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解题方法
1 . 关于单克隆抗体制备的叙述中,错误的是( )
A.正常小鼠注射特定抗原后能产生特定类型的B淋巴细胞 |
B.可用聚乙二醇或灭活的病毒诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合 |
C.诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合后的细胞即为杂交瘤细胞 |
D.杂交瘤细胞的优点是既能迅速大量增殖又能产生特定抗体 |
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2 . 下列关于动物细胞融合与植物体细胞杂交的叙述错误的是( )
A.均体现出细胞膜具有流动性 |
B.融合前均需要用酶解法处理 |
C.所用到的技术手段完全相同 |
D.诱导融合的方法不完全相同 |
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3 . 学习以下材料,回答(1)~(4)题。
不断发展的单克隆抗体技术
1975年,生物学家创造了以杂交瘤细胞方式制备单克隆抗体的技术。自1986年全球首个鼠源单抗药物上市以来,单抗药物治疗方向不断发展,覆盖肿瘤、心血管疾病、自身免疫病、神经性疾病和抗感染等各个领域。
最早期的单克隆抗体均为鼠源单抗,在理论研究及实践应用中发挥了重要作用。然而,鼠源单抗作为异源蛋白,在人体内活性低,稳定性差;且容易让人产生免疫反应
——人抗鼠抗体反应(HAMA)而被清除。第二代人鼠嵌合单抗,是从杂交瘤细胞分离出鼠源抗体可变区基因,与人源抗体恒定区基因连接,插入适当表达载体,转染宿主细胞表达产生的。如图,人源基因序列占整个抗体的大部分,降低了单抗的HAMA 反应。最新一代单抗是全人源单克隆抗体,氨基酸序列均由人源基因编码,进入人体内后发生超敏或排斥反应的可能性最低。目前制备全人源单克隆抗体的技术包括转基因鼠技术、抗体库技术以及单个B细胞技术等。
转基因鼠技术是将优化的人源抗体合成基因,导入到本身不能合成抗体的免疫缺陷鼠的基因组中,在对转基因鼠进行特定抗原免疫后,后续流程与传统单抗制备方法一致,产生的抗体均由插入的人源抗体基因序列编码,也保证了单抗的抗原特异性和结合亲和力。
噬菌体展示技术是抗体库技术中的一种,将所选抗体库中抗体的可变区基因,与噬菌体壳蛋白基因构成融合基因,随着子代噬菌体重组而显示在噬菌体表面,从而筛选出抗体库中与特定抗原结合亲和力高的抗体基因。
单个B细胞技术可从患者或接种疫苗人群的外周血中,根据抗原和细胞表面标记物筛选出单个B 细胞,再利用逆转录 PCR 等技术直接获得抗体合成基因。单个B细胞技术的优点是只需少量细胞就可以快速高效地筛选出潜在的单克隆抗体,在新发、突发传染病等紧急事件中,可以快速获得针对病原微生物的高亲和力抗体。(1)上述技术中,除噬菌体展示技术外,大多需要在________ 箱中进行动物细胞培养。当培养瓶中贴壁生长的细胞出现________ 现象时,用________ 酶处理后进行传代培养。
(2)传统方法通过杂交瘤细胞制备单抗时,需向小鼠注射________ ,再从小鼠脾脏中取已免疫的B细胞,与骨髓瘤细胞混合后,加入化学试剂________ 诱导细胞融合。对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和________ ,多次筛选后才能获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(3)文中提到的新技术中,不需要利用动物细胞融合技术的有________ ;需要使用基因工程技术的有________ 。
A. 人鼠嵌合单抗技术
B. 转基因鼠技术
C. 噬菌体展示技术
D. 单个B细胞技术
(4)下面是利用单个B细胞技术,针对某新型病原体表面的抗原X,制备单克隆抗体的技术路径,请结合材料补充“________”上的内容。
采集康复者外周血→筛选能够结合X的B细胞→提取________ →________ →根据抗体基因通用序列设计引物进行PCR→获得________ 基因→________ →导入受体细胞→获得抗X的单克隆抗体。
