【推荐1】铁皮石斛是一种名贵中药材，有生津养胃、降血糖和增强免疫力等作用，有效成分为石斛多糖、石斛碱等，温州雁荡山素有“中国铁皮石斛之乡”的美誉。请回答：
(1)用优良品种自然生长的茎快速繁殖铁皮石斛时，给茎消毒时无需使用的是_________ (A.乙醇B.无菌水 C.甘露醇 D.次氯酸钠)。在细胞分裂素相对较多和生长素相对较少的培养基中培养茎的切段，待长出较多的_________，将其进行_________ (处理）后再转入_________培养基中继续培养，直至长成幼苗。这种通过组织培养技术快速繁殖植物的方法，也称为_________。
(2)研究发现，铁皮石斛的生长发育与其体内的内生菌密切相关。为进一步研究内生菌作用, 需要大量内生菌进行相关实验。分离内生菌时最好采用_________ (A.G6玻璃砂漏斗过滤法 B.血细胞计数法 C.划线分离法 D.涂布分离法），再将纯化的内生菌转移到液体培养基中进行_________。
(3)研究发现，200mg/L浓度的卡那毒素能有效抑制铁皮石斛细胞的增殖与分化。科学家欲利用卡那霉素，采用农杆菌转化法对现有铁皮石斛品种进行基因改良。在基因工程操作中,导入受体细胞的_________分子应同时带有目的基因和________基因，这样才能利用含有卡那霉素的培养基将成功导入目的基因的受体细胞筛选出来。
(4)鉴定铁皮石斛的品质，可通过苯酚-浓硫酸法测定石斛多糖的含量。其原理是：石斛多糖水解成单糖并脱水生成糖醛衍生物后，与苯酚缩合生产橙黄色化合物，在490mm处测定光密度值，以不同浓度的葡萄糖溶液为标准溶液建立标准曲线，便可知道样品的石斛多糖含量。这种方法类似于泡菜汁中_____________含量的测定，称之为_____________法。
(5)为高效提取石斛多糖，可在提取液中加入___________，以提高铁皮石斛的出汁率。

【推荐2】下表是土壤中分解尿素的细菌所用的培养基配方，据此回答下列问题：

组分	含量
KH2PO4	1．4g
Na2HPO4	2．1g
MgSO4·7H2O	0．2g
葡萄糖	10．0g
尿素	1．0g
琼脂	15．0g
水	定容至 1000mL

(1)从物理形态上看，该培养基属于_____培养基；从用途上看，该培养基属于_____培养基。
(2)该培养基含有微生物所需要的_____类营养物质。其中最主要的碳源是_____，氮源是_____。细菌能利用该氮源是由于其体内能合成_____酶。
(3)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素，可在培养基中加入_____指示剂，若指示剂变_____，说明有目的菌株存在。
(4)培养过程中，常选择菌落数在_____ 的平板统计计数，统计的菌落数往往比实际活菌数目_____，原因是_____。可通过观察菌落的_____、大小、_____、隆起程度等特征对微生物进行鉴定。
(5)为了测定微生物的数量，接种时应采用_____法，某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为10⁶的土壤样液0．1mL，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为_____个。
(6)为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏。对于频繁使用的菌种，可以采用_____的方法；对于需要长期保存的菌种，可以采用_____的方法。获得纯净培养物的关键是_____。

【推荐3】废水中含有多种难降解的有机污染物，研究者利用培养基分离出能降解部分有机污染物的微生物，如图1所示。

（1）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调节_______；接种前要进行_____，这种操作的目的是_______________________。
（2）为了将图1培养基中的真菌与细菌分离，新制了 PDA 培养基（含马铃薯、葡萄糖、琼脂、蒸馏水）并加入青霉素（抑制细菌细胞壁的合成）。接种时用绒布轻按图1培养基表面，使绒布面沾上菌落，再将绒布轻按在新制培养基表面，培养结果如图2所示。比较图1、2可知，图1中菌落____________（填编号）为细菌，判断理由是__________________________。
（3）图2中出现菌落5的原因不可能是________________
A．绒布未灭菌                                B．被抗青霉素细菌污染
C．培养基灭菌不彻底                      D．由无菌培养基自然发生
（4）经分离纯化后分别测定真菌、细菌对废水中有机污染物的降解作用，如图3所示。进一步研究发现，真菌能将所产生的降解酶分泌到胞外起作用，而细菌不能分泌，降解酶只在胞内起作用。据图3，说明两种菌降解有机污染物效率的差异____________________________________________________。从细胞器角度，分析说明细菌不能向胞外分泌降解酶的原因_____________________________。

