科研人员把猪卵母细胞进行人为的孤雌激活处理,使其发育成胚胎,将胚胎移植到代孕母猪体内,获得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆猪。这种克隆猪不同于核移植获得的克隆猪,现将两种技术进行比较。(1)孤雌生殖克隆猪仍然是二倍体生物,但可能由于缺失____ 方亲本基因,其生长发育中出现多种问题。
(2)核移植之前的体细胞需要进行培养,通常将它们置于含有____ 的CO2培养箱中进行。
(3)核移植技术中也会用到卵母细胞,使用____ 处理良种母猪,使其超数排卵,收集并选取____ 期的卵母细胞,并用微型吸管吸出____ 。
(4)早期胚胎移植时,必须移植到同种且____ 相同的其他雌性动物子宫中,才可能获得成功。胚胎移植前,形成多个胚胎需通过____ 技术,以进一步增加胚胎的数量。从免疫学角度分析,早期胚胎能够在受体内存活的主要生理基础是____ 。
(2)核移植之前的体细胞需要进行培养,通常将它们置于含有
(3)核移植技术中也会用到卵母细胞,使用
(4)早期胚胎移植时,必须移植到同种且
更新时间:2024-05-05 18:20:23
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【推荐1】乳腺癌细胞与雌激素受体α(ERa)之间存在密切的关系。ERa是一种核受体超家族成员,介导雌激素的多向效应,在乳腺发育和生理过程中起着重要作用。在乳腺癌中,ERa的表达与肿瘤细胞的增殖、分化和存活密切相关。雌激素通过与ERa结合,可以激活受体并调控一系列基因的表达,从而促进肿瘤细胞的生长和繁殖。回答下列问题:
(1)体外培养人乳腺癌细胞时,需要定期更换培养液,该处理的用途有___ 。
(2)进行贴壁生长时,人的正常乳腺细胞和人的乳腺癌细胞中,不会出现多层细胞的是___ ,原因很可能是___ 。在进行动物细胞原代培养前,可用___ 的方法获得单个细胞,培养过程中传代培养指的是___ 。
(3)请根据题中信息推测,患乳腺癌的男性体内可能有___ (答出1点即可)。
(4)为了验证雌激素会促进人乳腺癌细胞的增殖,可选择的实验材料有已知细胞密度的人乳腺癌细胞悬液、生理盐水、无水乙醇,适宜浓度的雌激素溶液(溶剂为无水乙醇)等。请简要写出实验思路:___ 。
注:添加物对培养液的渗透压的影响可以忽略不计;用增殖率反映癌细胞活性,具体检测方法不作要求。
(1)体外培养人乳腺癌细胞时,需要定期更换培养液,该处理的用途有
(2)进行贴壁生长时,人的正常乳腺细胞和人的乳腺癌细胞中,不会出现多层细胞的是
(3)请根据题中信息推测,患乳腺癌的男性体内可能有
(4)为了验证雌激素会促进人乳腺癌细胞的增殖,可选择的实验材料有已知细胞密度的人乳腺癌细胞悬液、生理盐水、无水乙醇,适宜浓度的雌激素溶液(溶剂为无水乙醇)等。请简要写出实验思路:
注:添加物对培养液的渗透压的影响可以忽略不计;用增殖率反映癌细胞活性,具体检测方法不作要求。
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【推荐2】供体器官短缺是限制器官移植的重要因素,而异种器官移植会存在内源病毒跨种传播、免疫排斥等问题。某科研团队对猪的成纤维细胞进行了基因编辑,根除了猪细胞中所有内源性逆转录病毒(PERVs)的活性后,再通过核移植技术成功获得了第一批“无毒”的克隆猪,基本流程如下图所示。请回答下列问题:
(1)对猪的成纤维细胞进行体外培养时,一般使用____________ (填“固体”或“液体”)培养基,除了细胞需要的营养物质外,通常还需要添加____________ 等天然成分。同时为了维持培养液的pH,需要提供的气体环境是____________ 。
(2)收集猪的卵母细胞,并选取处在____________ 期的卵母细胞用于核移植,③过程常通过____________ (物理方法)进行激活,使其完成分裂和发育进程。
(3)体细胞的细胞核必须被移植到去核卵母细胞后才能表现出全能性,原因主要是____________ 。
(4)该批“无毒”猪的器官直接用于人体器官移植会产生免疫排斥,为了解决这一问题,请你提出合理的改造方案:____________ 。
(1)对猪的成纤维细胞进行体外培养时,一般使用
(2)收集猪的卵母细胞,并选取处在
(3)体细胞的细胞核必须被移植到去核卵母细胞后才能表现出全能性,原因主要是
(4)该批“无毒”猪的器官直接用于人体器官移植会产生免疫排斥,为了解决这一问题,请你提出合理的改造方案:
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【推荐3】人绒毛膜促性腺激素(HCG)是妊娠后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于检测早孕。图甲是抗HCG单克隆抗体的制备流程示意图,其中X、Y表示细胞,a~f表示操作过程。图乙是医学上定量检测抗原的双抗体夹心法原理示意图,需先将抗体固定并与受检抗原结合形成复合物,再加酶标抗体和底物,加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检抗原的量直接相关,根据颜色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,从而使测定方法达到很高的敏感度。回答下列问题:
(1)动物细胞工程的基础是______ 。动物细胞融合是指______ 。
