酵母菌在缺氧、pH为.4.5-6.0的条件下生长繁殖,而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。某同学用果园土为实验材料,从土壤中分离纯化酵母菌。实验步骤如下:
①土壤取样、制备样品液;
②配制培养基并灭菌、制作平板若干;
培养基A: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖琼脂培养基
培养基B: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖培养液
③用无菌吸管取样品液1ml,注入到有30ml培养基B的锥形瓶中,在30℃、无氧环境中培养24h;
④24h后,用另一支无菌吸管从锥形瓶中取培养液0.lml,分别接种到若干培养基A的平板上,倒置于37℃的恒温箱中培养48小时;
⑤镜检、菌种保藏。
请回答下列问题:
(1)根据实验结果,判断酵母菌的呼吸方式为____ 。
(2)第②步配制的培养基,常采用的灭菌方法是________ 。
(3)第③步实验操作是否具有选择作用,____ ,说明理由________ 。
(4)第④步的接种方法_______ 。
(5)某同学欲测定样品液中酵母茁数量,采用显微镜直接计数方便快捷并且仪器损耗较小。这样得出的结果往往比实际值____ (填“偏高”、“基本不变” “偏低”),理由是____ 。
①土壤取样、制备样品液;
②配制培养基并灭菌、制作平板若干;
培养基A: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖琼脂培养基
培养基B: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖培养液
③用无菌吸管取样品液1ml,注入到有30ml培养基B的锥形瓶中,在30℃、无氧环境中培养24h;
④24h后,用另一支无菌吸管从锥形瓶中取培养液0.lml,分别接种到若干培养基A的平板上,倒置于37℃的恒温箱中培养48小时;
⑤镜检、菌种保藏。
请回答下列问题:
(1)根据实验结果,判断酵母菌的呼吸方式为
(2)第②步配制的培养基,常采用的灭菌方法是
(3)第③步实验操作是否具有选择作用,
(4)第④步的接种方法
(5)某同学欲测定样品液中酵母茁数量,采用显微镜直接计数方便快捷并且仪器损耗较小。这样得出的结果往往比实际值
更新时间:2017-05-07 11:58:24
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【推荐1】从土壤中分离分解尿素的细菌的一般过程为“采集土样→稀释→纯化分离→性能测定”,下表为分离分解尿素的细菌所用的培养基配方。请回答下列有关问题:
(1)该培养基含有培养微生物所需要的各种基本成分,其中最主要的碳源是________ ,氮源是________ 。获得纯净分解尿素的细菌的关键是__________________ 。
(2)鉴定某种细菌是否能够分解尿素,应该在培养基中加入________ 指示剂,若该细菌能够分解尿素,则指示剂变为________ 色,原理是________________ 。
(3)微生物分离纯化的方法通常有平板划线法和稀释涂布平板法。如果要统计细菌的数目,只能用________ 法,在下面所示的四种菌落分布图中,不可能是用该方法得到的是________ (填字母)。
KH2PO4 | 1.4 g |
Na2HPO4 | 2.1 g |
MgSO4·7H2O | 0.2 g |
葡萄糖 | 10.0 g |
尿素 | 1.0 g |
琼脂 | 15.0 g |
蒸馏水 | 定容至1 000 mL |
(1)该培养基含有培养微生物所需要的各种基本成分,其中最主要的碳源是
(2)鉴定某种细菌是否能够分解尿素,应该在培养基中加入
(3)微生物分离纯化的方法通常有平板划线法和稀释涂布平板法。如果要统计细菌的数目,只能用
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【推荐2】在自然条件下,淀粉分解菌(一类细菌的总称)和其他各种细菌混杂生活在土壤中。请回答下列有关问题:
(1)从土壤中将淀粉分解菌筛选出来,所以培养基从功能上讲应属于____________ 培养基,该培养基在成分上的特殊之处在于________________________ 。
