【推荐1】高浓度的铵盐对海水养殖中的对虾有一定的毒害作用，是制约其大规模养殖的环境因素之一，具有高降解能力的硝化细菌可有效净化水体中的铵盐，降低对虾的死亡率。科研人员从当地对虾养殖池塘中筛选出对铵盐降解率高且稳定的硝化细菌菌株，将等量的三种候选菌甲、乙、丙分别接入等浓度的含铵盐培养液中，在适宜条件下培养一段时间后检测培养液中的铵盐浓度，操作流程如图1所示。回答下列问题：

(1)为了筛选出实验所需的硝化细菌，在配制选择培养基时，需要以____为唯一氨源。为了防止杂菌污染，接种工具需要严格灭菌，并需要在超净工作台上____旁进行操作。
(2)图1中M培养基上进行的是利用____纯化菌种，该过程中接种工具需要灼烧____次。
(3)若用稀释涂布平板法对细菌进行计数时，所统计的菌落数往往会比实际数目偏小，原因是____。在5个平板上各接种稀释倍数为10³的菌液样品0.1mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为28、50、52、54、313，则每升原菌液样品中细菌数为____个。
(4)将筛选出的等量的三种候选菌甲、乙、丙，分别接人铵盐浓度为40mg·L^-1的模拟养殖污水中，在适宜条件下培养48h，结果如图2。据图分析，应选择候选菌____（填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养。

【推荐3】与普通洗衣粉相比，加酶洗衣粉能更有效地清除顽渍，同时减少对环境的污染，因此非常受人们的欢迎。请分析回答下列有关问题：
（1）使衣物上的血渍、奶渍容易脱落主要是加酶洗衣粉中的_______酶起作用，原因___________。
（2）目前使用的加酶洗衣粉都是一次性的。某大型洗涤公司为降低成本，他们采用一种技术将酶固定在不溶于水的某种载体上，经这种方法制成的酶叫_________。该方法的优点是_____________。
（3）加酶洗衣粉中的淀粉酶可以从霉菌中提取，用___________（物理性质）培养基分离、纯化，常用的接种方法是_________。土壤中有很多微生物能分泌淀粉酶，在分离这些微生物的过程中，培养基应该以_________作为唯一碳源。
（4）洗衣粉除了可以加酶外，还可加入香精。高档洗衣粉中的香精是由植物芳香油制成的，从植物中提取易挥发且化学性质稳定的芳香油，常用的提取方法是__________________。

【推荐1】Gateway克隆技术是一种快速，高效地构建基因表达载体的方法。这种方法基于，噬菌体可以和大肠杆菌DNA的特定位点发生互换的特点设计，不用依赖限制酶，而靠载体上存在的特定重组位点和克隆酶，将目的基因克隆到其它的受体载体上。如图所示，Gateway克隆技术依赖于BP反应和LR反应，通过BP反应将目的基因连接到质粒1上，获得克隆质粒2，再通过LR反应将目的基因连接到载体质粒3上，获得表达载体。请回答下列问题：

(1)构建的基因表达载体除含有图示的目的基因和标记基因外，还必须有___________。
(2)为构建基因表达载体，需先设计引物，通过PCR特异性扩增目的基因，用于扩增目的基因的引物需满足的条件是___________，为使PCR产物能参与后续交换，需要分别在2种引物上添加相应的attB1和attB2序列，该序列应添加在引物的___________（填3′端”或5′端”）。
(3)BP反应中，将带有atB1和attB2序列的目的基因与质粒1混合，加入BP克隆酶，atB和attP位点之间会发生互换。该反应体系中可能含有未交换的质粒1和交换后的质粒2，为从体系中筛选出质粒2，用混合体系中的质粒分别转化用Ca²⁺处理后的大肠杆菌，并涂布到含有青霉素的平板上。理论上，在平板上长出菌落的大肠杆菌中含有的质粒即为质粒2，理由是___________。
(4)除本题所用接种方法外，也可以采用___________法进行接种，若培养结果如图所示，接种环节需灼烧接种环___________次。

(5)若将（3）中获得的含质粒2的大肠杆菌进行扩大培养，从物理性质考虑，一般采用___________培养基。

【推荐2】[生物——选修1：生物技术实践]啤酒的质量、口感与生产过程中起发酵作用的酵母菌的数量、品种有非常重要的关系。请回答下列问题：
（1）从自然环境中获得的酵母菌中筛选优良品种时，所使用的培养基是______（物理性质），培养基应该含有的营养物质包括：______（填写5种）。
（2）发酵生产过程中，要定时检测酵母菌的密度。菌落计数时，样液往往要先进行______，然后再涂布平板。每一浓度一般涂布____个平板，其目的是____。也可以显微镜直接计数，但结果较菌落计数的结果____（偏大或相当或偏小），为什么？______。

【推荐3】“且就洞庭赊月色，将船买酒白云边”。李白留下的这一脍炙人口的千古绝句经常在中央电视台播出。我市松滋特产、湖北名酒、誉满全国的“白云边酒”是以水、高粱、小麦为原料，通过固态发酵而成。大家公认的环境中存在的独特微生物是酿制其独特品质的关键因素之一。为了提取环境中的独特菌种，某高中学校生物研究性学习小组以优质的高粱和小麦为原料，制作培养基，搜集、分离空气中的微生物。请回答下列问题:
（1）该培养基在接种微生物前，必须先进行___________________灭菌。
（2）将上述培养基暴露在空气中培养一段时间后，取10g该培养基用无菌水制成100mL样品溶液。再将样品溶液稀释10⁴倍后，各取样品溶液0. 1mL，在5个培养基平板上接种。培养一段时间后，平板上长出的微生物菌落数分别为13， 156， 462， 178和191。该过程采取的接种方法是____________。每克培养基样品中的微生物数量是__________________个。
（3）与用血细胞计数板记数相比，该计数方法测得的微生物数目要低。其原因是_______。
（4）酿酒的主要微生物将葡萄糖分解为酒精的酶存在于___________ 。其生产酒的总反应式可表示为__________________________。
（5）为了研究发酵罐中酿酒微生物的生长情况，常要取样统计分析，并测定pH。若某同学未将取样的样品贴上标签，那么，确定取样样品顺序的主要依据是_______________。