(2)a过程中培养的Y细胞是______ 。气体环境中CO2的主要作用是_______ 。
(3)d过程一般在多孔细胞培养板中进行:一般先将细胞悬浮液稀释到7~10个细胞/mL,再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液,其目的是__________ 。
(4)若现有三种抗HCG单克隆抗体,分别记为A、B、C,为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法,科研人员需要进行______ 组实验,检测并比较各组实验的产物量,以便得出结论。用双抗体夹心法检测抗原数量,酶标抗体的作用是______ 。
(1)动物细胞工程的基础是
(2)a过程中培养的Y细胞是
(3)d过程一般在多孔细胞培养板中进行:一般先将细胞悬浮液稀释到7~10个细胞/mL,再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液,其目的是
(4)若现有三种抗HCG单克隆抗体,分别记为A、B、C,为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法,科研人员需要进行
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【推荐1】作为实验中重要的模式动物,小鼠与人类在基因水平上高度同源,其生理生化指标及体内调控机制和人类相同或相似,因此常用于人类某些疾病的研究。研究人员欲以小鼠为实验材料,将细胞核移植技术与干细胞技术相结合,培养所需要的细胞、组织或器官,其部分实验过程如图所示。请回答下列问题:(1)干细胞包括胚胎干细胞和____ ,后者具有____ 性,只能分化成特定的细胞或组织。
(2)体外培养胚胎干细胞时所需气体主要有____ ,前者是细胞代谢所必需的,后者的主要作用是____ 。培养胚胎干细胞的培养液要定期更换,目的是____ 。
(3)图中的X 细胞通常为____ 。培养重构胚时,需将其进行激活,激活的目的是____ 。
(4)将细胞核移植技术与干细胞技术相结合,培养所需要的细胞、组织或器官,其意义有____ (答出点)等。
(2)体外培养胚胎干细胞时所需气体主要有
(3)图中的X 细胞通常为
(4)将细胞核移植技术与干细胞技术相结合,培养所需要的细胞、组织或器官,其意义有
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【推荐2】如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程,请据图回答下列问题。
(1)克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比,特有的技术手段是__________ 。两种动物繁殖的方式相比,实质性的区别为前者是_____________ ,后者是_____________ 。
(2)一般用_____________ 激素对供体母牛做超数排卵处理。
(3)为了提高胚胎的利用率,可以采用______________ 技术处理早期胚胎,如果选择囊胚阶段的早期胚胎,在分割时需要注意_____________________ 。
(4)如果培育转基因荷斯坦奶牛,可采用____________ 技术将药用蛋白基因导入到受精卵中,并采用__________________ 技术检测受体细胞中的染色体DNA上是否插入了目的基因。
(1)克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比,特有的技术手段是
(2)一般用
(3)为了提高胚胎的利用率,可以采用
(4)如果培育转基因荷斯坦奶牛,可采用
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【推荐3】随着生物科学技术的发展,胚胎工程的应用日益广泛,动物的繁殖方式变得越来越多样化。下图是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法,回答下列相关问题:
(1)方法Ⅰ中要用促性腺激素对供体母牛进行_________________ 处理,对D牛要进行_________________ 处理,在受精之前要对精子进行_________________ 处理。
(2)受精卵在体外进行培养时,需将受精卵移入发育培养液中继续培养,目的是检查受精状况和受精卵的发育能力,此时培养液中应加入适量_________________ 来防止杂菌污染。胚胎移植应在胚胎发育到_________________ 阶段进行移植,暂不移植的胚胎可使用_________________ 方法保存。
(3)因早期胚胎处于_________________ 状态且受体母牛子宫在特定阶段对外来胚胎没有_________________ 反应,所以胚胎移植可以在不同牛之间进行。获取试管牛E的过程涉及的胚胎工程技术有_________________ (答3个)。
(1)方法Ⅰ中要用促性腺激素对供体母牛进行
(2)受精卵在体外进行培养时,需将受精卵移入发育培养液中继续培养,目的是检查受精状况和受精卵的发育能力,此时培养液中应加入适量
(3)因早期胚胎处于
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【推荐1】研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞(只有一个染色体组),成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示,请分析回答下列问题:
注:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种识别序列均不相同的限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置:Ampr是氨芐青霉素抗性基因,Neor是G418抗性基因。
(1)利用PCR技术可以扩增目的基因,PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,还应含有________ ;引物应选用下图中的________ (填图中标号)。
(2)在基因工程操作步骤中,过程①②称为________ 。已知氨芐青霉素不能有效杀死小鼠细胞,而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测,过程①选用的2种限制酶是________ (填图中编号),③处的培养液应添加________ (填“氨芐青霉素”或“G418”)。
(3)细胞乙与________ 类似,图中桑椹胚需通过________ 技术移入代孕小鼠子宫内继续发育,进行该操作前需对受体小鼠进行________ 处理。
注:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种识别序列均不相同的限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置:Ampr是氨芐青霉素抗性基因,Neor是G418抗性基因。
(1)利用PCR技术可以扩增目的基因,PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,还应含有
(2)在基因工程操作步骤中,过程①②称为
(3)细胞乙与
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【推荐2】人乳铁蛋白(hLF)具有多种生理功能,被认为是一种极具开发潜力的食品添加剂。下图某食品公司利用乳腺生物反应器生产hLF的过程。回答以下问题:
(1)要从hLF乳腺表达载体中获取目的基因并使之成功表达生产hLF,使用的限制酶最佳是____ 。将目的基因导入成纤维细胞中一般应用的技术是____ 。
(2)成纤维细胞培养液中添加H2PO4-、HPO42-和HCO3-的作用是____ 。在导入目的基因之前,成纤维细胞需用____ 处理使之分散成单个细胞。
(3)在核移植过程中,先将采集到的卵母细胞体外培养到____ 期后去核,再将成纤维细胞从切口注射到卵周隙内,使用电刺激或化学方法促进____ ,形成重构胚。
(4)在获取卵母细胞和胚胎移植前要注射促卵泡生成激素或氯前列烯醇等性激素。对供卵母羊注射促卵泡生成激素等激素,其目的是____ ;对受体母羊(代孕羊)注射氯前列烯醇,其目的是____ 。
(5)为检验乳腺生物反应器是否成功,研究人员进行了抑菌实验。其结果如下:
①组别4滤纸上的物质是____ 。
②与人的hLF相比,乳腺生物反应器生产的hLF抑菌效果____ 。
(6)为确保转基因产品的安全性,该食品公司后阶段应进行的工作是____。
(1)要从hLF乳腺表达载体中获取目的基因并使之成功表达生产hLF,使用的限制酶最佳是
(2)成纤维细胞培养液中添加H2PO4-、HPO42-和HCO3-的作用是
(3)在核移植过程中,先将采集到的卵母细胞体外培养到
(4)在获取卵母细胞和胚胎移植前要注射促卵泡生成激素或氯前列烯醇等性激素。对供卵母羊注射促卵泡生成激素等激素,其目的是
(5)为检验乳腺生物反应器是否成功,研究人员进行了抑菌实验。其结果如下:
组别 | 1 | 2 | 3 | 4 |
滤纸上物质 | 0.4万IU青霉素 0.25万IU链霉素 | 人乳清(浓缩20倍) | 转基因羊乳清(浓缩20倍) | ?(浓缩20倍) |
抑菌圈直径(cm) | 2.2 | 1.9 | 1.7 | 无 |
②与人的hLF相比,乳腺生物反应器生产的hLF抑菌效果
(6)为确保转基因产品的安全性,该食品公司后阶段应进行的工作是____。
A.实施转基因产品标识 |
B.进行食用安全性评估 |
C.检测转基因羊乳成分 |
D.鉴定基因是否稳定遗传 |
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【推荐3】回答胚胎工程和基因工程的实际应用相关的问题:
(1)试管婴儿技术为某些不育夫妇带来了福音,试管婴儿技术的最后一道操作是______ ,该操作的实质是________________________ 。
(2)PCR技术可用于临床的病原菌检测。利用PCR扩增DNA片段的酶与细胞内的酶相比的主要特点是______ 。
(3)生产基因工程药物时通常用细菌中的质粒作为______ ,而选择细菌作为受体细胞的原因可能是________________________ (写两点)。
(4)重组人生长激素是通过基因重组大肠杆菌分泌型表达技术生产的。获取生长激素基因后,构建基因表达载体时要在生长激素基因前连接上相应的启动子,其目的是________________________ ,生长激素基因在导入大肠杆菌之前,一般先用Ca2+处理细胞,其目的是________________________ 。
(1)试管婴儿技术为某些不育夫妇带来了福音,试管婴儿技术的最后一道操作是
