【推荐1】结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病。结核分枝杆菌的细胞壁厚脂质含量高，能抵御不利自然环境，在干痰中可存活6-8个月，若黏附于尘埃上可保持传染性8-10天。人体被感染后结核分枝杆菌可侵犯全身各组织器官，但以肺部感染最多。
1．根据病原菌在体内的感染部位，推测结核分枝杆菌的代谢方式是________。

A．异养厌氧型

B．自养厌氧型

C．自养好氧型

D．异养好氧型

为探究不同抗生素对结核分枝杆菌的抑菌效果，研究者从悲者体内提取的病原菌进行培养。培养结核分枝杆菌的培养基主要含有天门冬氨酸、甘油、鸡蛋黄（富含脂肪、蛋白质和维生素）、KH₂PO₄、MgSO₄等。
2．此培养基成分中既能作为碳源同时提供生长因子的是_______________。
将分离得到的结核分枝杆菌进行增殖培养后，取细菌培养液2滴涂布于固体培养基上，然后将浸有相同浓度不同种类的抗生素圆纸片置于培养基表面，37℃培养4周，实验结果如图一，图二是细菌结构示意图，图中箭头表示不同抗生素的作用位置。

3．欲得到如图一实验结果，接种过程用到的实验器材有_______。

4．实验中圆纸片D用作实验对照，对圆纸片D的处理方法是_______________。
5．根据实验结果，说明圆纸片周围清晰区大小与抗生素抑菌效果的关系：______________。请从抗生素对细菌产生的作用解释圆纸片C周围清晰区大于圆纸片A和B的原因________________。

【推荐2】某生物小组的同学用如图所示的装置培养乳酸菌。请回答下列问题：

（1）实验室中可用番茄汁来培养微生物。将番茄汁过滤并进行______处理，冷却后接种乳酸菌。番茄汁为乳酸菌提供的基本营养物质有______。向培养基中加入的琼脂的作用是______。
（2）密封玻璃罐前先将蜡烛点燃，原因是______。
（3）研究小组筛选了2种可在pH=3．0条件下生长的乳酸菌菌株进行产酸能力研究，并提取发酵液研究了这2种乳酸菌对金黄色葡萄球菌的抑制作用。实验结果见表：

编号	pH	酸度（ °T）	抑菌圈直径（ mm）
菌株 DJ3	3．69	179．1	21．33
菌株 DJ4	4．30	109．7	17．72
乳酸溶液	3．70	176．4	17．92
乳酸溶液	4．31	109．5	15．69
空白对照	6．60	15．4	8．64

产酸能力较强的菌株是______，原因是_________________。根据实验数据分析，乳酸菌发酵液的抑菌机制可能是______。

【推荐3】西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌侵染根系引发的真菌病害。研究人员拟筛选对尖孢镰刀菌有抑制作用的生物防治菌。
(1)从发病植株根部土壤取样制成土壤悬液，接种至培养基培养，得到多种可能对尖孢镰刀菌有抑制作用的待测菌。从分子水平和群体水平区分这些菌株的方法分别是：分子水平的方法为_____，群体水平的方法为_______（各答1点即可）。
(2)选取某一菌落（SFI）用适宜浓度的培养液制成菌液后进行抑菌实验。将尖孢镰刀菌置于平板中央，在与平板中央等距的3点处打孔，孔中接种适量SFI菌液，对照组应接种______。实验结果如图1所示，本实验的结果与结论为____。

(3)研究人员推测SFI可能通过分泌某些蛋白酶和葡聚糖酶发挥抑菌作用，为验证此推测，将SFI菌液分别接种在布满尖孢镰刀菌并以蛋白质为唯一氮源和以______（填成分）的培养基上，观察菌落周围情况，结果如图2.