【推荐1】牛奶消毒不过关容易携带细菌。根据国家标准（GB19645—2010）规定，每毫升合格的牛奶细菌总数不能超过50000个。某兴趣小组利用恒温水浴锅对新鲜牛奶进行消毒然后检测消毒的效果，如下图所示。

（1）图中步骤①对牛奶的消毒的方法是______，一般采用______对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，蛋白胨的作用有__________（写两点）。
（2）步骤②将牛奶进行梯度稀释的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培养基表面形成______。步骤③的接种方法是__________，这种方法可以用来统计样品中活菌的数目，其原理是_____________________________________________________________________________。
（3）兴趣小组通过步骤①～③接种了3个平板和1个未接种的平板放入恒温培养箱，在适宜的温度条件下培养48h，然后统计出4个平板上的菌落数分别是57、53、55和9。根据这样的实验结果______（填“能”或“不能”）判断该兴趣小组消毒后的牛奶细菌超标，原因是___________________________。
（4）如果要检测牛奶中是否含有大肠杆菌，需要在培养基中加入______（填物质），观察是否出现黑色（或蓝黑色）的菌落。

【推荐1】微生物在自然界中无处不在，随人类对微生物认识的加深，对其利用越来越广泛。生活中人们利用霉菌、乳酸菌分别制作腐乳、泡菜。请回答下列问题：
（1）民间制作腐乳时___________ (填“需要”或“不需要”)灭菌。生产上为了获取纯种的毛霉菌种,实验室一般采用__________分离纯化菌种,然后从中挑出所需菌种。在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是___________。 培养一段时间后会观察到菌落，菌落的含义是__________________________。
（2）泡菜制作中可能会产生亚硝酸盐,在发酵过程中影响亚硝酸盐含量的因素有_______。绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿液排出,只有在特定的条件下,才会转变成致癌物即________________________。 
（3）微生物代谢产物中含有多种蛋白酶，凝胶色谱法分离这些酶时先收集到的酶是____________，（答“大分子蛋白质”或“小分子蛋白质”），理由是____________。

【推荐2】奶牛的瘤胃中有大量的尿素分解菌。现有科学小组利用屠宰场提取的奶牛瘤胃内容物，对其进行分离计数，过程如下图。请据图分析并回答下列相关问题：

（1）配制培养基时，除以_____作为唯一氮源外，还需加入的营养成分有_____，制成培养基灭菌后备用。
（2）将5g内容物加入_____ ml无菌水制成滤液，并继续进行_____稀释。取不同浓度稀释液各0．1ml，用涂布平板法接种到培养基上，需在无氧条件下培养，原因是______。在饲料中添加尿素后，奶牛小肠总蛋白质增加60%～85%，其原因是_________________________。

【推荐3】反硝化细菌是一类能将硝态氮（﹣N）脱氮，还原为气态氮（N₂）的细菌群，反硝化作用也是产碱过程。反硝化细菌对于解决水体富营养化和亚硝酸盐对水生动物的毒害，具有十分重要的意义。某课题小组通过采集活性污泥样品，并从中分离反硝化细菌，进行相关研究。反硝化细菌的分离和鉴定流程如下，回答下列问题：

(1)活性污泥是微生物的天然培养基，该培养基能为微生物的生长提供四大营养物质，分别是________________________。
(2)将采集的活性污泥样品 10g 加入到装有 90mL 无菌水的烧杯中，摇匀，取 1mL 上清液加入盛有 9mL 无菌水的试管中，依次等比稀释。分别取 0.1mL 菌液，使用______（工具）将菌液接种于培养基表面。10⁵ 倍稀释液对应的三个平板的菌落数分别为 83、84、85，则每克污泥中微生物有______个。
(3)富集培养是将活性污泥样品接种到富集培养基中培养，富集培养基的成分有：KNO₃2g，FeSO₄0.2g，KH₂PO₄1.0g，MgSO₄0.5g，NaCl2g，CaCO₃5g，其中为反硝化细菌提供氮源的是______，富集培养的目的是________________________。
(4)将富集后的样品均匀涂布在 BTB 培养基（BTB 培养基初始 pH＝6.8，BTB 是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色）上，放在 30℃环境中培养 2～3 天后，挑选周围显______色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。
(5)向几组等量的灭菌后的培养基中分别以 1%、3%、5%、7%和 10%的接种量接入反硝化菌株，在 30℃，120r/min 摇床震荡培养，24h 后测量﹣N 等指标，结果如图所示：

