【推荐1】逆转录病毒可改造为基因工程运载体，改造过程主要包括构建包装质粒载体和转移质粒载体两部分，包装质粒载体携带的核心基因能编码逆转录酶、病毒衣壳蛋白、包膜等病毒结构；转移质粒载体上有基因表达载体必需的元件。当两种载体同时转染特定受体细胞后，可获得携带目的基因的“假病毒”。下图是构建逆转录病毒载体的主要过程，回答下列问题：

(1)基因工程的核心工作是______。图中“两种载体同时转染受体细胞”属于基因工程中______步骤。
(2)将包装质粒载体和转移质粒载体同时转染受体细胞的目的是获得大量______（填“携带转移质粒载体-RNA”、“携带包装质粒载体-RNA”、“同时携带转移质粒载体-RNA和包装质粒载体-RNA”）的“假病毒”。和普通运载体相比，这种“假病毒”将目的基因导入受体细胞的成功率很高，并可使外源基因通过核孔进入细胞核并插入到受体细胞染色体中，这依赖于______（填“包装质粒载体-RNA”或“转移质粒载体-RNA”）的作用。
(3)质粒上ori区域双链在复制时比较容易打开，可推断该处碱基中______所占比例较高，图中目的基因以______链作为模板进行转录。
(4)引物在DNA复制中的作用是：______。为了防止目的基因自我环化，设计PCR引物对目的基因进行扩增时，最好在两种引物的5'端分别添加限制酶______和______的识别序列。

【推荐3】Cre-loxP系统由Cre酶和loxP序列两部分组成，Cre酶作用能实现特定基因的敲除（如图1），图中箭头表示Cre酶的作用位点。利用基因工程技术培育抗虫抗除草剂水稻可减少因虫害（啃食叶片）和草害造成的稻米产量损失，为了增强食品安全性，科研人员利用Cre—loxP系统和组织特异性启动子P₃驱动Cre酶基因在胚乳中特异性表达，从而培育出了能够特异性删除种子胚乳中外源基因的转基因水稻品系。获得转基因愈伤组织过程如图2。回答下列问题。

(1)图1中，Cre酶作用于DNA特定部位的________键。Cre酶作用于两个loxP位点形成________的黏性末端，从而连接形成环状片段1和片段2。
(2)图2中，过程①使用的限制酶是________，选择P₂作为抗虫基因特异性启动子的优点是________。
(3)图2中，过程③为植物组织培养中的________过程。利用农杆菌转化法将目的基因导入愈伤组织后，将愈伤组织转移到含有________的培养基上筛选出转化成功的愈伤组织，经过植物组织培养获得转基因水稻。
(4)利用RT-PCR方法验证胚乳中外源基因的特异性敲除：提取转基因植物叶肉细胞和胚乳细胞的总RNA、野生型植物的叶肉细胞和胚乳细胞的总RNA，分别以GAPDH基因（内参基因）、EPSPS基因和cry1C基因的序列为依据设计引物进行RT-PCR，扩增后电泳，结果如图3（条带1和2分别为野生型叶肉细胞和胚乳细胞对应的电泳结果）。

①利用RT-PCR扩增EPSPS基因进行鉴定，有关引物必须考虑________。
A.EPSPS基因两边末端与引物等长的核苷酸序列
B.引物的5′端添加限制性核酸内切酶识别序列
C.两个引物及一个引物内部的碱基序列是否配对
D.引物长度、GC含量及在PCR反应体系中的浓度
②根据图3判断，________号条带为转基因叶肉细胞对应的电泳结果。转基因水稻________细胞中无EPSPS基因和cry1C基因，其机理是________。