在生物技术实践过程中,往往需要注意某些实验步骤的操作,请将下列实验中的注意事项填写完整:
⑴在腐乳的制作时,用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用_________ 消毒;在血红蛋白的提取和分离中,若红细胞的洗涤次数过少,将无法除去_________ 。
⑵在提取植物细胞的DNA时,需要先用洗涤剂溶解________ 。在花药离体培养中剥离花药时,要彻底去除_________ ,因为与其相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。
⑶在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”课题中,往往需要稀释土壤溶液,为了避免杂菌污染,此过程每一步都要在_________ 旁操作。在固定化酵母细胞中加热溶解海藻酸钠时,最好采用_________ 的方法。胡萝卜素提取的萃取过程应采用_________ 加热,因为有机溶剂都是易燃物。
⑷为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行__________ 。
⑴在腐乳的制作时,用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用
⑵在提取植物细胞的DNA时,需要先用洗涤剂溶解
⑶在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”课题中,往往需要稀释土壤溶液,为了避免杂菌污染,此过程每一步都要在
⑷为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行
更新时间:2016-11-26 01:56:21
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【推荐1】高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养,得到若干菌落后用碘液作显色处理,观察到如图2所示情况。回答下列问题:
(1)I号培养基中采用的接种方法是__________ 。
(2)图2中___________ 含有所需菌种,判断的依据是__________ 。
(3)筛选获得特定的菌种时需要用选择培养基,选择培养基是指__________ 。对菌种进行计数常用的方法有稀释涂布平板法和__________ 等。
(4)粗分离得到的高温淀粉酶溶液中往往含有一些微蛋白(如图,表示甲~戊五种蛋白质的分子量及电荷量,且五种蛋白质均只由一条肽链构成)。若将样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,则移动速度最慢的是蛋白___________ ,判断理由是SDS会掩盖粒子原有电荷的差异,使粒子的迁移速度只取决于粒子的__________ 。
(1)I号培养基中采用的接种方法是
(2)图2中
(3)筛选获得特定的菌种时需要用选择培养基,选择培养基是指
(4)粗分离得到的高温淀粉酶溶液中往往含有一些微蛋白(如图,表示甲~戊五种蛋白质的分子量及电荷量,且五种蛋白质均只由一条肽链构成)。若将样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,则移动速度最慢的是蛋白
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(0.65)
【推荐2】中国对杏树的栽培已有两千年以上的历史,但对杏果的利用一直停留在鲜食果肉或杏仁上。研究人员不断创新开发,成功酿制出杏果酒,其艳泽淡黄、果香浓郁、营养丰富;检测发现果酒中黄酮达20%,是目前天然可食植物制品黄酮含量最高的饮品,有抗癌防衰老的性能,突出的功能型饮品。回答下列问题。
(1)杏果酒酿制利用的微生物是___________ 。发酵生产果酒的过程中,每隔一段时间要进行放气操作,其主要目的是__________ 。在制作杏果酒中绝大多数其他微生物生长受到抑制的原因是__________ 。
(2)酿制杏果酒时,需要将温度控制在18~25℃,温度过高和氧气逸入会导致杏果酒容易变酸,原因是__________ 。
(3)在葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣(皮渣)。为了解皮渣中微生物的数量,取10g皮渣加入90ml无菌水,混匀,用__________ (填一种实验仪器)将0.1mL稀释液均匀接种于培养基表面。104倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为66、75和72,则每克皮渣中微生物数量为__________ 个。
(4)某同学在制作杏醋时,加入醋酸菌液过程中有可能混入乳酸菌(不考虑其他杂菌)。从培养条件的角度分析,请用稀释涂布平板法设计实验,检测是否混入了乳酸菌(注:乳酸菌和醋酸菌的菌落形态相似)。写出大体实验思路并预测实验结果:____________________ 。
(1)杏果酒酿制利用的微生物是
(2)酿制杏果酒时,需要将温度控制在18~25℃,温度过高和氧气逸入会导致杏果酒容易变酸,原因是
(3)在葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣(皮渣)。为了解皮渣中微生物的数量,取10g皮渣加入90ml无菌水,混匀,用
(4)某同学在制作杏醋时,加入醋酸菌液过程中有可能混入乳酸菌(不考虑其他杂菌)。从培养条件的角度分析,请用稀释涂布平板法设计实验,检测是否混入了乳酸菌(注:乳酸菌和醋酸菌的菌落形态相似)。写出大体实验思路并预测实验结果:
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【推荐3】营养缺陷型菌株是人工诱变或自发突变后,某些酶被破坏,使代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物,可为工业生产提供原料。以下是科研人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题:
(注:氨基酸缺陷型菌株在基本培养基中不能生长,在完全培养基中能生长。)
(1)从培养基成分分析,图中基本培养基与完全培养基存在差异的成分是_____ 。根据用途分类,图中基本培养基属于_____ (填“选择”或“鉴别”)培养基。
(2)过程①的接种方法为_____ ,接种后的培养皿不能立即倒置培养的原因是_____ 。进行②过程培养时,应先将丝绒布转印至_____ (填“基本”或“完全”)培养基上,理由是___ ,丝绒布在 两个培养基之间进行转印的操作要点是________ 。
(3)筛选氨基酸缺陷型菌株的方法是挑选_______ 的菌落(填序号)。
①完全培养基和基本培养基对应位置上都有
②完全培养基中有,基本培养基对应位置上没有
③基本培养基中有,完全培养基对应位置上没有
(4)统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次,直到各类菌落数目稳定,以防止培养时间不足导致_____ ,若培养时间太长将导致________ ,影响计数。
(5)将筛选出的氨基酸缺陷型菌株转接在斜面上进行低温保存,操作简单且无需特殊设备,但具有保存时间不长、_________ 、_________ 等缺点。
(注:氨基酸缺陷型菌株在基本培养基中不能生长,在完全培养基中能生长。)
(1)从培养基成分分析,图中基本培养基与完全培养基存在差异的成分是
(2)过程①的接种方法为
(3)筛选氨基酸缺陷型菌株的方法是挑选
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②完全培养基中有,基本培养基对应位置上没有
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【推荐1】Ⅰ.为了分离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用被石油污染过的土壤进行了如图A 所示的实验。
(1)同学甲进行步骤④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是_________ ,出现图B结果可能的失误操作是____________ 。纯化菌株时,还可采用平板划线法。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有____________ 。
(2)同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作:将lmL样品稀释100倍,在3 个平板上分别接入0.lmL稀释液;培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为____________ 个。
Ⅱ.贵州知名品牌“老干妈”系列产品一直沿用传统工艺精心酿造,其中风味豆豉深受大众喜爱,远销国内外。风味豆豉的主要工艺流程是:黄豆→洗净浸泡→煮熟→加适量盐→发酵→加入配料→装坛密封→成品。请回答下列问题:
(3)制作豆豉前期发酵的目的是让霉菌产生相应的酶,如蛋白质转变为小分子肽和氨基酸,脂肪转变为______________ ,使豆豉营养更加丰富,有利于健康。发酵过程中需采用人工培养纯净菌种,接种前随机选取若干灭菌后的平板,先培养一段时间目的是_______________________________________ 。
(4)豆豉制成成品后,需测定其亚硝酸盐含量,原理是在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与_____________ 发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成_____________ 色染料。
(1)同学甲进行步骤④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是
(2)同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作:将lmL样品稀释100倍,在3 个平板上分别接入0.lmL稀释液;培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为
Ⅱ.贵州知名品牌“老干妈”系列产品一直沿用传统工艺精心酿造,其中风味豆豉深受大众喜爱,远销国内外。风味豆豉的主要工艺流程是:黄豆→洗净浸泡→煮熟→加适量盐→发酵→加入配料→装坛密封→成品。请回答下列问题:
(3)制作豆豉前期发酵的目的是让霉菌产生相应的酶,如蛋白质转变为小分子肽和氨基酸,脂肪转变为
(4)豆豉制成成品后,需测定其亚硝酸盐含量,原理是在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与
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【推荐2】尿素是一种重要的氮肥,农作物不能将其直接吸收利用,而是通过土壤中的细菌将其分解为氨和CO2后才能被农作物利用。请回答下列问题:
(1)土壤中的某些细菌能分解尿素是因为该种细菌能合成________ 。
(2)为筛选尿素分解菌而制备的培养基中含有的营养物质除尿素外,还包括水、碳源________ 等,该培养基能筛选出目的菌株的原因是________ 。