①本研究的目的是________________________。
②当投菌量达到______时，反硝化效果最好，依据是___________。

【推荐1】党的十九大报告指出要“大力度推进生态文明建设……全面节约资源有效推进，能源资源消耗强度大幅下降。重大生态保护和修复工程进展顺利，森林覆盖率持续提高。生态环境治理明显加强，环境状况得到改善”。请回答下列相关问题：
（1）生态工程是对___________进行修复重建，对________________进行改善，促进人和自然的和谐发展。
（2）全面节约资源有效推进，能源资源消耗强度大幅下降很大程度上得益于实行“_________”的原则，从而实现废弃物的资源化。
（3）实行生态工程，很多时候还需要考虑人文关怀、贫困地区的收入等问题，才能很好的解决“前面造林，后面砍林”的现象，这遵循的是生态工程的__________原理。
（4）在保护濒危植物方面，运用了很多技术，比如微型繁殖运用的是__________技术，其原理是_______。
（5）在处理城市生态系统垃圾时，采用了生物治理法，分解者处理垃圾的相关目的基因从分解者体内用________酶切割下来，再与_________相连导入受体菌。

【推荐2】某研究团队拟从餐厨垃圾中分离具有高效降解能力的微生物，并制成菌制剂，用于餐厨垃圾高效无害化处理。设计实验如下：
步骤一：取一定量的餐厨垃圾样品，筛除大块杂质后，装入无菌袋中密封，备用。
步骤二：配制用于培养菌种的培养基，配方如下：

成分	蛋白胨	牛肉膏	氯化钠	琼脂
含量（g/L）	10	15	10	5

1. 根据配方可知，该培养基属于________
A. 固体培养基       B. 液体培养基
C. 通用培养基       D. 选择培养基
步骤三：制备样品稀释液，并将不同浓度的样品稀释液涂布于平板培养基表面进行培养，48h后观察结果。
2. 在涂布过程中需要用到的工具有_________
A. 无菌圆纸片       B. 无菌玻璃刮铲       C. 酒精灯       D. 接种环       E. 无菌滴管
3. 培养后，培养基上长出了35个菌落，通过观察菌落的____________，可初步判断是20种不同的菌种。为进一步确定菌种类型，还需从分子水平进行的检测方法是_____________。
步骤四：对20种菌种进行分离纯化。为了比较这些菌种对餐厨垃圾的降解效果，分别配制含有餐厨垃圾主要成分（淀粉、蛋白质、脂肪和纤维素）的培养基，分别用于测定各菌种对其主要成分的降解效果，并进行测定。图表示其中4种菌种（X1-X4）在淀粉培养基上的培养结果，表3为这四种菌的测定结果。

四种菌种对餐厨垃圾各成分的降解系数

菌种 编号	淀粉 （D/D0）	蛋白质 （D/D0）	脂肪 （D/D0）	纤维素 （D/D0）
X1	2.26±0.20	2.26±0.08	1.06±0.05	1.17±0.05
X2	1.90±0.08	1.90±0.08	1.10±0.09	1.05±0.11
X3	1.78±0.05	1.78±0.19	1.20±0.11	3.13±0.26
X4	2.09±0.07	2.09±0.08	2.10±0.02	2.39±0.14

备注：降解系数（D/D0）越大，降解效果越明显。
4. 写出图所示的测定菌种对淀粉降解效果的实验原理：_______________。
5. 根据表中数据判断，降解餐厨垃圾能力最强的菌种是______________。

【推荐3】2019年起，全国地级及以上城市全面启动生活垃圾分类工作，习近平总书记强调，实行垃圾分类，关系广大人民群众生活环境，关系节约使用资源，也是社会文明水平的一个重要体现。有机垃圾微生物处理的基本原理是利用微生物降解菌产生多种酶，对分类后的有机垃圾进行快速分解。技术流程如下：

(1)样品采集；样品取自某食堂的餐厨垃圾，原因是厨余垃圾中富含各类有机物_____________。
(2)分离纯化：上述流程中利用_____________________（方法）进行菌株的分离纯化，接种后进行培养时，需将培养皿呈__________状态放置。
(3)鉴别培养：对餐厨垃圾组分进行分析发现，其中纤维素类含量较高。若对菌株的纤维素降解活性进行鉴别，需将分离纯化得到的各菌种，接种于加入____________的培养基中，通过比较菌落的________________来判断降解活性的高低。
(4)现将各类有机物降解活性较高的3个菌株分别制成菌剂，测定其对餐厨垃圾实际降解能力，实验思路如下：
①配制培养基：将纤维素、淀粉、脂肪、蛋白质和水，按照餐厨垃圾的组分比例配制。
②将等量的3种菌剂，分别与等量的培养基在适宜的环境中进行混合培养。
③培养相同时间，测定_________________。
(5)筛选出高效降解纤维素的菌株后，若需要长期保存，可采用______________的方法。