【推荐3】土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应，科研人员进行如下实验：
实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图1），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：
步骤1   取某地区土样5 g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1 mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72 h。
步骤2   在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3~4 d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如表）。

菌株	透明圈直径（D）	菌落直径（d）	D/d
M-3-01	18．8	12．3	1．5
B3-5-6	20．7	8．0	2．6
T1-4-01	9．1	6．5	1．4

请据以上资料，回答下列问题：
（1）从物理形态上看，培养基A属于__________培养基，为了筛选出优良解磷菌株，培养基中加入的磷源是__________。
（2）步骤1中的接种方法是__________，应该在__________旁完成操作。根据表中的实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是__________。
（3）为测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37℃、200 r·min^-1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到如图2所示曲线，结果表明最优良的解磷菌株是__________。
（4）为进一步检测发酵过程中上述最优良菌的数量，实验者将1 mL该菌发酵液稀释1000倍后，分别取0．1 mL稀释菌液均匀涂布在5个平板上，经适当培养后，长出的菌落数分别为13、156、462、178和191，据此可得出每毫升发酵液中的活菌数为__________个。与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较__________。

【推荐1】枯草芽孢杆菌是畜禽养殖中常用的益生菌之一，能产生多种酶和抑菌物质，常用作饲料添加剂。研究人员欲从高产奶牛瘤胃液中筛选出能够高效产酶及抑菌的菌株，结果如下表。

菌株编号	产酶活性（U/mL）			抑菌圈直径（mm）
	纤维素酶	蛋白酶	淀粉酶	大肠杆菌	金黄色葡萄球菌	伤寒沙门氏菌
AX1-3	12.67	11.82	293.55	11.06	/	14.11
BXI-10	5.53	1.34	156.21	/	14.33	22.00
BXI-12	27.33	137.54	1450.53	13.62	23.21	25.97

注：“/”表示无抑菌圈。
回答下列问题：
(1)将培养皿等玻璃器皿放入________内灭菌；牛肉膏蛋白胨可以为菌株提供________等营养物质，在提供营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对________________________的要求（答出 2 点）。
(2)在饲料中添加枯草芽孢杆菌的目的是：一方面________________，有利于奶牛消化食物；另一方面能够抑制病原菌生长，提高畜禽的抵抗力。
(3)用不含菌株的培养液进行抑菌试验时，制备多个分别涂布了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌的平板，在每个平板上打4个8mm的小孔，并向4个小孔中分别加入等量的去除AXI-3菌株的培养液、去除________的培养液、去除________的培养液和未培养过枯草芽孢杆菌的无菌培养液。
(4)据表分析，编号为___________的菌株更符合筛选要求，依据是________________________。

【推荐2】某水厂为检测自来水中的大肠杆菌含量是否超标，取水样进行检测。回答下列相关问题∶
（1）培养大肠杆菌用LB培养基，该培养基的成分有蛋白胨、酵母提取液、氯化钠和水，其中蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养是_____，在制备该培养基时需要将 pH调节至_____。
（2）在对制备的培养基进行灭菌时，发现当灭菌锅内压力升到 100 kPa时，温度未达到121℃，其原因是_____。在培养基上接种水样之前，需要检测培养基是否被污染，对固体培养基应采用的检测方法是_____。
（3）鉴别大肠杆菌时，需要在固体培养基中加入_____，研究人员将一定体积的水样过滤后，将滤膜放在该培养基上进行培养，培养时需要将培养基倒置，原因是_____和避免培养基中的水分过快地挥发。每隔 24 小时统计_____色的菌落，间隔 24小时统计的目的是_ _____。

【推荐3】甲醛具有强烈致癌和促癌作用。一科技小组欲从某化工厂淤泥中分离能分解甲醛的细菌并进行降解效果鉴定，实验中配制甲种培养基对目标细菌进行选择培养，配制乙种培养基观察、鉴定目标细菌。回答下列问题：
（1）乙种培养基需加入___________让培养基呈固体状态；两种培养基均需为目标细菌提供的营养包括水、无机盐、___________。
（2）从化工厂采样后，________________（填“需要”或“不需要”）对污泥做灭菌处理。利用甲种培养基选择培养的目的是___________________________；取甲种培养基中的菌液涂布到乙种培养基上，需在_____________旁操作以避免杂菌污染。
（3）根据乙种培养基上菌落特征可鉴定目标细菌种类，依据是_________________；实验中发现乙种培养基上出现多种菌落，在培养基没有受到污染及成分正常情况下，其可能原因是___________________________。

【推荐1】为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如下图操作。用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中，如此重复3次，将10mL生牛奶稀释到10-4浓度后，取0.1mL滴在培养基上。

(1)牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物。巴氏消毒的方法是____________________。
(2)将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布，应选择的涂布工具是__________。
A．       B．       C．       D．
该涂布工具最合适的灭菌方法是__________。
A．火焰灼烧       B．高温高压灭菌       C．酒精擦拭       D．紫外线照射
(3)消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死，若用稀释培养法检测消毒后牛奶是否含有细菌，则在操作步骤上应作什么改动？____________________。
(4)从生牛奶取样培养得到的菌落中，混有各种杂菌，从中检测出大肠杆菌的方法是，在培养基中加入__________，具有__________特征可以鉴别大肠杆菌。大肠杆菌的基因分布于__________。
(5)实验过程中，在将灭菌后的固体培养基倒入无菌培养皿之前，盛有培养基的三角烧瓶瓶口须进行火焰烧烤，其作用是__________。培养基凝固后，培养皿往往需要倒置，其作用是__________。

