【推荐1】有机磷农药常常因过量施用带来环境污染。某同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。回答下列问题。
（1）若需增加目的菌的浓度，需在相应的培养基中进行选择培养，培养基除了为微生物的生长、繁殖提供水和氮源外，还要提供_____________________________（答出两点）等基本营养成分；制备该培养基时应在灭菌之___________（填前或后）调整pH。
（2）将获得的等量3种待选菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷的同种培养液中（其他营养物质保持充裕，条件一直适宜）。记录实验开始到有机磷被耗尽所用的时间，甲、乙、丙耗尽培养液中有机磷的时间分别为32h、45h、16h，则应选择微生物________（填甲、乙或丙）作为菌种进行后续培养，理由是_________________________________。
（3）若要测定培养液中的菌体数，既可在显微镜下用_____________直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目。若用稀释涂布平板法计数时，某一实验组平板上菌落平均数为46个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，请分析说明空白对照组出现菌落的可能性原因：一培养基灭菌不合格，二可能是__________________ 。若将40（即46—6）个/平板作为实验组菌落数的平均值进行计算，则该做法________________（填正确或不正确）。
（4）微生物接种方法之一的平板划线接种做法，用接种环蘸取菌液，轻轻划在平面培养基上，以达到分离菌种的目的。若样品含菌量较多，应采用下图中的方法____。要完成B的操作，共需要对接种环灼烧_____次。

（5）下图为某微生物发酵自动化装置示意图。请回答下列相关问题：

①培养微生物所用的培养基，常采用________法进行灭菌。
②若利用该装置制备果醋，则“生物催化剂”指的是__________菌，若发酵液中无糖类，但有乙醇，则该发酵菌发酵获得醋酸的途径是：乙醇→________→醋酸。
③在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是__________________。
④纯化菌种时，向试管内分装含琼脂的培养基，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是____________________________________________。

【推荐2】（二）回答下列有关微生物的问题。
自生固氮菌是在土壤中能够独立进行固氮的细菌，对于增加土壤中的氮素有重要意义。某研究小组按照下列实验方案（如图）从土壤中分离自生固氮菌株。

1．下列属于自生固氮菌生物学特征的是__________。

A．具有质膜和核糖体	B．厌氧型细菌
C．所需能量由自身的线粒体提供	D．单细胞真核生物

2．按功能分，Ⅰ号培养基称为__________培养基；该培养基中应有的营养成分（仅列出了碳氮源）为___________。

A．葡萄糖、硫酸铵

B．葡萄糖

C．牛肉膏、蛋白胨

D．牛肉膏

3．从配制培养基到制备平板的过程中，不需要的是__________。

A．酒精灯

B．接种环

C．灭菌锅

D．玻璃棒

4．接种后的平板放在28℃恒温箱培养3-4天，通过观察__________的特征可统计自生固氮菌的种类，但培养时间不宜过长的原因是___________。
草甘膦是目前农业上广泛使用的一种除草剂，其田间推荐使用的中间浓度为C，但未考虑它对固氮微生物的影响，研究小组采用“抑菌圈法”对此开展研究（见如表），以期为农田合理使用草甘膦提供理论依据。
5．补全表中的实验方案：
如表草甘膦的抑菌圈直径比较

_____________

【推荐3】自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N₂的细菌，将玉米种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。回答下列问题：

(1)步骤①土样应取自表层土壤的原因是_____。
(2)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的_____培养基，原因是_____。

培养基类型	培养基组分
Ashby培养基	甘露醇（C6H14O6）、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸馏水、琼脂
LB培养基	蛋白胨、酵母提取物、NaCl、蒸馏水、琼脂

(3)步骤④所用的接种工具是_____，若在④的平板上统计的菌落的平均数量为126个，则每克土壤中含有的固氮菌为_____个。
(4)将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩大培养48小时，经离心后收集下层细胞并转移至特定培养基中进行固氮能力的测定，筛选出固氮能力最强的菌种CM12，为进一步鉴定其固氮能力，科研人员选用发芽一致的玉米种子进行3组盆栽实验，30天后测定土壤微生物有机氮含量，结果如下图。

注：CK：对照处理组；N：尿素处理组（每盆土壤中50mL有氮全营养液：成分为在1000mL无氮植物营养液中加入0．12g尿素）；CM12：自生固氮菌CM12处理组（每盆土壤浇50mL，接种自身固氮菌的无氮植物营养液）。
①对照组（CK）的处理为_____。
②实验结果表明：施用尿素处理和接种固氮菌CM12处理均能显著增加土壤微生物有机氮含量。与CK组相比，CM12处理组土壤微生物有机氮含量增加了约_____%。
③自生固氮菌较共生固氮菌（如根瘤菌）的应用范围更广，原因是_____。

【推荐1】回答下列（一）、（二）小题：
（一）苹果树腐烂病由真菌感染引起，为了开发生物防治该病的途径，研究者拟从土壤中分离筛选出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌，实验流程如下图。

