【推荐1】研究发现，人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品。科学家将该蛋白基因导入山羊体内使其能够在山羊乳腺细胞中表达，从山羊乳汁中提取人溶菌酶，下图表示培育流程。

(1)获取hLZ基因后构建重组质粒常用到___酶。为了保证hLZ基因在山羊乳腺中表达，构建基因表达载体时需注意的问题是___。
(2)胚胎工程最终的技术环节是过程___（填序号），其实质是___。
(3)在进行过程④之前，必须获取囊胚的滋养层进行___，为了获得更多的乳腺生物反应器，可在该时期进行胚胎分割，分割时应注意___。
(4)为探究冷冻胚胎分割前培养时间对分割后胚胎发育率的影响，每组取60枚同种冷冻胚胎，分别在解冻后培养0、15、30、45、60、90、120min进行分割，将各组半胚和对照组整胚用培养液培养24h，统计胚胎发育率，结果见表。
冷冻胚胎分割前培养时间对胚胎发育率的影响

组别	培养胚胎数/枚	培养24h囊胚数/枚	胚胎发育率/%
对照	60	57	95.00
0min	60	44	73.33
15min	60	32	53.33
30min	60	48	80.00
45min	60	61	85.00
60min	60	41	68.33
90min	60	34	56.67
120min	60	42	70.00

由表中数据可知，分割造成的损伤会降低胚胎发育率，判断的依据是___；冷冻胚胎分割前最优培养时间大约是___分钟。

【推荐2】I.如图为人体细胞与内环境的示意图，请据图回答问题。

（1）④的渗透压大小主要与________的含量有关，③的具体内环境是________。
（2）血液中的氧被组织细胞利用经过的途径(用图中的数字表示)________________，共穿过________层膜结构，CO₂浓度最高为图中的[　]________。
（3）④与⑥相比，⑥中含量很少的成分主要是_________________________。
（4）若⑦细胞是肌细胞，长时间剧烈运动后，血液中的乳酸含量会增加，但血浆pH保持稳定，此时参与稳态调节的物质主要是________等。
II.酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可用于生产食品和药品等。科学家将大麦细胞中的LTP1基因植入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌可产生LTP1蛋白，并酿出泡沫丰富的啤酒。基本的操作过程如图：

(1)该技术定向改变了酵母菌的性状，其遗传学原理是_____。该技术又称为______。
(2)本操作中为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内，所用的运载体是________。
(3)要使运载体与LTP1基因连接，首先应使用________进行切割，切割完成后，利用________将运载体与LTP1基因连接。
(4)要检验目的基因是否导入受体细胞，可用_____________________培养基培养酵母菌细胞，如果_____________________则说明导入成功。

【推荐3】农业生产中除草剂的有效成分草甘膦能够专一性抑制EPSP合酶的活性，从而使植物体内多种代谢途径受到影响而导致植物死亡。草甘膦没有选择性，它在除掉杂草的同时也会使农作物受损。现以矮牵牛为实验材料，以EPSP合酶基因为目的基因探究利用转基因技术解决这个问题的一种方法：

限制酶名称	识别序列和切割位点
Sau3AI	↓GATC
BamHI	G↓GATCC
EcoRI	G↓AATTC
SmaI	CCC↓GGG
HindII	GTT↓AAC
KpnI	GGTAC↓C

   

说明：供体DNA中的EPSP基因以β链为转录模板链
(1)某种限制酶是从肺炎链球菌（Steptococcus pneumoniae）的R型菌株中分离出来的第二种限制酶，则命名为___。
(2)综合以上描述，用一句话概括该探究实验的名称：___。
(3)分别选用限制酶___和___处理含有目的基因的DNA和质粒，再用___（填“E.coli DNA连接酶”或“T4 DNA连接酶”）处理并构建重组质粒。
(4)将目的基因导入矮牵牛体细胞内一般采用农杆菌转化法，其中转化是指___。

【推荐1】为研究组蛋白去乙酰化酶8（HDAC8）基因的功能，研究人员利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建HDAC8基因缺失的突变体斑马鱼。CRISPR/Cas9基因编辑技术的原理如图1所示。回答下列问题：