(2)可用于淀粉分解菌的接种和计数的方法是____________ 法。某实验小组将样液分别稀释了102倍、103倍、104倍,然后将稀释倍数为102倍、103倍、104倍的稀释液分别涂布在不同的平板上,涂布多个稀释倍数的稀释液的目的是_______________ 。若有三个平板均涂布了稀释倍数为_______________ 倍的稀释液1mL,这三个平板上分别长出了 67、71和72个菌落,则原样液体中每毫升含有淀粉分解菌7×104个,该方法的测量值一般比实际值偏小,原因是____________________________ 。
(3)将含有淀粉分解菌的培养液涂布到培养基上,待培养基上长出菌落后可向培养基中滴入_________ ,挑取有明显淀粉分解圈的单菌落。一般来说,淀粉分解圈越大,则淀粉分解菌分解淀粉的能力越_______ 。
(1)从土壤中将淀粉分解菌筛选出来,所以培养基从功能上讲应属于
(2)可用于淀粉分解菌的接种和计数的方法是
(3)将含有淀粉分解菌的培养液涂布到培养基上,待培养基上长出菌落后可向培养基中滴入
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【推荐3】下图表示研究者从土壤中筛选分解尿素的细菌并计数的相关实验,请据图回答下列问题。
(1)进行过程①和②的目的分别是______ 和_______________ ;图中弧线箭头上“?”的具体操作是_______ 。
(2)进行培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是__________ 。倒平板时,待平板冷却凝固后,应将平板倒过来放置,并用记号笔在皿底上标明培养的微生物名称、平板上培养样品的稀释度、制作者姓名、培养日期及培养基种类等信息。纯化菌种时为了得到单一菌落,常采用的接种方法是___________________ 。
(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入______ 。培养后,若出现___ 色,说明其中含有能够分解尿素的细菌。
(4)在实验中,研究者每隔24小时统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止_________________________ 。
(1)进行过程①和②的目的分别是
(2)进行培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是
(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入
(4)在实验中,研究者每隔24小时统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止
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【推荐1】菠萝果肉中含有较丰富的维生素B和C。菠萝果酒味佳,且具有清热解渴﹑消暑提神、化食止泻的功效,深受人们的喜爱。工业上生产菠萝酒的步骤大致如下:原料选择→榨汁→调节糖度和酸度→发酵→调酒度→装瓶
回答下列问题:
(1)榨汁前需先将原料果用90℃热水浸泡5分钟,这样做的目的是_____________ 。
(2)发酵酿制前加入一定量的白砂糖调节糖度,目的是_____________ 。菠萝酒制作的原理:_____________ (用反应式表示)。
(3)在菠萝酒的制作过程中,研究人员进行了相关研究,其结果如图所示:
①请为以上研究拟一个课题:_____________ 。
②制作菠萝酒的最佳初始糖度和酵母菌接种量分别是_____________ 。
③酵母菌接种量在1.1%~~1.4%时,酒精度呈下降趋势,感观评分低,原因是_____________ 。
回答下列问题:
(1)榨汁前需先将原料果用90℃热水浸泡5分钟,这样做的目的是
(2)发酵酿制前加入一定量的白砂糖调节糖度,目的是
(3)在菠萝酒的制作过程中,研究人员进行了相关研究,其结果如图所示:
①请为以上研究拟一个课题:
②制作菠萝酒的最佳初始糖度和酵母菌接种量分别是
③酵母菌接种量在1.1%~~1.4%时,酒精度呈下降趋势,感观评分低,原因是
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【推荐2】某兴趣小组为寻找在土壤中能降解有机化合物X(仅含C、H、O三种元素)的细菌,先将有机化合物X埋到土壤中,一段时间后,在埋填物附近取土壤,做成浸出液,按如下操作。请回答相关问题。
(1)微生物实验中,为获得纯净培养物的关键是____________________________________ 。
(2)本实验培养基的配制中,需添加__________________________ 为唯一碳源。
