巢式PCR是指先后用外内引物扩增目的基因的方法。其原理为:先以比目的基因大的DNA片段为模板,用外引物(F1,R1)进行扩增,获得大量含目的基因的中间产物,再以扩增后的中间产物为模板,用内引物(F2,R2)扩增目的基因,如图所示。下列说法错误的是( )
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/5/24/2fdedfdb-5519-4097-9a99-f82cf2900ef7.png?resizew=275)
A.两对引物的碱基序列不相同,但均应为单链DNA片段 |
B.第二轮PCR反应能否进行,是对第一轮PCR反应正确性的鉴定 |
C.由于和两套引物都互补的靶序列较少,该技术可大大提高扩增的特异性 |
D.如果两套引物一起加入反应体系中,外引物的复性温度应显著低于内引物 |
更新时间:2024-05-29 16:06:40
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【知识点】 PCR扩增的原理与过程解读
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解题方法
【推荐1】下图示利用重叠延伸PCR技术改造目的基因的原理。相关叙述错误的是( )
A.图示操作中至少需要用2种限制酶对目的基因进行处理 |
B.操作中引物2和引物3序列应含有拟突变位点,且可以互补 |
C.应选用引物1和引物4进行PCR3,以获得大量目的基因序列 |
D.此过程实现的基因序列改变属于基因突变,未发生基因重组 |
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【推荐2】油菜的绿叶对黄化叶为显性。与绿叶基因相比,黄化叶基因有一个碱基对发生了改变,从而出现一个限制酶B的酶切位点。为鉴定某绿叶油菜的基因型,提取其DNA进行了PCR和电泳。下列叙述正确的是( )
A.需设计能与目的基因结合的双链DNA作为PCR引物 |
B.应在PCR扩增体系中添加Mg2+,以激活DNA聚合酶 |
C.可适当降低复性的温度,以减少PCR中非特异性条带的产生 |
D.用酶B作用后进行电泳,若有2条电泳条带可判断为杂合子 |
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