【推荐1】酿酒酵母被称为啤酒酵母，最早人们利用它进行啤酒和面包的工业化生产，后来人们从葡萄酒中分离培养出不同的菌株，进一步将其分为果酒用酵母、啤酒用酵母等不同类别。酿酒酵母的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酿酒酵母菌株，进行了下图实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，灭菌条件相同。

(1)制备培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的pH，及时对培养基进行分装，并进行______灭菌。
(2)图一中所用的分离产酒精能力强的酿酒酵母菌株的方法是_______。
(3)通过计算得出葡萄酒过滤液每L的活菌数为______个，用这种方法统计的结果往往较实际值______，原因是_____。
(4)图二中丙瓶出现的现象是_______，原因是_______。
(5)图二中乙瓶和丁瓶哪一瓶中的酿酒酵母产酒精能力强？_______。原因是______。

【推荐2】酿酒过程操作不慎，所酿的酒可能变酸，请分析并回答下列问题：
(1)酿酒需要的微生物是____，产生的酒精来源于____。
(2)变酸的酒表面观察到的菌膜是由____在液面大量繁殖形成的。若要对该菌进行初步分离纯化，采用平板划线法将其接种到____（填“固体”或“液体”）培养基上，经培养得到肉眼可见的____。
中国杏树的栽培已有两千年以上的历史，但人们对杏果的利用一直停留在鲜食果肉或杏仁上。研究人员不断创新开发，成功酿制出杏果酒，其色泽淡黄、果香浓郁、具有一定的营养价值。请回答下列问题。
(3)在酿制杏果酒时，若要检测杏果酒中酵母菌活菌的数量，一般采用____法，此种方法最终计算得出的菌体数目往往比实际数目____（填“偏多”或“偏少”）。
(4)酿制杏果酒时，需要将温度控制在 18∼25℃，温度过高果酒容易变酸，原因是____。

【推荐3】I．下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：

成分	NaCL	K2HPO4	蛋白胨	琼脂糖	水	青霉素
含量	0.48g	0.48g	1g	2g	100mL	0.1万单位

(1)依物理性质划分，该培养基属于___________培养基；依功能划分，则属于___________培养基。
(2)依培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是___________。
(3)称2.0g某土壤样品，转入98mL无菌水中，振荡摇匀，制备成菌悬液，经___________后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌___________个。
(4)通过改造该培养基分离出土壤中能产生脲酶的微生物，则需加入葡萄糖、___________、___________，除去蛋白胨和青霉素。
Ⅱ．幽门螺杆菌（Hp）在人体内定植于胃黏膜上皮细胞的表面，并随胃黏膜上皮细胞的快速更新、脱落而脱落，随粪便排出，通过检测粪便抗原可了解有无Hp的感染。请根据所学知识进行回答：
(5)粪便抗原的检测原理是___________，对抗体进行标记或显色的方法进行检测。
(6)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有______________________。单克隆抗体的优点是：______________________。
(7)灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝集，细胞膜上的___________和___________重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
(8)对于抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3～10个/ml，每孔加入细胞稀释液0.1ml，目的是______________________。
(9)杂交瘤细胞在一个培养瓶中培养一段时间后，也会出现停止生长的现象，原因是______________________。（答出2点）
Ⅲ.回答下列关于Cu²⁺对红豆杉细胞培养及其代谢物紫杉醇形成的影响问题。
(10)对红豆杉愈伤组织进行液体悬浮培养分离出单细胞，再经成分为“MS+0.5mg/LNAA+0.5mg/LBA+25g/L蔗糖”的培养液中克隆培养获得___________。其中培养基设计为0.5mg/LNAA和0.5mg/LBA的生长调节剂配比的目的是________________。该培养过程不仅要控制好光照、温度等因素还需要控制好摇床的_____________。
(11)细胞生长指标测定：取细胞悬浮培养物经抽滤后40℃烘干处理，直至_____________为止，以其重量作为细胞生长指标。
(12)测定细胞内含物紫杉醇含量：称取10g烘干培养物，________后用甲醇浸泡96h，并测量紫杉醇含量。
(13)观察Cu²⁺对红豆杉细胞生长及紫杉醇形成的影响。

Cu2+浓度 /μmol·L-1	0	0.1	0.5	1	10	20	30	40	50	80	100
细胞生长量 /g·L-1	6.80	6.75	7.65	6.80	6.25	8.80	7.45	6.75	8.40	6.90	7.55
紫杉醇含量 /μg·L-1	0	0	12.25	15.80	17.04	18.04	24.94	16.71	14.87	6.79	9.34

在Cu²⁺0.5~30μmol·L^-1浓度范围内，紫杉醇含量随Cu²⁺浓度的关系呈____________。对照组紫杉醇含量为0的原因可能是在没有诱导因子的条件下，___________________，说明紫杉醇属于红豆杉细胞的__________产物。