回答下列问题：
（1）芽孢杆菌的繁殖需要特定的pH，对培养基调pH是在灭菌之____（填“前”或“后”），原因是____ 。
（2）该实验用____法分离筛选芽孢杆菌，分离过程中每个稀释度下需用____精确地取0．1ml土壤稀释液到培养基上，其中稀释100倍的土壤稀释液培养后平均长出了20个芽孢杆菌菌落，则该样本土壤中约含芽孢杆菌____个／克。
（3）目的菌筛选时，应取直径较大的____菌落移置于A处，B处接种____。培养3~5天，通过观察比较____，从而筛选出抑菌率最高的菌株。
（二）几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶存在于一些植物和微生物中，可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入水稻内，可增强水稻抗真菌病的能力。

回答下列问题：
（1）在进行基因工程操作时，首先要获取目的基因，可用基因文库法和____；若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA，用于检测目的基因的表达情况，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，选用嫩叶的原因是____。提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是____。
（2）上图中，属于基因工程核心步骤的是过程____（填数字编号）。将几丁质酶基因导入水稻受体细胞时需要通过农杆菌转化法，其中Ti质粒的T-DNA可整合到植物细胞中的____上。与过程④相比，过程⑤所用培养基的微量元素的含量____（填“较高”或“较低”）。
（3）经诱导，愈伤组织可分化产生芽和根的____组织，进而形成完整植株。导入了几丁质酶基因的植物细胞，如果植物生长发育必需的基因被破坏，就不能发育为完整植株，植物生长发育必需的基因被破坏的原因往往是____ 。

【推荐3】我国科技工作者发明的维生素C“二步发酵法”生产工艺是世界首创。第一步发酵用醋酸杆菌为菌种，第二步发酵用氧化葡萄糖酸杆菌（“小菌”）和假单胞杆菌（“大菌”）混合菌种。如图为二步发酵法的生产流程，请回答下列问题：

(1)为纯化和保存菌种，取适量一步发酵液稀释后用_____法接种在含有碳酸钙粉的培养基上，以_____（填下列选项代号）为最佳指标，分离保存菌种。
A．菌落直径大小                    B．溶钙圈大小                    C．溶钙圈直径与菌落直径比值
(2)对一步发酵培养液检测发现几乎没有杂菌存在，推测可能的原因是_____。
(3)二步发酵过程中大小菌的菌种数比例会影响产酸率，种液接入发酵罐前需对种液中的大小菌计数。计数所用的培养基除含有与发酵液相同的成分外，还需添加_____。在培养基上，可根据菌落的_____等特征（至少写两个）对大小菌分别计数。
(4)某检测员将种液稀释接种了3个平板，统计假单胞杆菌的菌落数分别是30、100和200，取平均值110．该结果可信度低，原因是_____。
(5)若要尝试固定化混合菌进行二步发酵生产古龙酸，应选择_____法进行固定。结合题意，你认为固定化混合菌操作时要注意哪些方面？_____（答出一点即可）。

【推荐1】在农业生产研究上，常需要进行微生物的分离和计数。
(1)下表为两种微生物的培养基配方：
A组：

			葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g

B组

纤维素粉					KCl	酵母膏	水解酪素
5g	1g	1.2g	0.9g	0.5g	0.5g	0.5g	0.5g

注：上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1000mL。
①从功能上来看，上述两种培养基均属于_______培养基。
②如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择_______(填“A”或“B”)培养，该培养基中的碳源是_______。
(2)如图是某同学采用的接种微生物的方法，请回答下列问题：

①本实验采用的接种微生物的方法是_______法，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意：每次划线前要_______接种环；接种环冷却后从_______开始划线，划线结束的要求是：_______。除了图示方法外，还有一种方法也可以获得单菌落，这种方法得到的数值一般比实际值_______，原因是：_______。
②三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数量，在对应稀释倍数为10⁶的培养液中各取0.1ml涂布平板，得到以下统计结果：
甲同学涂布了2个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；
乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；
丙同学涂布了3个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163。
在三位同学的统计结果中，_______同学的统计结果是最正确的，每毫升的活菌数是_______。

【推荐2】培养基是供微生物生长繁殖的营养基质，掌握培养基制备技术和原理是微生物实验室培养的基础。请回答下列问题：
（1）不同的微生物往往采用不同的培养基配方是因为___________。培养大肠杆菌的牛肉膏蛋白胨培养基，与筛选土壤中尿素分解菌的培养基，在配方上的显著差别是_____________________。
（2）培养基按其物理状态可分为液体培养基和固体培养基。在“分解纤维素的微生物的分离”实验中，为了______________________，采用液体状态的选择培养基。为了分离和纯化纤维素分解菌而选用固体培养基，并在其中添加_________以鉴别筛选目的菌。
（3）固体培养基的灭菌常使用_________法。平板冷凝后倒置的原因是_______。
（4）多糖类化合物在生物技术实践中有诸多应用，如琼脂常用作制备固体培养基，根据所学知识再举出一例_______________。

【推荐3】科研人员以猕猴桃为原料，选用优良菌种，制备猕猴桃酒和猕猴桃醋，其简化工艺流程图如下，回答下列问题：

(1)在榨汁过程中清洗和破碎的顺序是__________，原因是__________________________。
(2)酒精发酵时一般将温度控制在______℃，发酵过程中绝大多数微生物不能生长的原因是___。
(3)最初的猕猴桃酒中含有少量尿素，脲酶可以分解尿素。根据电荷性质分离脲酶的方法是__________________，脲酶不宜直接投入酒中，原因是___________________________。
(4)固定化菌种常用的方法是_________，固定化酶不宜用此方法的原因是_____________。