不断发展的单克隆抗体技术
1975年,生物学家创造了以杂交瘤细胞方式制备单克隆抗体的技术。自1986年全球首个鼠源单抗药物上市以来,单抗药物治疗方向不断发展,覆盖肿瘤、心血管疾病、自身免疫病、神经性疾病和抗感染等各个领域。
最早期的单克隆抗体均为鼠源单抗,在理论研究及实践应用中发挥了重要作用。然而,鼠源单抗作为异源蛋白,在人体内活性低,稳定性差;且容易让人产生免疫反应
——人抗鼠抗体反应(HAMA)而被清除。第二代人鼠嵌合单抗,是从杂交瘤细胞分离出鼠源抗体可变区基因,与人源抗体恒定区基因连接,插入适当表达载体,转染宿主细胞表达产生的。如图,人源基因序列占整个抗体的大部分,降低了单抗的HAMA 反应。最新一代单抗是全人源单克隆抗体,氨基酸序列均由人源基因编码,进入人体内后发生超敏或排斥反应的可能性最低。目前制备全人源单克隆抗体的技术包括转基因鼠技术、抗体库技术以及单个B细胞技术等。
转基因鼠技术是将优化的人源抗体合成基因,导入到本身不能合成抗体的免疫缺陷鼠的基因组中,在对转基因鼠进行特定抗原免疫后,后续流程与传统单抗制备方法一致,产生的抗体均由插入的人源抗体基因序列编码,也保证了单抗的抗原特异性和结合亲和力。
噬菌体展示技术是抗体库技术中的一种,将所选抗体库中抗体的可变区基因,与噬菌体壳蛋白基因构成融合基因,随着子代噬菌体重组而显示在噬菌体表面,从而筛选出抗体库中与特定抗原结合亲和力高的抗体基因。
单个B细胞技术可从患者或接种疫苗人群的外周血中,根据抗原和细胞表面标记物筛选出单个B 细胞,再利用逆转录 PCR 等技术直接获得抗体合成基因。单个B细胞技术的优点是只需少量细胞就可以快速高效地筛选出潜在的单克隆抗体,在新发、突发传染病等紧急事件中,可以快速获得针对病原微生物的高亲和力抗体。(1)上述技术中,除噬菌体展示技术外,大多需要在
(2)传统方法通过杂交瘤细胞制备单抗时,需向小鼠注射
(3)文中提到的新技术中,不需要利用动物细胞融合技术的有
A. 人鼠嵌合单抗技术
B. 转基因鼠技术
C. 噬菌体展示技术
D. 单个B细胞技术
(4)下面是利用单个B细胞技术,针对某新型病原体表面的抗原X,制备单克隆抗体的技术路径,请结合材料补充“________”上的内容。
采集康复者外周血→筛选能够结合X的B细胞→提取
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4 . 抗体—药物偶联物目前已成为肿瘤治疗最有效的手段之一,其基本原理是将特定的药物与单克隆抗体结合在一起,可特异性地杀死患者体内的癌细胞,基本过程如图所示。回答下列问题:___ (填“相同”或“不同”)特定抗原,注射后小鼠体内发生相应的___ (填“细胞”或“体液”)免疫反应,生成能产生抗体的细胞。
(2)与诱导植物体细胞杂交过程不同的是,过程②可以采用___ (填具体方法)诱导动物细胞融合。
(3)过程③用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选,所得细胞丙的特点是___ 。过程④对细胞丙进行___ 培养和___ 检测,最终得到细胞丁,其中检测时所采用的操作技术的原理是___ 。
(4)与传统方法生成的抗体相比,单克隆抗体最主要的优点有___ (答出2点)。
(1)在获得细胞甲之前,小鼠已被多次注射
(2)与诱导植物体细胞杂交过程不同的是,过程②可以采用
(3)过程③用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选,所得细胞丙的特点是
(4)与传统方法生成的抗体相比,单克隆抗体最主要的优点有
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5 . 犬细小病毒(CPV)主要感染幼犬,传染性极强,被感染个体死亡率也高。利用小鼠制备CPV单克隆抗体的基本流程如图所示。下列叙述正确的是( )
A.用单克隆抗体与药物结合研制的抗体—药物偶联物中,抗体起治疗作用 |
B.注射CPV后,从小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞均可以产生CPV抗体 |
C.过程②可以利用一定方法诱导细胞融合,得到的一定是杂交瘤细胞 |
D.体外培养能产生CPV抗体的杂交瘤细胞,可获取大量CPV单克隆抗体 |