(3)一般依据尿素分解菌菌落的________ 、隆起程度和颜色等特征来统计菌落数目。现将10mL尿素分解菌悬液进行梯度稀释,分别取0.1mL稀释倍数为106的样液接种到3个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为39、42、45,则1mL悬液中活细菌数量为________ 个。上述过程采用的接种方法是________ 。
(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调节________ ;接种前要进行________ ,这种操作的目的是________ 。
(5)进行分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________ (填序号)。
①所取土样不同 ②培养基被污染 ③接种操作错误 ④没有设置对照实验
实验结束后,使用过的培养基应该进行________ 处理后才能倒掉。
(1)土壤中的某些细菌能分解尿素是因为该种细菌能合成
(2)为筛选尿素分解菌而制备的培养基中含有的营养物质除尿素外,还包括水、碳源
(3)一般依据尿素分解菌菌落的
(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调节
(5)进行分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有
①所取土样不同 ②培养基被污染 ③接种操作错误 ④没有设置对照实验
实验结束后,使用过的培养基应该进行
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名校
【推荐3】葡萄糖异构酶(GI)能够将葡萄糖转化为果糖,该酶广泛的存在于细菌、真菌和放线菌等微生物中,但有些微生物产生的GI热稳定性较低,目前科学家发现某嗜酸链霉菌菌种产生的GI热稳定性较高,请分析回答下列有关问题:
(1)GI的最适温度一般在70~80℃,但是在利用从乳酸杆菌中分离提取的GI在适宜酸碱度和70~80℃条件下进行高果糖浆生产时,发现果糖的产生比例很低,最可能的原因是_______________ 。
(2)研究人员最早是依据pH值分段模式从土壤中分离嗜酸链霉菌,科学家通常选择从土壤中寻找目的菌株是因为土壤中微生物_______________ 。
(3)为了得到纯净的嗜酸链霉菌菌落,可以利用_______________ 法进行纯化培养,接种过程中,操作要在酒精灯火焰附近进行的原因是______________________________ 。
(4)提纯GI需用到凝胶色谱法,该方法是根据_______________ 分离蛋白质。
(5)工业上一般采用固定化游离GI或产GI的微生物细胞的方法进行高果糖浆的生产,利用固定化酶的方法生产高果糖浆的优点是_______________ ,在固定化细胞时,常选用_______________ 作为包埋细胞的载体。
(1)GI的最适温度一般在70~80℃,但是在利用从乳酸杆菌中分离提取的GI在适宜酸碱度和70~80℃条件下进行高果糖浆生产时,发现果糖的产生比例很低,最可能的原因是
(2)研究人员最早是依据pH值分段模式从土壤中分离嗜酸链霉菌,科学家通常选择从土壤中寻找目的菌株是因为土壤中微生物
(3)为了得到纯净的嗜酸链霉菌菌落,可以利用
(4)提纯GI需用到凝胶色谱法,该方法是根据
(5)工业上一般采用固定化游离GI或产GI的微生物细胞的方法进行高果糖浆的生产,利用固定化酶的方法生产高果糖浆的优点是
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【推荐1】[生物——选修1:生物技术实践]
在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。
(1)图是利用____________ 法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步____________ 分散到培养基的表面。
(2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌,除应除去 上述成分中的NaNO3外,还需加入__________ 物质,以补充__________ 源。
(3)应用稀释涂布平板法进行计数的结果通常比实际结果小的原因是____________________ , 若在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为233,那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)____________________ 。
(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现,在培养基上还有其他杂菌的菌落,能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了?____________________ ,为什么?________________________________________ 。
在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。
(1)图是利用
(2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌,除应除去 上述成分中的NaNO3外,还需加入
(3)应用稀释涂布平板法进行计数的结果通常比实际结果小的原因是
(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现,在培养基上还有其他杂菌的菌落,能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了?