进一步探究SFI是否具有降解有机磷、难溶钾能力以及对幼苗生长的影响。用含______的培养液培育西瓜幼苗，实验组接种2mLSFI菌液，测量培养液中的水溶性磷和钾（降解产物）。若_____说明SFI有降解有机磷和难溶钾的能力。
(4)根据（3）的实验测量幼苗茎长，结果如图3.已知尖孢镰刀菌的侵染毒力与其细胞壁组分中的葡萄糖和糖蛋白相关。综合本题信息，推测SFI对尖孢镰刀菌发挥抑制作用、影响植物生长的机制是______。

【推荐1】下图是培养耐盐植株的实验流程，回答下列问题。

(1)在一定的______等条件的诱导下，已经分化的细胞可以经过脱分化，即失去特有的结构和功能，转变为未分化的细胞，进而形成__________，称为愈伤组织。
(2)将愈伤组织经再分化形成根芽的过程一般____（填“不需要”或“需要”）提供光照，原因是____________。用射线处理愈伤组织而不直接处理茎段的原因是_________，处理2中添加的物质X为__________。
(3)培育脱毒苗时，一般选择植物的_________进行组织培养，理由是_______。
(4)利用植物体细胞杂交技术也能培育耐盐植株，该技术的原理是____________，意义是___________。
(5)无菌技术也是成功诱导出耐盐植株的重要因素，下列各项中用化学药剂进行消毒的是_____，采用灼烧方法进行灭菌的是________。（两空均填序号）。
①培养皿 ②培养基 ③实验操作者的双手 ④三角锥形瓶 ⑤接种环 ⑥茎段

【推荐2】苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题:

(1)②中培养目的菌株的培养基中应加入____ 作为碳源，如果要测定②中活细菌数量，常采用____法.
(2)采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养?____。
(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小?____。
(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染?（至少答出2点）____。

【推荐3】孔雀石绿（简称MG）是广泛使用的有机染料，在自然环境中极难降解，容易引起土壤污染，进而危害人体健康。因此从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶解度低，含过量MG的固体培养基不透明。

(1)培养基的配制：MG降解菌富集培养基需含有NaH₂PO₄、KH₂PO₄、NaCl、NH₄Cl、CaCl₂、MgSO₄、水等，再加________作为唯一碳源。培养基配制好后，需用____________________法进行无菌处理才能后续使用。
(2)MG高效降解菌株的富集：如图所示，将1.0g土样接入含上述配制好的培养液的三角瓶中，将三角瓶置于30℃、180r/min摇床中振荡培养1-2天，此操作的目的是________________，直至培养液变浑浊后，换瓶重复操作2-3次，以达到富集的目的。
(3)MG高效降解菌株的分离和纯化：图中所示的分离纯化细菌的方法是________________，该方法统计结果往往比实际值偏小的原因是______________________。实验中初步估测A中细菌细胞数为1.5×10⁹个/mL，若要在图中每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且每个平板上长出的菌落数约为150个，则应将A中的菌液稀释__________倍。
(4)MG高效降解菌株的鉴定：将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基（其他营养成分等适宜）上，根据培养基是否出现__________________，就可以鉴别出目的菌株，原因是____________。
(5)MG高效降解菌株的保存：获得纯净的菌种后，需要进行菌种的保藏。若需长期保存，可以采用______________的方法。

【推荐1】据报道，书本上分布大量的微生物。某科研人员通过实验调查书页上微生物的种类和数量，结果如下图所示。回答下列问题：

   

(1)该实验利用牛肉膏蛋白胨培养基来培养微生物，牛肉膏提供的主要营养是___________等，蛋白胨提供的主要营养是___________等。
(2)该科研人员采取的接种方法是________，该方法使用的接种工具是____________。
(3)该科研人员实验时，宜选取菌落数目稳定时的记录作为结果，理由是___________，可根据____________来判断微生物的种类。
(4)该科研人员用消毒棉签取一页书上微生物，配成10mL菌液，并对其进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释一定倍数的样品接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数并经计算平均为124，经计算该菌液中微生物的数量为1.24×10⁵个，则所取样液的稀释倍数是_________。

【推荐2】某生态研究小组为了从纤维素分解菌中获取纤维素酶，以便将农作物秸秆作为酿酒工业的原料，设计了如下操作流程分离提取较纯的纤维素分解菌。请分析回答问题:

①土壤取样→②选择培养→③梯度稀释→④将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上→⑤挑选菌落
(1)纤维素分解菌选择培养的培养基中添加的碳源为________________；除了碳源外，培养基中还应该含有的营养成分有________________________________ 。
(2)图甲所示接种方法主要用于 ____________________________，该方法不能用于测定菌体的数目，其原因主要是许多菌落并不是由______________________________形成的。
(3)图乙中的培养对应于流程图中步骤__________(填写序号)。
(4)若选择培养后预估锥形瓶中细菌细胞数为2×10⁷个/mL，若要在鉴别平板上涂布0．1ml稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将锥形瓶中的菌液稀释_________倍。在鉴别培养基中含有KH₂ PO₄和Na₂ HPO₄，其作用是①_________________________；②_______________________________。
(5)图乙中出现的无透明带的菌落，其代谢类型最可能是______________。
(6)流程图中步骤⑤的操作中，应挑选产生了__________________的菌落。

【推荐3】酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素，以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题：
(1)从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，该培养基属于_________培养基。该培养基的氮源来自______，碳源是__________。

海藻酸钠质量浓度（g/dL）	凝胶 强度	凝胶 气泡量	成球 难度	凝珠 形状
1．0	中	没有	较易	扁圆形
2．0	中	少量	易	圆球形
3．0	强	较多	稍难	有托尾
4．0	强	大量	难	难成球形

(2)筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是_________和_________。配制浓度梯度为10^-1的系列稀释液时，需用移液管将１mL菌液移入盛有_________mL蒸馏水的试管中。
(3)对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量________（多于／等于／小于）后者，其原因是_________。
(4)若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入_________溶液中。右表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用______g/dL。若利用固定化酶技术，它的优点是__________。

【推荐1】微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题：

(1)已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是____。依照物理性质划分，驯化培养基属于____培养基，其中蛋白胨可提供____（至少答两点）。
(2)用于筛选的样品应来自____的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为____。
(3)将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的培养基C，培养24小时后，通过测定培养基中____，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了4个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、312、253，测得培养基C中菌落数为1.25×10⁷个/mL，则涂布的菌液Y为____mL。该统计数据往往比活菌的实际数目____（填“多”或“少”），理由是____。

【推荐2】国家生活饮用水卫生标准（GB 5749-2006）规定：接种1mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，经37℃、24h培养后，所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题：
（1）用无菌三角瓶取水样前，水龙头需使用酒精棉擦拭消毒后，再通过_________灭菌。取水前的无菌操作的目的是______________。
（2）该小组通过滤膜法测定细菌总数，将10mL的水样进行过滤后，将滤膜放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养，培养时应将平板倒置，其原因是__________。所用培养基中的牛肉膏除为微生物提供碳源和氮源外，还能提供磷酸盐和_________。在培养过程中，不同时间所观察到的平板上菌落特征的差异有_____________（至少写出两点）。
（3）经过24h培养，结果如下表：

	平板1	平板2	平板3
菌落数（个）	41	35	38

据上表结果判断，所取水样测定结果_____(填“符合”或者“不符合”)饮用水的标准。
（4）该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目，可将滤膜放在__________培养基上，计算培养基上______（颜色）菌落的数目。

【推荐3】2018年世界燃料乙醇产量已接近1000亿升，丰富且不可食用的各种植物纤维素被作为潜在原料用于乙醇生产，下表为某生物兴趣小组的同学在培养纤维素分解菌时制定的培养基组分。请回答下列问题：

纤维素粉	NaNO3	KH2PO4	Na2HPO4•7H2O	MgSO4•7H2O	KC1	酵母膏	水解酪素
5g	1g	0.9g	1.2g	0.5g	0.5g	0.5g	0.5g

(1)用该培养基来富集培养纤维素分解菌，该培养基缺少的营养成分是____，该培养基的配制____（填“需要”或“不需要”）加入琼脂。
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×10⁷个/mL，若要在每个平板上涂布0.1 ml稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释____倍。在鉴别纤维素分解菌时常采用刚果红染色法，接种并培养后，一般选择____的菌落作为进一步筛选鉴定的菌种。
(3)利用纤维素分解菌处理可回收垃圾中的废旧纸张以及棉麻衣物等，可将其中的纤维素转化成葡萄糖。纤维素酶是一种复合酶，包括____。如果要将纤维素分解菌中的纤维素酶提取与分离，一般要经历四个步骤，即样品处理、____和纯度鉴定。
(4)如果用固定有酵母细胞的凝胶珠发酵产酒，发酵温度应为____℃；明胶、琼脂糖、海藻酸钠等物质常常作为包埋细胞载体的原因是____。