(3)若采用平板划线的方法进行接种,在进行下一区域划线前要将接种环__________ 。操作时,在第二次及以后的划线,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是____________________________________ 。
(4)该小组在5个平板培养基上用另一种接种方法分别接种稀释倍数为106的土壤浸出液0.1mL,其菌落数依次为215个、237个、184个、196个、321个,则1mL该土壤浸出液中含有的活菌数大约为__________ 个。
(5)实验中是用菌落数来代表活菌数,但其结果往往较实际值偏小,原因________________________ 。
(1)微生物实验中,为获得纯净培养物的关键是
(2)本实验培养基的配制中,需添加
(3)若采用平板划线的方法进行接种,在进行下一区域划线前要将接种环
(4)该小组在5个平板培养基上用另一种接种方法分别接种稀释倍数为106的土壤浸出液0.1mL,其菌落数依次为215个、237个、184个、196个、321个,则1mL该土壤浸出液中含有的活菌数大约为
(5)实验中是用菌落数来代表活菌数,但其结果往往较实际值偏小,原因
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【推荐3】产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株,科研人员开展了相关研究。请回答下列问题:
(1)常规微生物实验中,下列物品及其灭菌方法
错误的是_________ (填编号)
(2)称取1.0g土壤样品,转入 99mL 无菌水中,制备成菌悬液,经______________ 后,获得细胞密度不同的菌悬液。分别取 0.1mL 菌悬液涂布在固体培养基上,其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了 46 个酵母菌落,则该样本中每克土壤约含酵母菌_________ 个。
(3)为了进一步提高酵母菌产酶能力,对分离所得的菌株,采用射线辐照进行诱变育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以_______ 为唯一碳源的固体培养基上,培养一段时间后,按照菌落直径大小进行初筛,选择直径______ 的菌落,纯化后获得A、B 两突变菌株。
(4)在处理含油废水的同时,可获得单细胞蛋白,实现污染物资源化。为评价A、B 两菌株的相关性能,进行了培养研究,结果如下图。据图分析,应选择菌株_____ 进行后续相关研究,理由是______________ 、_________________ 。
(1)常规微生物实验中,下列物品及其灭菌方法
编号 | ① | ② | ③ | ④ |
物品 | 培养基 | 接种环 | 培养皿 | 涂布器 |
灭菌方法 | 高压蒸汽灭菌 | 火焰灼烧灭菌 | 干热灭菌 | 臭氧 |
错误的是
(2)称取1.0g土壤样品,转入 99mL 无菌水中,制备成菌悬液,经
(3)为了进一步提高酵母菌产酶能力,对分离所得的菌株,采用射线辐照进行诱变育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以
(4)在处理含油废水的同时,可获得单细胞蛋白,实现污染物资源化。为评价A、B 两菌株的相关性能,进行了培养研究,结果如下图。据图分析,应选择菌株
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【推荐1】某同学配制好含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后,对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌,当培养基温度下降到50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,待培养基冷却至室温,按照下表进行处理:
将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2~3 d,观察每个培养皿中的菌落特征和数目。请回答下列问题:
(1)实验中E组的作用是_____ ,若该组的培养基表面没有菌落生长,这说明_____ 。
(2)“在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了_____ 。
(3)倒平板的适宜温度是50 ℃左右,原因是_____ 。待平板冷凝后,要将平板倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止_____ 。
