【推荐1】现从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，实验过程如下图所示：
土样→土壤浸出液→稀释→接种→培养、观察
请回答：
（1）欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，将土壤用________进行一系列的梯度稀释，同一浓度的土壤稀释液应至少涂布________个平板，通常以每个培养皿中有________个以内的单菌落的那一组稀释倍数为最合适。
（2）向培养基中添加尿素的方法是待其他成分灭菌冷却后，加入尿素溶液，而该尿素溶液要事先用________过滤，使之无菌。对照组配制的是通用细菌培养基，称为________培养基。配制时除了加入特定的营养物质以外，还要加入一定量的氯化钠，以维持________。对培养基酸碱度的调节，应该在高压蒸汽灭菌过程的________ (填“前面”成“后面)。
（3）接种后的培养皿________于37℃的恒温箱中培养。若培养基中存在含脲酶的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生氨气，与该培养基中的________产生的颜色变化，从而证明这一菌株能以尿素为氮源。
（4）下列操作需要在酒精灯火焰旁进行的是(多选)(         )
A.称取葡萄糖，琼脂糖等培养基成分               B.倒平板
C.涂布平板                                                    D. 微生物的培养

【推荐2】平菇具有味道鲜美、抗杂菌污染的优势，杏鲍菇具有菌丝强壮、生长旺盛的优势。为获得具有优良性状的平菇形菌株，研究者利用原生质体融合技术，进行了如下研究。
(1)以原生质体融合技术培育杂种新菌株的典型优势是_______________。
(2)用酶解法处理平菇和杏鲍菇获取原生质体，酶解之前需先用较_______________（选填高或者低）渗透压的溶液中处理。培养原生质体时，需要向培养液中加入适宜浓度的甘露醇来维持________________，以维持细胞正常的形态和功能。
(3)采用不同浓度PEG诱导原生质体融合，实验结果如下表所示

PEG质量分数	25%	30%	35%	40%
原生质体状态	有破碎现象哑铃型细胞比例<0.01%	表现正常哑铃型细胞比例0.03%	原生质体出现缩小现象哑铃型细胞比例0.01~0.02%	原生质体出现缩小现象哑铃型细胞比例0.01~0.02%

两个原生质体融合效果较好时会呈现哑铃型细胞，融合的原理是_______________。实验结果显示：_______________。
(4)鉴定菌株间遗传关系时，常将待测菌株的菌丝体接种于同一培养基内，若两菌丝体间长出“拮抗线”，说明二者的遗传关系较远（见图1）。借助此原理，快速筛选出一株与两亲本菌株遗传关系较远的融合菌株X，请在图2中绘制模式图，标注接种菌丝体位置、菌株类型，预测拮抗线的位置并标注。

(5)在组织培养发现，有一个MS培养基中没有加入杠杆激素的培养瓶中也长出了与加有杠杆激素的培养瓶中一样的愈伤组织，瓶中还长出了一些某种真菌的菌落。研究人员没有放弃这难得的机遇，初步做出一个假设，继续进行实验：
他们就地取材，首先纯化该真菌，再增设一组实验，具体做法是：在未添加杠杆激素的MS培养基中加入经高压蒸汽灭菌处理的该种真菌或经高压蒸汽灭菌处理过的_______________的培养基，再接种外植体，其他环境条件与正常组培相同，观察能否培养出正常的愈伤组织。
预测结果：如果产生了正常的愈伤组织，支持该假设。如果没有产生愈伤组织，不支持假设。他们做的假设是：_______________________________。

【推荐3】某化工厂土壤中含有大量的某种有毒化合物，为了从土壤中筛选出能够将这种化合物分解的菌株，改良土壤，改变当地生态环境。科研人员进行如下实验：
实验原理：固体培养基中某有毒化合物在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如下图），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物分解的能力大小。

实验步骤：
步骤一取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。
步骤二在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3~4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良分解性能的菌株（如下表）。

菌株	透明圈直径（D）	菌落直径（d）
M一3一01I	18.8	12.3
B3一5一6	20.7	8.0
T1一4一01	9.1	6.5

请分析回答：
（1）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是________________。
（2）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37°C、200r·min^- 1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量得到如图所示曲线。结果表明最优良的解磷菌株是_____________。

（3）若要对解磷菌计数需要进行纯化。在纯化菌种时接种了6个平板，每个平板均接种了0.lmL样品并培养。菌落数分别是210、230、47019029，则样品中菌种的数量为______个/mL。和直接用显微镜计数的结果对比__________（填写“偏大”或“偏小”），理由是_____________。
（4）对培养液进行灭菌时，高压灭菌锅的锅盖的排气管应放在灭菌桶___________（填写“内侧”或“外侧”）灭好菌后切断高压蒸汽灭菌锅热源，____________，打开放气阀放气，然后开启锅盖取出培养液。

【推荐2】塑料（聚乙烯）在自然界中很难降解，俗称“白色污染”，北京航天大学杨军教授偶然发现装米的塑料袋上有许多孔洞，还有虫子和飞蛾爬出。带着这些疑问，杨军教授对虫子消化道的微生物进行分离，从而找到了能降解塑料的微生物，回答有关问题：
（1）实验室分离聚乙烯塑料降解菌时应当以_________为唯一碳源。在获取肠道微生物后应先进行选择培养，其目的是__________,选择培养时所用的培养基从物理性质上属于____________培养基。
（2）对选择培养后的微生物分离时，可以采用平板划线法和稀释涂布平板法，当采用平板划线法分离微生物时，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是___________，当采用稀释涂布平板法分离微生物时，_________(需要/不需要）进行梯度稀释。两种方法都得到了多种菌落，根据它们的菌落特征对细菌进行分类，菌落特征包括菌落形状、大小、________和__________等方面。