(1)sgRNA是向导RNA，可引导限制酶切割靶基因特定的碱基序列。分析图1可知，敲除HDAC8基因前，要根据______的原理设计合成sgRNA，sgRNA和Cas9蛋白的复合物与HDAC8基因的靶点结合并进行切割。
(2)表达sgRNA和Cas9蛋白的重组质粒通过______方法导入斑马鱼的受精卵中，经过______（填生物工程技术名称）获得HDAC8基因缺失的突变体斑马鱼。检测两种斑马鱼的HDAC8蛋白，结果如图2所示。经过CRISPR/Cas9编辑后，HDAC8基因可能发生了碱基的______，导致mRNA上的______，产生了异常的HDAC8蛋白。若要检测受体是否翻译出了异常HDAC8蛋白，则常利用的技术是______。
(3)培育HDAC8基因缺失的斑马鱼纯合突变体，比较野生型和纯合突变体在捕食性天敌存在条件下的相关活动指标，结果如图3所示。推测HDAC8基因有利于______，进而有利于生存。

【推荐2】重组人血小板生成素（rhTPO）是一种新发现的造血生长因子，下图为通过乳腺生物反应器产生rhTPO的相关过程。回答下列问题：

(1)乳腺生物反应器的原理是rhTPO基因与________的启动子等调控组件构建成基因表达载体，通常采用________技术将重组质粒导入受精卵，获得转基因动物。最终使rhTPO基因在转基因动物的乳腺中表达，通过分泌乳汁获得rhTPO。
(2)采用SRY—PCR方法对早期胚胎进行性别鉴定，样本细胞取自________，以Y染色体中含有的特异性SRY基因为探针，通过________方法进行胚胎的性别鉴定。
(3)据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞需要在含卡那霉素的培养基上进行，原因是________。

【推荐3】锌转运蛋白在某种植物根部细胞特异性表达并定位于细胞质膜，具有吸收和转运环境中Zn²⁺的功能。为研究该植物某种锌转运蛋白与吸收Zn²⁺相关的生物学功能，通过基因工程对锌吸收缺陷型酵母进行转化。回答下列问题：
(1)扩增锌转运蛋白基因时，以该植物_______为材料提取并纯化mRNA，通过______合成cDNA.设计引物进行PCR扩增，PCR完成以后产物通常采用__________来鉴定。
(2)为便于锌转运蛋白基因与质粒连接，需在PCR引物的__________端加上限制性酶识别序列，且两种引物含不同的限制性酶识别序列，主要目的是为了防止构建基因表达载体时出现_______（答出一点即可）。为保证锌转运蛋白基因的表达，常利用酵母质粒作为载体，并借助质粒上原有基因的________，并将目的基因插入在它们之间。
(3)酵母菌转化，取冻存的锌吸收缺陷型酵母菌株，活化、培养后用重组表达载体转化酵母菌。转化前一般用醋酸锂处理酵母菌细胞，使细胞处于感受态，目的是___，通过_____检测目的基因在受体细胞中的表达锌转运蛋白水平的高低。
(4)已知锌吸收缺陷型酵母增殖较慢，通过设置一个固体培养基来鉴定转化酵母是否赋予了锌吸收特性。配置含适量Zn²⁺的（酵母菌）固体培养基、灭菌，分成a、b两半区域，a区接种涂布少量的缺陷型酵母，b区接种涂布少量的转化酵母，在适宜的条件下培养一段时间后，如何判断有转化成功的酵母？ _______。

【推荐1】2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图回答下列问题：

（1）由于女性的自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射____________激素，促使一次有更多的卵泡发育。
（2）重组细胞需培养到MⅡ中期的原因是该时期的卵母细胞才具备________________
（3）三亲婴儿的培育技术________（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，而___________（填“能”或“不能”）避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。三亲婴儿的染色体______（填比例）来自母亲提供的细胞核。
（3）试管婴儿与正常婴儿受精场所分别为_________、_________。设计试管婴儿与试管婴儿的主要区别是____。