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【推荐2】下表是某研究小组配制的适合尿素分解菌生长的培养基,请回答下列问题:
(1)上述培养基的成分中,为尿素分解菌提供碳源的是_____________ ,提供氮源的是_____________ 。该培养基从物理状态上看,属于_____________ 培养基;从功能上看,属于_____________ 培养基。配制培养基时,灭菌与调pH的先后顺序是______ 。
(2)当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落。此菌落来源于_____________ ,此时平板上的菌落数较能准确的反映样品中的活菌数。
(3)培养过程中,常选择菌落数在_____________ 区间的平板统计计数。统计的菌落数往往比活菌的真实数目低,原因是__________________________ 。
(4)尿素分解菌经X射线照射后不能正常生长,添加某种维生素后才能正常生长,原因是___________ 。
KH2PO4 | 1.4g |
Na2HP04 | 2.lg |
MgS04•7H20 | 0.2g |
葡萄糖 | 10.0g |
尿素 | l.0g |
琼脂 | 15g |
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL |
(1)上述培养基的成分中,为尿素分解菌提供碳源的是
(2)当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落。此菌落来源于
(3)培养过程中,常选择菌落数在
(4)尿素分解菌经X射线照射后不能正常生长,添加某种维生素后才能正常生长,原因是
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【推荐3】回答下列(一)、(二)小题:
(一)酒精饮料中的尿素会与酒精反应生成氨基甲酸乙酯,是一种潜在致癌物。现欲从土壤微生物中分离出能分解尿素的微生物并用于酒精饮料的生产,进行如下实验。请分析回答:
(1)在“分离以尿素为氮源的微生物”实验中,配置的无氮源培养基应用_______ 灭菌。涂布后的平板应在恒温培养箱中_______ 培养。培养后发现平板上出现了黄色环带的菌落,该菌种直接利用的氮源可能是_______ 环带的大小体现了相关酶的___________________________________ 。
(2)有人尝试用靛酚蓝比色法定量测定脲酶活性。该方法的原理是利用铵态氮和显色试剂反应,生成水溶性蓝色染料,再通过比色计测定光密度值。关于靛酚蓝比色法的说法,错误的是________
A.该实验需要用标准铵溶液制作标准曲线
B.可用光程1cm的比色杯在550nm处测定OD值
C.测定时需用水作为空白对照
D.根据标准曲线,光密度值越大,脲酶活性越高
(3)筛选出高表达脲酶菌株并扩增后后,可从_______ 中获取酶,并用物理或化学的方法制成_______ ,在消除酒中尿素的同时又不影响酒的风味。
(二)黄曲霉毒素是黄曲霉菌产生的有毒物质,毒性比氯化物高10倍,也是自然界最强的化学致癌物质,主要污染花生、玉米等粮油食品。有人尝试将黄曲霉毒素抗体基因导入大肠杆菌和酵母菌,用生物工程技术制造抗体,导入过程如下:
请回答以下问题:
(1)配置转基因大肠杆菌的培养基时,除必要的营养物质、氯化钠、琼脂和水外,还应加入_______ ,获得菌落后,应用_______ 在_______ 上进行扩大培养。产生的抗体专一性强,灵敏度高,可制成相应的_______ 用于快速检测食物中的黄曲霉毒素
(2)本案例中,转基因成功的标志是____________________ ,可用_______ 法检测。
(3)实际结果发现,酵母菌产生的抗体活性比大肠杆菌产生的高,推测可能的原因是______________________________________________________ 。
