【推荐1】在基因工程操作中限制性内切核酸酶是不可缺少的工具。下列关于限制性内切核酸酶的叙述，错误的是（       ）

A．不同限制酶切割后，只能产生相同的黏性末端

B．限制性内切核酸酶可以从某些原核生物中提取

C．限制性内切核酸酶的活性受温度和pH等因素的影响

D．一种限制性内切核酸酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列

【推荐2】用DNA连接酶把被限制性核酸内切酶Ⅰ(识别序列和切点是-↓GATC-)切割过的质粒和被限制性核酸内切酶Ⅱ(识别序列和切点是-G↓GATCC-)切割过的目的基因连接起来后，该重组DNA分子(如图所示)能够再被限制性核酸内切酶Ⅰ切割开的概率是 (   )

A．1

B．7/16

C．1/4

D．1/2

【推荐3】以下是几种不同限制性核酸内切酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列的叙述中, 正确的是（       ）

A．以上DNA片段是由4种限制酶切割后产生的

B．②片段是在酶切位点为的限制酶作用下形成的

C．①和④两个片段在DNA聚合酶的作用下形成的重组DNA分子

D．限制酶和DNA连接酶作用的部位都是磷酸二酯键

【推荐1】抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白，临床上主要用于血液性疾病的治疗．图为培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程．下列说法正确的是（        ）

A．过程①是基因工程的核心，常用的方法是显微注射法

B．如果要将凝乳酶的第20位氨基酸和第24为氨基酸变为半胱氨酸，直接对蛋白质分子进行操作即可

C．如果检测发现抗凝血酶Ⅲ蛋白基因被导入了受精卵，但却没有检测到抗凝血酶Ⅲ蛋白的存在，有可能是启动子和终止子没有设计好

D．培养出的转基因奶牛所有细胞都含有该目的基因，故该奶牛有性生殖产生的后代也都能产生抗凝血酶Ⅲ蛋白

【推荐2】科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。下图表示含目的基因的DNA分子和农杆菌质粒，图中Amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，Neo^R表示新霉素抗性基因，箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。下列叙述不正确的是（       ）

A．操作过程中需要用到基因工程的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体

B．为使目的基因与质粒高效重组，最好选用EcoRⅠ和PstⅠ

C．目的基因插入到质粒的T-DNA上，才能整合到受体细胞染色体中

D．成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素

【推荐3】CRISPR/Cas9是一种生物学工具，能够通过“剪切和粘贴”脱氧核糖核酸（DNA）序列的机制来编辑基因组。这套系统源自细菌的防御机制，是一种对任何生物基因组均有效的基因编辑工具。CRISPR-Cas9基因组编辑系统由向导RNA（也叫sgRNA）和Cas9蛋白组成向导RNA识别并结合靶基因DNA，Cas9蛋白切断双链DNA形成两个末端。这两个末端通过“断裂修复”重新连接时通常会有个别碱基对的插入或缺失，从而实现基因敲除，如图所示。CRISPR-Cas9基因组编辑技术有时存在编辑出错而造成脱靶。下列叙述错误的是（       ）

   

A．对不同目标DNA进行编辑时，使用Cas9蛋白和“不同”的sgRNA进行基因编辑

B．Cas9蛋白相当于限制酶，能作用于脱氧核糖和碱基之间的化学键

C．CRISPR-Cas9基因组编辑系统使细菌获得抵抗噬菌体的能力

D．可能其他DNA序列含有与sgRNA互补配对的序列，造成sgRNA错误结合而脱靶

【推荐1】研究者利用生物技术培育出了乳铁蛋白肽和人干扰素的双转基因奶牛新品种，现分别将含有乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因的DNA片段制成探针，分别与从转基因奶牛的乳腺细胞、口腔上皮细胞、蹄部细胞中提取的RNA进行杂交，结果如下表所示。下列说法错误的是（ ）

探针	乳腺细胞	口腔上皮细胞	蹄部细胞
乳铁蛋白肽基因探针	出现杂交带	未出现杂交带	未出现杂交带
人干扰素基因探针	出现杂交带	出现杂交带	出现杂交带

A．乳铁蛋白肽基因只在转基因奶牛的乳腺细胞中表达

B．人干扰素基因可在转基因奶牛的多种体细胞中表达

C．表中两种基因探针所含的脱氧核苷酸的种类不同

D．乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因都是有遗传效应的DNA片段

【推荐2】我国科学家将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入某植物，富含赖氨酸的蛋白质编码基因编码区共含678个碱基对，科学家利用了XbaⅠ和SacⅠ两种限制酶，并运用农杆菌转化法，将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入植物叶片细胞，再经植物组织培养获得转基因植株，使赖氨酸的含量比对照组明显提高，如图所示是相关培育过程，下列说法正确的是（       ）

A．重组质粒利用SacⅠ和HindⅢ切割后能得到1500 bp片段，则表明目的基因正确插入质粒

B．图中①过程采用农杆菌转化法

C．组织培养过程中，培养基需添加卡那霉素和新霉素以便筛选转基因植株

D．①过程前获得的重组质粒只需要两种工具

【推荐3】人类B型血友病属于伴X隐性遗传病，因为血液中缺少凝血因子Ⅸ导致凝血异常。下列关于对患者进行基因治疗的设计方案，正确的是（       ）

A．逆转录病毒的核酸可直接用作载体

B．需将凝血因子Ⅸ和载体连接起来

C．必须把目的基因插入到X染色体上

D．用DNA探针可进行目的基因的检测