【推荐3】某生物兴趣小组的同学利用课上所学的知识调查流经学校的河水的水质状况，目标菌为大肠杆菌。回答下列问题：
（1）测定河水的大肠杆菌的含量，首先要制备培养基，培养基中的蛋白胨可为大肠杆菌提供_________和________。
（2）实验过程中，对培养基进行灭菌，常采用的方法是________；对玻璃器皿和金属用具可以采用干热灭菌法来灭菌，原因是___________________________________。
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了河水样品的平板置于________中培养。在细菌培养过程中，需要放置未接种的培养基一起培养，其目的是______________。
（4）若想检测水样中大肠杆菌的数量，常采用______________法进行接种。该兴趣小组将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1 mL的稀释液；培养一段时间后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为______________。

【推荐1】某质粒上有SalⅠ、Hind Ⅲ、 BamHⅠ三种限制酶切割位点同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程，如图所示。请回答下列问题：

（1）将目的基因导入植物细胞，采用最多的方法是农杆菌转化法。其中用到的质粒是____________；该质粒含有一段特殊的DNA片段，称为____________。该方法中农杆菌的作用是________________________。
（2）在构建重组质粒时，和只用一种酶切割目的基因的两端及质粒相比，选用HindⅢ和SalⅠ两种酶的好处是____________________________________________________________。
（3）含有目的基因的农杆菌可根据标记基因进行筛选。若农杆菌在含有氨苄青霉素和四环素的培养基上都可以生长繁殖，农杆菌中是否已含有目的基因？____________（填“是”或“否”）。为什么？____________________________________。
（4）将已经转化的农杆菌进行如下筛选，筛选出符合要求的农杆菌。先把转化的农杆菌接种到A培养基中培养，长出菌落后，用无菌牙签挑取A上的单个菌落，分别接种到B（含氨苄青霉素）和C（含四环素和氨苄青霉素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如下图所示。含目的基因的菌落位于B或C上的哪些菌落中？请在图中相应的位置上圈出来。

___________

【推荐2】营养缺陷型菌株不论在生产实践还是科学实验中都有重要的意义。营养缺陷型是一些营养物质（如氨基酸、维生素和碱基等）的合成能力上出现缺陷的菌株。能满足某一菌种野生型（变异前）菌株营养要求的最低成分的培养基，称为基本培养基。营养缺陷型菌株必须在基本培养基中加入相应的一种或几种营养成分才能正常生长，这种培养基称为补充培养基。在基本培养基中加入一些富含氨基酸、维生素和碱基之类的天然物质（如蛋白胨、酵母膏等），可以满足该微生物的各种营养缺陷型的生长，这种培养基称为完全培养基。野生型产氨短杆菌能利用糖及无机盐经一系列酶促代谢反应合成腺嘌呤（或腺苷酸），然后再合成菌体所需的核酸等物质。示意图如下：

（1）一般可通过诱变方法获得腺嘌呤缺陷型菌株，方法为_____________________。
（2）将诱变处理后的存活个体培养在含有青霉素的___________（基本/补充/完全）培养基中，可以淘汰大部分野生型菌株而“浓缩”缺陷型菌株，其原理是___________________________________。该培养基也可称为__________培养基。
（3）将上述方法处理后的菌株培养在完全培养基（A）上，经培养长出菌落a、b、c，用灭菌丝绒“印章”轻按A表面，然后将其轻按在含有基本培养基（B）的培养皿上并培养。如下图所示，(        )是营养缺陷型菌株。如要进一步确定是腺嘌呤缺陷型，操作的方法是_____________________________________，结果____________________的菌株是腺嘌呤缺陷型。

（4）上述过程可归纳为_______________________________几个环节。
（5）腺嘌呤缺陷型须在基本培养基中供给琥珀酸腺苷酸才能生长，说明诱变导致________________________________。由此可见，腺嘌呤缺陷型菌株的发酵可用于生产（物质）______________。

【推荐3】【生物——选修1:生物技术实践】
“口嚼酒”因日本著名动画电影导演新海诚的新作《你的名字》而引起人们的关注。世界上有些地方很就有口嚼酒的记载。请回答下列相关问题：
（1）口嚼酒的做法是:首先需要将米煮熟，然后放入口中咀嚼—段时间，直至米粒变为糊状，再将其吐入特制容器中，令其发酵，经过几天便成为甜酸味的酒。上述的制作过程中，“咀嚼”可能具有两个作用，分别是__________和__________。参与口嚼酒形成初期的微生物主要是来自空气中的__________，末期形成酸味，可能是因为密封不严,产生了__________等物质。
（2）口嚼酒是一种自酿酒，不仅品质不高，而且卫生条件难以把握，会有杂菌滋生的危险。某生物兴趣小组想探究口嚼酒制作过程中会滋生哪些微生物，进行了进一步的实验，实验步骤如下：
①制作口嚼酒。
②制作培养基：计算→称量→溶化→__________→倒平板。
③接种：每天同一时间将口嚼酒液体摇匀后按照图1和图2的方法进行操作，该方法是________。并在每天接种的培养皿上注明培养日期，最后将所有培养基放在相同且适宜的环境下培养。
④经过一段适宜时间后，观察不同培养基上的菌落数和菌落的形态，并进行品种鉴定。图3是三个不同时间获得的培养基，其时间先后为________（填字母）。

上述实验在时间上形成前后对照，但是还需要设置一个空白对照，目的是________________________。
（3）兴趣小组成员在实验后期看到培养基上长满了许多杂菌菌落，若他们采用图4的方法对杂菌中的母的菌进行纯化，则在________（填数字）区最可能获得纯净的母的菌。