【推荐1】利用噬菌体展示技术可以筛选到高亲和力的抗体，研究人员首先将禽流感抗体的轻、重链结合区改造成单链抗体片段基因，将其插入到丝状噬菌体DNA中，与噬菌体表面的结构蛋白（pIII）形成融合蛋白，选用相应抗原筛选高亲和力的单链抗体片段，用于后续改造和表达。请根据信息回答以下问题：

(1)构建噬菌体展示文库时，可将目的基因插入到__________基因旁形成融合蛋白基因。为使目的基因与载体有相同的酶切位点，可利用PCR技术，在目的基因右侧的引物中人工合成__________限制酶的识别序列，本实验优先考虑使用__________酶进行噬菌体展示表达载体的连接。
(2)将构建好的重组截体导入__________细胞中表达筛选前，通常先将受体细胞处理成__________细胞的状态，再借助电击等方法导入表达载体，进而获得表达产物。
(3)上述经过筛选得到的禽流感抗体与康复者体内筛选得到的抗体不完全相同，原因很可能是__________。
(4)为了与人体内抗体的结构和活性一致，还需将上述抗体基因在哺乳动物细胞中表达和筛选。在培养动物细胞表达抗体的过程中，通常需要向合成培养基中添加__________或血浆等天然成分，然后将培养皿放置于__________中，以维持37℃与5%的CO₂等条件。培养一段时间后可以利用__________的原理，从上清液中检测是否有目标抗体表达。
(5)扩大培养时，为避免出现__________的现象，当细胞铺满培养皿约80%左右时，应使用__________酶等处理，然后传代培养。

【推荐1】水蛭是我国的传统中药材，主要药理成分水蛭素为水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。拟通过蛋白质工程改造水蛭素结构，提高其抗凝血活性。回答下列问题:
(1)蛋白质工程流程如图所示，物质a是_______，物质b是_______。在生产过程中，物质b可能不同，合成的蛋白质空间构象却相同，原因是_______________________。

(2)蛋白质工程是基因工程的延伸，基因工程中获取目的基因的常用方法有___________、__________和利用 PCR 技术扩增。PCR 技术遵循的基本原理是____________________。
(3)将提取的水蛭蛋白经甲、乙两种蛋白酶水解后，分析水解产物中的肽含量及其抗凝血活性，结果如图所示。推测两种处理后酶解产物的抗凝血活性差异主要与肽的______（填“种类”或“含量”）有关，导致其活性不同的原因是______________________________。

(4)若要比较蛋白质工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素的抗凝血活性差异，简要写出实验设计思路________________________________________。

【推荐2】研究发现，水稻与其病原菌间的生存之道：水稻稻瘟病菌进化出模拟ROD1结构的毒性蛋白，在水稻体内盗用ROD1的免疫抑制途径，实现侵染的目的，称之为植物免疫抑制中枢ROD1作用机理；水稻因无法逃避病原菌的侵染，随之进化出与病原菌在相应环境中共同生存的策略，通过降解ROD1以减弱其功能，保证植物在抵御病原菌时能产生有效的防卫反应，不至于迅速发病枯死，并能繁殖后代。
(1)水稻进化出了与病原菌在相应环境中共同生存的策略，说明生物进化的过程实际上是______、生物与无机环境协同进化的过程，______是协同进化的结果。
(2)研究团队通过对3000多种不同水稻品种的基因序列分析，发现ROD1单个氨基酸的改变可以影响其抗性和地理分布，说明作物抗病性受地域起源的选择。研究团队在基因序列分析初期，需通过PCR技术（体外双链DNA复制）扩增待测序的DNA片段，若复制的DNA中含有胸腺嘧啶m个，则该DNA扩增4次，需要消耗游离的腺嘌呤脱氧核苷酸______个。扩增过程中需要具有模板DNA、______（至少写出连个）等基本条件，才能保障DNA复制顺利进行。

【推荐1】某科研小组欲用图1所示的质粒构建人胰岛素基因表达载体，让其在大肠杆菌中表达出人胰岛素前体物质，对人胰岛素基因所在的DNA片段进行测序，发现其两端附近无限制酶EcoRI、BamHI的酶切位点。已知人胰岛素基因表达时以②链为模板，且其3'端存在启动子，图1所示质粒上的amp^R为氨苄青霉素抗性基因，tel^R为四环素抗性基因。请回答下列问题：

   

(1)可采用________来获得人胰岛素基因，这一方法需要先针对人胰岛素基因两端的序列来设计引物对。这一方法获得的产物一般通过_________进行鉴定，若鉴定发现其中有许多种相对分子质量比人胰岛素基因小的DNA片段，则原因可能是______（答出一点）。
(2)为保证人胰岛素基因能正确连接到用限制酶EcoRI和BamHI处理的图1所示质粒上，且利用表达载体上的启动子在受体菌中以②链为模板进行转录，则应在配对到①链的引物5'端添加6个碱基，序列为5'-_______-3'。
(3)图1质粒上的amp^R和tet^R一般充当基因表达载体上的标记基因，其作用是________。利用质粒上的标记基因，结合微生物的培养，可以淘汰只转入质粒的大肠杆菌而获得被成功转入人胰岛素基因表达载体的受体菌，则应将重组载体导入_______（填“不抗氨苄青霉素”“不抗四环素”或“不抗氨苄青霉素和四环素”）的受体大肠杆菌中。