【推荐2】微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。如图甲、乙、丙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图，请据图回答有关问题：

(1)图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，它称为_________，若用该培养基培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑__________和特殊样物质等条件。
(2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染，对于固体培养基应采用的检测方法是___________________。
(3)图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是A→B→_____________(用字母和箭头表示)；找出图乙中两处错误的操作：_________(用字母表示)。
(4)图丙是某同学用平板划线法接种后的培养基培养12 h后的实验结果，如果培养基上___________，则说明无菌操作基本符合要求。
(5)图丙用的接种工具是___________；对接种工具进行灭菌的方法是_________________。
(6)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？________________________。

【推荐3】回答下列有关微生物与基因工程有关的问题
1. 基因工程的第一步是获取目的基因，获取的方法包括__________和化学方法人工合成。如果要想获取人的胰岛素基因，只能用化学方法人工合成，具体的做法是从人体__________细胞中获取胰岛素mRNA，再通过__________过程即可获得目的基因。
2. 基因工程的第二步是将目的基因和运载体重组，重组时需要选择合适的限制酶和________酶。常用的运载体是细菌质粒（如图示），
质粒中ori为质粒复制所必需的DNA序列，启动子是使转录开始的一段DNA序列，终止子是提供转录终止信号的DNA序列。青霉素抗性基因作为__________基因，以便于筛选。质粒上还有多种限制酶的切点，若目的基因上也有上述质粒中相应限制酶的切点，为避免目的基因自身的环化并能与图中质粒准确重组，可选用的限制酶是____
A. NdeI和XbaI       B. NdeI和BamHI     C. XbaI       D. PstI       E. BamHI
3. 基因工程的第三步是将重组质粒导入受体细胞，例如，转基因动物常用的受体细胞为____________。
4. 基因工程的第四步是筛选出导入重组质粒的受体细胞。
（1）如用大肠杆菌作为受体细胞，则该大肠杆菌中不应含有青霉素抗性基因，请阐述其原因？_______________________________________________________。
（2）培养导入了重组质粒的大肠杆菌时，需配制培养基。该培养基除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入的物质有____
A. 细胞分裂素       B. 琼脂       C. 噬菌体       D. 青霉素

【推荐1】纤维素是地球上资源最丰富的有机物，有相当大一部分被废弃，成为环境污染物。某研究小组欲从牛粪与稻草堆腐物、垃圾堆腐物等不同材料中分离高效纤维素降解菌，以提取更高效的纤维素酶，用于降解纤维素，实现变废为宝。回答相关问题：
(1)在配制选择培养纤维素分解菌的培养基时，需加入____粉作为碳源，纤维素酶是一种复合酶，一般包括C₁酶、Cx酶和__。
(2)为了筛选出高效纤维素降解菌，需在培养基中加入___染料，常采用的接种方法是________和稀释涂布平板法，采用第一种方法时，若要在五个区域划线，共需灼烧接种环____次，两种接种方法的所有操作都应在酒精灯火焰附近进行，目的是________。接种后在恒温箱中培养，长出菌落开始筛选，选择___菌落，即为高效纤维素降解菌。
(3)实验结束时，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉，其原因是____。

【推荐2】马铃薯琼脂培养基是将马铃薯去皮切片，加水煮沸一定时间，用纱布过滤得到马铃薯浸出液，加入一定量蔗糖和琼脂，用蒸馏水定容后灭菌而得到。请回答下列问题：
（1）培养基中的马铃薯浸出液主要为微生物生长提供了水、______________________（答出其他三类）等营养物质。该培养基通常用于培养或筛选真菌，若在培养基中加入链霉素则可以抑制_______的生长，从培养基功能上分析，加入了链霉素的培养基应属于____________培养基。
（2）若在该培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后，可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是____________，该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是________________________。
（3）有两位同学欲测定某一土壤样品中微生物的数量，用稀释涂布平板法接种了同一稀释倍数的土壤样品稀释液，得到以下结果：
甲同学涂布了3个平板，统计的偏落数分别是116、147和154，取平均值139；
乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、179和186，取平均值131。
这两位同学的结果中，_______同学的结果可信度低，其原因是________________________。

【推荐3】某动物体内含有研究者感兴趣的目的基因，研究者欲将该基因导入大肠杆菌的质粒中保存。该质粒含有氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、LacZ基因及一些酶切位点，其结构和简单的操作步骤如下图所示。请根据以上信息回答下列问题。
(1)在第②步中，应怎样选择限制酶？_______________________。在第③步中，需要在混合物中加入__________使质粒DNA与目的基因连接。
(2)在操作步骤中为什么选用含有AmpR和Lacz基因的质粒？_______________。
(3)在第④步中将连接产物导入大肠杆菌之前，应用_______处理大肠杆菌，目的是_______。
(4)大肠杆菌与重组质粒混合培养一段时间后，采用___________法将大肠杆菌接种到添加了_______________ 的培养基上，培养一段时间后筛选出_____ 色的菌落即为工程菌种，为什么？______________________。

注：LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色；否则菌落为白色。