(2)PCR技术可用于临床的病原菌检测。利用PCR扩增DNA片段的酶与细胞内的酶相比的主要特点是
(3)生产基因工程药物时通常用细菌中的质粒作为
(4)重组人生长激素是通过基因重组大肠杆菌分泌型表达技术生产的。获取生长激素基因后,构建基因表达载体时要在生长激素基因前连接上相应的启动子,其目的是
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【推荐1】下图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程;图2表示培育优质奶牛的过程。请据图回答下列问题:
(1)图1所示过程所用的生物技术有_________ 和_________ ,将特定的抗原注入小鼠,需在一定时间内间隔注射3次以上,其目的是_______________ 。
(2)将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中,至少要进行两次筛选,一次是通过_________ 培养基,筛选出杂交瘤细胞,另一次是通过_______ 检测,筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。
(3)通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别抗原X,其原因是该抗体具有_____________________ 的特点。
(4)培养杂交瘤细胞的培养基提供气体条件CO2的作用___________ ,杂交瘤细胞体外培养过程中,为避免细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害,常采取的措施是__________ 。
(5)图2中的早期胚胎发育到___________ 阶段才可以移植,在移植之前,需要进行质量检查,用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时,发现活胚胎细胞不能被染色,其原因是_________ 。为了获得多个基因型相同的优质奶牛,可采用的技术手段是___________ 。
(1)图1所示过程所用的生物技术有
(2)将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中,至少要进行两次筛选,一次是通过
(3)通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别抗原X,其原因是该抗体具有
(4)培养杂交瘤细胞的培养基提供气体条件CO2的作用
(5)图2中的早期胚胎发育到
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【推荐2】通过胚胎工程培育良种奶牛,对增强我国畜牧产业竞争力十分重要。下图是利用不同技术培育良种奶牛的过程。回答下列问题:
(1)自然条件下,公牛的精子必须在母牛的生殖道发生相应的生理变化后,才能获得受精能力,这一生理现象称为_____________ 。经过a过程形成受精卵,经历的两个阶段是___________ 。
(2)受精卵经过b过程后,若采用c技术培育,则一般选用发育到___________ 阶段的胚胎进行处理,处理时应注意将[③]___________ 均等分割,以免影响___________ 。
(3)d过程称为___________ ,此过程胚胎在母牛子宫内存活的生理基础是___________ 。
(4)图示不同操作流程培育出的良种奶牛中,属于“试管牛”的是____________ 牛(选填“A、B”或“C”)。
(1)自然条件下,公牛的精子必须在母牛的生殖道发生相应的生理变化后,才能获得受精能力,这一生理现象称为
(2)受精卵经过b过程后,若采用c技术培育,则一般选用发育到
(3)d过程称为
(4)图示不同操作流程培育出的良种奶牛中,属于“试管牛”的是
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【推荐3】如图是利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程。请据图回答下列问题:
(1)Ⅰ、Ⅱ过程均用到的技术有_______________ (至少答一个)。
(2)Ⅰ过程中,诱导细胞融合后,需经________ 培养基筛选出杂交瘤细胞。接着进行多次_______ 培养和_________ 检测,筛选得到能产生所需抗体的A细胞。最终提取到的单克隆抗体具有________________________________________________ 优点。
(3)Ⅱ过程中,常用_______________ 激素处理雌性动物,使其排出更多的卵子。在体外受精前,一般用_______________ 方法使精子获能;采集的卵母细胞则需要在培养到_______________ ,才具备受精的条件。
(4)为提高胚胎利用率,可采用____________ 技术获得多个__________ 相同的胚胎。对图Ⅱ所示的胚胎进行操作时,应注意将______________________________ ,否则会影响处理后胚胎的恢复及进一步发育。
(1)Ⅰ、Ⅱ过程均用到的技术有
(2)Ⅰ过程中,诱导细胞融合后,需经
(3)Ⅱ过程中,常用
(4)为提高胚胎利用率,可采用
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