(4)若挑取培养皿中的某一菌落,利用平板划线法进行纯化,则在进行第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的_____ 开始划线,这样做的目的是_____ 。平板划线结束后,最后一次划的线不能与第一次划的线_____ 。
组别 | 处理 |
A组 | 打开培养皿盖,距地面0.3 m处暴露15 min |
B组 | 打开培养皿盖,距地面0.6 m处暴露15 min |
C组 | 打开培养皿盖,距地面0.9 m处暴露15 min |
D组 | 打开培养皿盖,距地面1.2 m处暴露15 min |
E组 | 不打开培养皿盖 |
将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2~3 d,观察每个培养皿中的菌落特征和数目。请回答下列问题:
(1)实验中E组的作用是
(2)“在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了
(3)倒平板的适宜温度是50 ℃左右,原因是
(4)若挑取培养皿中的某一菌落,利用平板划线法进行纯化,则在进行第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的
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【推荐2】I.以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如图1所示,请分析回答:
(1)甲、乙过程发酵选用的菌种分别是_____ 、_____ ,二者结构上的主要区别_____ ,经过10~12d,样液中是否含有酒精,可以用_____ 来检验。
(2)若利用图2所示装置制作果醋,制作过程中充气口应_____ ,排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的目的是_____ 。
Ⅱ.某兴趣小组试图从土壤中分离能分解尿素的细菌,相关流程如图所示。回答下列问题:
(3)某同学配置以下的培养基成分:葡萄糖10.0g、蛋白胨5.0g、KH2PO41.4g、Na2HPO42.1g、尿素1.0g、琼脂15.0g、H2O(定容至1L)。分析培养基的成分可知,上述培养基_____ (填“能”或“不能”)用于分离出能分解尿素的细菌,理由是_____ 。
(4)将配置好的培养基灭菌,待培养基冷却至_____ ℃左右时在酒精灯火焰附近倒平板,培养基冷却凝固后,将培养皿倒过来放置的原因是_____ (答出1点)。
(5)据图分析,该兴趣小组设置了三个培养皿进行接种,所采用的接种方法是_____ ,培养一段时间后,选择菌落数为_____ 的平板进行计数,统计结果比实际活菌数_____ (“偏大”或“偏小”),原因是_____ 。
(1)甲、乙过程发酵选用的菌种分别是
(2)若利用图2所示装置制作果醋,制作过程中充气口应
Ⅱ.某兴趣小组试图从土壤中分离能分解尿素的细菌,相关流程如图所示。回答下列问题:
(3)某同学配置以下的培养基成分:葡萄糖10.0g、蛋白胨5.0g、KH2PO41.4g、Na2HPO42.1g、尿素1.0g、琼脂15.0g、H2O(定容至1L)。分析培养基的成分可知,上述培养基
(4)将配置好的培养基灭菌,待培养基冷却至
(5)据图分析,该兴趣小组设置了三个培养皿进行接种,所采用的接种方法是
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解题方法
【推荐3】已知经诱变处理得到的鼠伤寒沙门氏菌(细菌)的组氨酸营养缺陷型菌株(TA98),在一些致癌物质的诱导下可发生回复突变(经过第二次突变恢复为原来的基因)。埃姆斯实验可快速地鉴别化学品、食品添加剂的致癌性,该实验的设计如表所示。回答下列问题:
注:“+”代表可以生长,“-”代表不能生长。
(1)相比于完全培养基,表中的基本培养基在物质组成上的主要区别是__________________ 。在培养基的制作过程中,培养皿和培养基常采用的灭菌方法分别是__________________ 。
(2)配制表中培养基时应将pH调至______ ,且调节pH的操作应在培养基灭菌______ (填“前”或“后”)进行,原因是________________________ 。
(3)若表中“?”处为______ ,则说明待测物质可能具有致癌性。若想检测回复突变菌株的数量,则可采取______ 法将TA98接种于含待测物质的基本培养基上。经培养后,培养基上的菌落数越多,说明致癌物__________________ 。
鼠伤寒沙门氏菌类型 | 野生型 | TA98 | TA98回复突变型 | TA98+待测物质 |