【推荐2】通过胚胎工程建立的转基因动物模型，常用于基因表达调控的研究、良种动物的筛选以及基因药物的生产等。制备转基因鼠的流程如图所示，请回答下列有关问题：

（1）体外受精时，人工采集的动物精子必须经过___________处理才能完成图示中的①过程，完成②过程常采用的方法是____________________。
（2）图示中甲为处于__________期的去核卵母细胞。以体细胞为供体进行⑤过程成功率较低，而以胚胎干细胞为供体成功率会显著提高，原因是____________________。
（3）图中重组细胞需要利用__________技术培养到适宜时期才能进行移植，胚胎移植过程中，是否需要通过注射免疫抑制剂以避免代孕鼠对植入的胚胎产生排斥反应?_ __________（填“是”或“否”）。为获得更多转基因鼠，可在胚胎移植前对胚胎进行__________。
（4）进行胚胎移植的优势是可以____________________。

【推荐3】随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。

(1)图中产生小牛的几个途径中，属于有性繁殖途径的为应用_________（填数字）。
(2)应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射_____________，使用_____________技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛性别为_________。
(3)_______________________标志着受精过程的完结。应用2过程中得到的胚胎应该移植到____________的雌性动物体内。
(4)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过胚胎分割技术获得二分胚①和②，操作时需要注意_____________________，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。若要进行性别鉴定，取________细胞。
(5)通过核移植和体外受精得到的胚胎在遗传组成上的区别是________________。
(6)应用4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养过程中所用的培养基为__________，因此通常需要加入____________等天然的成分；动物细胞培养时需通入__________的混合气体，其中CO₂的主要作用是__________________________。

【推荐1】下图1是一个大型净水塘，塘的前部有吸附大颗粒的吸附基质，中部水面有固定化小球藻的圆柱浮床，小球藻可以吸收重金属离子，塘的后部生存着藻类、荷、芦苇、鱼、虾、蚌、水丝蚓（一种水中生活的蚯蚓），塘的底部为厚厚的河泥，回答下列问题。

(1)图1不同区域选择种植不同类型的植物，在净化水体的同时又能美化环境，这体现了生态工程建设的______原理。池塘后部生物的差异分布体现了群落具有______结构。
(2)对水塘中鱼的数量进行调查，其增长速率变化如图2所示。采用的调查方法为______。为持续获得较大的捕捞量，则最佳捕捞时间点是图中______点对应的时间。t₂所对应的数量称为______。
(3)科研小组对该人工鱼塘的能量流动进行定量分析，得出相关数据，如表所示（能量单位：J/cm²·a，除表中所列的消费者外，其他类型的消费者忽略不计）。

不同生物 不同能量	生产者	植食鱼类	肉食鱼类
流入下一营养级的能量	14.0	2.5	0.24
A	22.9	3.9	2.0
流向分解者的能量	3.1	0.6	0.06
有机物输入的能量	-	2.0	5.0
未被利用的能量	70.0	9.0	5.2

分析表中数据及各营养级能量的分配，表中A是指______，流经本生态系统的总能量为______。第一营养级与第二营养级之间的能量传递效率是______（保留小数点后一位）
(4)由于受到某种污染，导致每天鱼塘内鱼死亡个体逐渐增多，最后所有鱼类全部死亡，这表明____________是有一定限度的。

【推荐2】[生物一选修3现代生物科技专题]

某城市近年一直走“绿色”发展之路。绿色城市的重要标志之一实现垃圾的“减量化、资源化和无害化”。下图是垃圾资源化、无害处理的一种方案：

（1）该方案要遵循的基本原理是_________________和____________________。
（2）从对资源的充分利用角度看，④、⑤途径优于③途径的主要原因是什么？________
（3）为了提高猪对蛋白饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过______方法导入猪的受精卵中，构建重组质粒时需使用_____和_______两种工具酶。若要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技术是_________；该受精卵培养至一定时期可通过_____________方法，从而一次得到多个转基因猪个体。