(一)酒精饮料中的尿素会与酒精反应生成氨基甲酸乙酯,是一种潜在致癌物。现欲从土壤微生物中分离出能分解尿素的微生物并用于酒精饮料的生产,进行如下实验。请分析回答:
(1)在“分离以尿素为氮源的微生物”实验中,配置的无氮源培养基应用
(2)有人尝试用靛酚蓝比色法定量测定脲酶活性。该方法的原理是利用铵态氮和显色试剂反应,生成水溶性蓝色染料,再通过比色计测定光密度值。关于靛酚蓝比色法的说法,错误的是
A.该实验需要用标准铵溶液制作标准曲线
B.可用光程1cm的比色杯在550nm处测定OD值
C.测定时需用水作为空白对照
D.根据标准曲线,光密度值越大,脲酶活性越高
(3)筛选出高表达脲酶菌株并扩增后后,可从
(二)黄曲霉毒素是黄曲霉菌产生的有毒物质,毒性比氯化物高10倍,也是自然界最强的化学致癌物质,主要污染花生、玉米等粮油食品。有人尝试将黄曲霉毒素抗体基因导入大肠杆菌和酵母菌,用生物工程技术制造抗体,导入过程如下:
请回答以下问题:
(1)配置转基因大肠杆菌的培养基时,除必要的营养物质、氯化钠、琼脂和水外,还应加入
(2)本案例中,转基因成功的标志是
(3)实际结果发现,酵母菌产生的抗体活性比大肠杆菌产生的高,推测可能的原因是
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【推荐1】叶绿体DNA(cpDNA)大多为环状双链,其基因组序列高度保守,目前已在分子标记、核质互作、叶绿体基因工程等方面开展了广泛研究。下列为提取cpDNA的相关步骤,其中SDS能瓦解生物膜,苯酚使蛋白质变性析出,氯仿与苯酚互溶,易于除去苯酚。
(1)叶绿体的分离
①匀浆使细胞破碎;将叶片于4℃冰箱黑暗饥饿处理12~24h后,剪成1 cm长度,放入匀浆机,倒入缓冲液,先低速匀浆2次,再高速匀浆3次,每次5~10s。匀浆前黑暗饥饿处理的目的是____ ,有利于cpDNA的提取。
②离心得到叶绿体粗提物:将匀浆液过滤后离心,弃沉淀以去除细胞残骸;将得到的上清液再次离心,弃上清,即得叶绿体粗提物,第二次离心的速度比第一次____ 。整个过程中线粒体分布在____ 中,从而避免了线粒体DNA对cpDNA的污染。
(2)去除核DNA:向叶绿体粗提物中加入____ 、缓冲液,37℃静置15min后,离心取____ 从而去除吸附在叶绿体外膜上的核DNA.
(3)叶绿体的裂解和cpDNA的粗提:将纯化的叶绿体加入缓冲液、SDS、蛋白酶K,55℃水浴3h,使叶绿体裂解,释放出cpDNA,离心取上清液。在上清液中加入苯酚和氯仿,离心后的液体包括上层水相、中层变性蛋白和下层有机溶剂,cpDNA分布于___ 中,小心用____ 吸取该层液体。
(4)沉淀cpDNA:向粗提溶液中加入3mol/L醋酸钠及预冷的_____ ,离心取沉淀物。
(5)电泳检测cpDNA:如图1、2是某品种茶树用上述方法提取到的cpDNA凝胶电泳结果,其中M是已知大小的不同DNA的混合物。2组无条带,表明提取不成功,其可能的原因之一是操作过程中叶绿体裂解时间过长,导致________ ,
(6)叶绿体基因的遗传方式_______ (填"遵循”或“不遵循”)孟德尔遗传定律,不会随_______ 传给后代。且将外源基因转入叶绿体基因时,在转基因生物安全方面带来的优点为_______ 。
(1)叶绿体的分离
①匀浆使细胞破碎;将叶片于4℃冰箱黑暗饥饿处理12~24h后,剪成1 cm长度,放入匀浆机,倒入缓冲液,先低速匀浆2次,再高速匀浆3次,每次5~10s。匀浆前黑暗饥饿处理的目的是
②离心得到叶绿体粗提物:将匀浆液过滤后离心,弃沉淀以去除细胞残骸;将得到的上清液再次离心,弃上清,即得叶绿体粗提物,第二次离心的速度比第一次
(2)去除核DNA:向叶绿体粗提物中加入
(3)叶绿体的裂解和cpDNA的粗提:将纯化的叶绿体加入缓冲液、SDS、蛋白酶K,55℃水浴3h,使叶绿体裂解,释放出cpDNA,离心取上清液。在上清液中加入苯酚和氯仿,离心后的液体包括上层水相、中层变性蛋白和下层有机溶剂,cpDNA分布于
