛋白胨、牛肉膏融化后，加入琼脂，用微火继续加热至琼脂溶化，补充水至200mL。用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl将pH调至7.0～7.2，分别对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌。当培养基的温度下降到50℃时，将其分装在5套培养皿中，当培养基冷却至室温，按下表分别进行处理。将处理完毕的培养基置于35℃的温度下培养2～3天，观察每个培养基中的细菌生长情况。请回答下列问题：

第1套	开盖，在空气中暴露10s
第2套	用手指接触培养基约10s
第3套	用硬币接触培养基约10s
第4套	用滤纸擦一下课桌，再接触培养基约10s
第5套	对照（不打开盖）

（1）该培养基中，含有的营养物质有_______________________。
（2）从培养基的物理性质来看，上述培养基是_________培养基，该种培养基主要用于微生物的___________等。
（3）实验中，有三处特别强调温度控制，请简要说明其控制温度的科学道理。
①“高压蒸汽灭菌后培养基的温度下降到50℃”________________________。
②“当培养基冷却至室温，按下表分别进行处理”_____________________________。
③“将处理完毕的培养基置于35℃的温度下培养”______________________________。

【推荐3】研究发现产琼脂糖酶的细菌和琼脂糖酶在制备原生质体、回收DNA与RNA方面有着重要的用途。以琼脂（一种多糖的混合物）为唯一碳源的培养基培养该细菌，培养一段时间，滴加某种染色剂后有透明圈出现。回答下列问题：
(l)常选用琼脂作为培养基凝固剂的原因是____。
(2)用添加琼脂的培养基接种产琼脂糖酶的细菌，该细菌的菌落周围会出现__________现象。
(3)某小组在分离纯化产琼脂糖酶的细菌时，先培养产琼脂糖酶的细菌，再滴加染色剂。
①该种方法的优点是___________，不足的是___________。
②一般挑取___________的菌落进行纯化培养。
③若纯合培养时采用平板划线法接种，则常用的接种工具是___________，在平板上进行连续多次划线的目的是_______________。

【推荐1】尿素[CO（NH₂）₂]含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH₃，再被转化为NO₃^-、NH₄⁺等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。
(1)将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该以___________的选择培养基，并加入____________指示剂进行鉴别。
(2)该选择培养基就一定起到选择作用吗?请你设计一方案证明选择培养基具有选择作用，并作出相应实验结论。______________________________________
(3)稀释涂布平板法可以用于细菌的计数，是因为当样品的稀释度足够高时，________。通过计数平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
(4)甲同学用移液器取0.1ml稀释液涂布了A、B、C三个平板测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为10⁵的培养基中，得到以下统计结果。统计的菌落数分别为232、212、246，1ml原液含菌株数为_______________。

【推荐2】某研究小组进行了土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验，回答下列问题。
(1)分解尿素的细菌能分解尿素的原因是其能合成__________。
(2)为了保证能从土壤中分离得到分解尿素的细菌，最好到___________（填“施用尿素”或“不施用尿素”）的农田中进行土壤取样，原因是___________。
(3)在分离土壤中分解尿素的细菌时要将稀释菌液通过___________法接种到以__________的选择培养基上，该培养基能将土壤中分解尿素的细菌分离出来的原理是___________。
(4)若用1×10³倍的稀释菌液涂布（每个平板上涂布的稀释液均为0.1mL）得到的三个平板上的菌落数分别为26、54和56，则该实验结果可用于计数，判断的依据是___________。且根据实验结果可推测出1g土样中分解尿素的细菌的数量为___________个。

【推荐3】为获得高效降低胆固醇的乳酸菌，科研人员做了如下实验。
(1)取适量发酵酸肉，剪碎并研磨，磨碎后加入______制成1:10稀释液，再梯度稀释为10^-6倍稀释液，涂布于因添加了CaCO₃而不透明的乳酸菌培养基(MRS培养基)平板上，乳酸菌产生的乳酸能溶解CaCO₃，在_______(填“有氧”或“无氧”)条件下恒温静置培养48小时。挑取具有______的菌落，用_______法接种在MRS培养基上纯化。可通过观察菌落的_____判断是否达到了纯化。
(2)纯化后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养，一段时间后离心测定______中胆固醇的含量，以______作为对照，测定菌株降胆固醇的能力，筛选出目的菌株。

【推荐1】（一）（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌，用___________蘸取少量的菌悬液，在MRS 乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得单菌落，单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选______________的最简单的方法之一。
（2）下图所示的划线分离操作，正确的是________。

（3）为筛选胞外a淀粉酶分泌型菌种，一般从米酒厂周围获得土样,用无菌水稀释，涂布到含有淀粉的选择培养基上培养，一段时间后在培养基表面滴加_______，可在菌落周围观察到透明的水解圈。若要筛选酶活性较高的菌种,需挑选若干个___________与菌落直径比值大的菌落，分别利用________培养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心，取上清液用于检测酶活性。
（二）嗜热土壤芽孢杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用, 利用大肠杆菌表达BglB酶，开展了以下试验。（图中启动子与RNA聚合酶结合，终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列）

（1）_________扩增bglB基因时，选用嗜热土壤芽孢杆菌基因组DNA作模板。
（2）如下图为质粒限制性核酸内切酶切图谱，为使获得的bglB基因与质粒载体连接， bglB基因两端需分别含有___和___不同限制酶的识别序列。
（3）将重组DNA分子导入受体细胞，为了促进该过程，应该用氯化钙处理大肠杆菌，其目的是________________。
（4）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为_____________________________________________。
（5）下列有关限制性核酸内切酶的叙述中正确的是(        )
A.用限制性核酸内切酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个
B.限制性核酸内切酶识别的序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大
C.- CATG ↓-和一G↓ GATCC- -序列被限制性核酸内切酶切出的黏性末端碱基数不同
D.只有用相同的限制性核酸内切酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒

【推荐3】青霉素是由真菌分泌对抗细菌的物质，而雷帕霉素相反，是由细菌分泌对抗真菌的物质：请回答下列问题：
(1)细菌与真菌在结构上的主要区别是__________；培养细菌时，需将pH调至_____________
(2)从土壤中分离和提纯能分泌雷帕霉素的细菌，实验流程为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养
①选择培养的目的是_________；选择培养使用的是_________(填“固体”或“液体")培养基。
②该处鉴别培养时，可依菌落特征进行鉴定，菌落特征包括________________(答出2点即可)。利用菌落特征能够鉴定特定微生物的原因是__________________。
(3)为进一步研究雷帕霉素的作用，请提出一个值得探究的课题名称：_______________。