基本培养基 | + | - | + | ? |
完全培养基 | + | + | + | + |
(1)相比于完全培养基,表中的基本培养基在物质组成上的主要区别是
(2)配制表中培养基时应将pH调至
(3)若表中“?”处为
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【推荐1】研究发现产琼脂糖酶的细菌和琼脂糖酶在制备原生质体、回收DNA与RNA方面有着重要的用途。以琼脂(一种多糖的混合物)为唯一碳源的培养基培养该细菌,培养一段时间,滴加某种染色剂后有透明圈出现。回答下列问题:
(l)常选用琼脂作为培养基凝固剂的原因是____ 。
(2)用添加琼脂的培养基接种产琼脂糖酶的细菌,该细菌的菌落周围会出现__________ 现象。
(3)某小组在分离纯化产琼脂糖酶的细菌时,先培养产琼脂糖酶的细菌,再滴加染色剂。
①该种方法的优点是___________ ,不足的是___________ 。
②一般挑取___________ 的菌落进行纯化培养。
③若纯合培养时采用平板划线法接种,则常用的接种工具是___________ ,在平板上进行连续多次划线的目的是_______________ 。
(l)常选用琼脂作为培养基凝固剂的原因是
(2)用添加琼脂的培养基接种产琼脂糖酶的细菌,该细菌的菌落周围会出现
(3)某小组在分离纯化产琼脂糖酶的细菌时,先培养产琼脂糖酶的细菌,再滴加染色剂。
①该种方法的优点是
②一般挑取
③若纯合培养时采用平板划线法接种,则常用的接种工具是
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【推荐2】【生物——生物技术实践】回答下列有关提取植物有效成分的问题:
(1)薄荷油具有易挥发、难溶于水等性质,因此适合选用_____ 法来提取。收集到的液体冷却后加入氯化钠的目的是______ ,然后加入无水硫酸钠除去残留的水分。
(2)从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是_____ 。对胡萝卜进行粉碎、干燥时,要特别注意干燥的____ 和时间,以防止胡萝卜焦糊。提取过程中宜采用___ 方式加热,以保障安全。
(3)为了提高胡萝卜汁的澄清度,需要加入果胶酶,该酶往往从某些微生物中提取。一般来讲,筛选微生物时常用的接种方法有____ 、______ 和稀释混合平板法,该过程用到的培养基从功能上讲,属于________ 培养基。
(1)薄荷油具有易挥发、难溶于水等性质,因此适合选用
(2)从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是
(3)为了提高胡萝卜汁的澄清度,需要加入果胶酶,该酶往往从某些微生物中提取。一般来讲,筛选微生物时常用的接种方法有
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【推荐3】2015年与我国女科学家屠呦呦平分诺贝尔生理学或医学奖的是爱尔兰科学家威廉-坎贝尔和日本药物科学博士聪大村,他们二人的贡献是发现了一种新的药物,名为阿维霉素,其衍生产品降低了河盲症和淋巴丝虫病的发病率,同时还能有效对抗其他寄生虫病,治疗效果显著。聪大村从土壤样品中分离链霉菌的新菌株,在实验室内通过成千上万链霉菌培养物筛选出一些较有发展前途的菌株,这就是阿维菌素的来源。
(1)制备链霉菌培养基时,在各成分都溶化后和分装前,要进行的是____________ 和灭菌,对培养基进行灭菌的常用方法是__________________ 。倒平板时要待平板冷凝后,将平板倒置,其主要原因是_____ 。
(2)图①是在纯化过程中通过_______ 法分离培养的结果,在培养基上接种时接种环需通过灼烧灭菌,完成图中划线操作,共需要灼烧接种环______ 次。图②表示的是用___________ 法接种培养后得到的结果。
(3)在纯化过程中,在固体培养基上划线分离时,经培养,在划线的末端出现_________ 表明菌种已分离。在此过程中,正确的操作是_________
(1)制备链霉菌培养基时,在各成分都溶化后和分装前,要进行的是
(2)图①是在纯化过程中通过
(3)在纯化过程中,在固体培养基上划线分离时,经培养,在划线的末端出现
A.每次划线时,接种环都需要蘸菌液一次 |
B.划线分离时,需要把接种环深入到培养基中进行接种 |
C.在超净平台中进行接种时,不能关闭过滤风 |
D.划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 |
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