(4)沉淀cpDNA:向粗提溶液中加入3mol/L醋酸钠及预冷的
(5)电泳检测cpDNA:如图1、2是某品种茶树用上述方法提取到的cpDNA凝胶电泳结果,其中M是已知大小的不同DNA的混合物。2组无条带,表明提取不成功,其可能的原因之一是操作过程中叶绿体裂解时间过长,导致
(6)叶绿体基因的遗传方式
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【推荐2】设计一个简单的实验,验证组成染色体的成分为DNA和蛋白质。
(1)实验原理:蛋白质遇双缩脲试剂发生紫色反应;DNA与______ 苯胺热水浴呈现蓝色。
材料用具:染色体提取液、稀释的蛋清水溶液、DNA提取液等(其他材料用具自选)。
(2)实验步骤:
①取洁净的试管4支,分别编号为1、2、3、4。
②取1、2号试管,分别加入等量的染色体提取液和______ ;取3、4号试管,分别加入等量的染色体提取液和______ 。
③在1、2号试管中滴加等量的______ ;在3、4号试管中滴加等量的二苯胺试剂,并放到热水中水浴加热。
④对比观察;1号和2号、3号和4号试管中的颜色变化。
(3)实验结果:1号和2号试管______ ,证明染色体中含有蛋白质;3号和4号试管______ ,证明染色体中含有DNA。
(1)实验原理:蛋白质遇双缩脲试剂发生紫色反应;DNA与
材料用具:染色体提取液、稀释的蛋清水溶液、DNA提取液等(其他材料用具自选)。
(2)实验步骤:
①取洁净的试管4支,分别编号为1、2、3、4。
②取1、2号试管,分别加入等量的染色体提取液和
③在1、2号试管中滴加等量的
④对比观察;1号和2号、3号和4号试管中的颜色变化。
(3)实验结果:1号和2号试管
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【推荐3】基因测序技术在临床和科研中发挥着越来越重要的作用,该技术通常包括核酸提取、核酸扩增、产物检测3个步骤。
(1)已知SDS(十二烷基硫酸钠)可以使蛋白质变性,在利用真核生物做材料进行DNA粗提取时,通常在研磨液中加入SDS的目的是_____ 。DNA粗提取过程中常用到体积分数为95%的冷酒精,其作用是______ 。
(2)测序技术通常需要用PCR技术扩增待测分子。下表是某研究小组设计的两组引物,其中不合理的是______ ,原因是______ 。
(3)第一代测序技术又叫双脱氧链终止法,它以DNA合成反应为基础。下图是该技术的测序原理和某待测DNA序列的电泳图谱。在反应体系中加入ddNTP(2′,3′-双脱氧核苷三磷酸)的作用是___ 。据图分析,待测DNA片段的碱基序列是3′______ 5′。
(4)第二代测序又称为高通量测序。二代测序在DNA复制过程中通过捕捉新添加的碱基所携带的特殊标记(一般为荧光分子标记)来确定DNA的序列。这就要求在测序时,DNA分子必须同步复制,来增强荧光信号强度从而读出DNA序列。据此分析,二代测序技术不适合测量较_____ (填“长”或“短”)的DNA序列,原因是_____ 。
(1)已知SDS(十二烷基硫酸钠)可以使蛋白质变性,在利用真核生物做材料进行DNA粗提取时,通常在研磨液中加入SDS的目的是
(2)测序技术通常需要用PCR技术扩增待测分子。下表是某研究小组设计的两组引物,其中不合理的是
引物 | 序列 |
A | 5′-GCCCTCTACTCCCCGGTCTTG-3′ |
5′-GCCCATCTGCAAGTTATCCTA-3′ | |
B | 5′-GGGATT-3′ |
5′-AATCCC-3 |
(4)第二代测序又称为高通量测序。二代测序在DNA复制过程中通过捕捉新添加的碱基所携带的特殊标记(一般为荧光分子标记)来确定DNA的序列。这就要求在测序时,DNA分子必须同步复制,来增强荧光信号强度从而读出DNA序列。据此分析,二代测序技术不适合测量较
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