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6 . 动物细胞融合属于动物细胞工程的技术手段之一,下列有关动物细胞融合的叙述,错误的是( )
A.动物细胞融合也称细胞杂交,可由两个或多个动物细胞结合成一个细胞 |
B.融合后形成的细胞为单核或多核细胞 |
C.动物细胞融合产生的细胞称为重组细胞 |
D.常用的诱导融合的生物诱导剂是聚乙二醇、灭活的病毒等 |
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7 . 下列关于动物细胞工程的叙述,正确的是( )
A.用胰蛋白酶处理动物组织后,可用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液 |
B.少数细胞在连续培养50代后可获得不死性,是某些基因选择性表达的结果 |
C.根据在高倍镜下观察到基因突变的比例可推知某化学药品的毒性 |
D.聚乙二醇诱导动物细胞融合形成的杂种细胞,经动物细胞培养能得到优良动物个体 |
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8 . 人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒,可诱发细胞癌变。HPV单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生。HPV单克隆抗体的制备过程如图所示。下列相关分析错误的是( )
A.给小鼠多次注射HPV抗原以获得能产生HPV抗体的B淋巴细胞 |
B.HAT培养基的主要作用是使杂交瘤细胞大量增殖以产生足量抗体 |
C.步骤①需要克隆化培养和抗体检测来获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞 |
D.用HPV单克隆抗体检测HPV利用了抗原和抗体特异性结合的原理 |
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9 . 支原体肺炎是由肺炎支原体引起的急性肺部感染性疾病,是我国5岁及以上儿童最主要的社区获得性肺炎。单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异,抗人肺炎支原体单克隆抗体的制备流程如图所示,其中①~④表示相关过程。下列相关叙述正确的是( )
A.通过干扰病原体细胞壁形成而杀灭病原体的抗生素可有效治疗支原体肺炎 |
B.过程①中小鼠体内产生的相应抗体与注射的抗原结合,可能会形成沉淀 |
C.过程④中应选择抗体检测为阴性的杂交瘤细胞进行体内或体外大规模培养 |
D.研制抗人肺炎支原体单克隆抗体对支原体肺炎的早期快速诊断有重要意义 |
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2024-05-07更新
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64次组卷
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2卷引用:河北省保定市六校联考2023—2024学年高二下学期期中考试生物试题
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10 . 新冠病毒主要通过表面的S蛋白与人体细胞表面的受体(ACE2)结合来侵入细胞。人体感染病毒后会产生针对S蛋白的特异性抗体,可以用抗体试剂盒进行检测。抗体试剂盒的研制需要用到单克隆抗体技术,流程如下:(1)从免疫过的小鼠______ 中获取______ 细胞和骨髓瘤细胞融合,诱导动物细胞融合常用的具体方法是______ (至少写两种)。图中旋转培养骨髓瘤细胞的原理是_______ ,图中在HAT培养液中筛选出的杂交瘤细胞具有______ 的特点。
(2)要测试多孔培养板的板孔中是否是所需的特异性抗体,需吸取______ (填“上清液”或“沉淀细胞”)。图中用到的测试液体中应选用的蛋白质是______ 。
(3)阳性克隆的杂交瘤细胞可以在小鼠体内或体外进一步扩大培养,生产出的单克隆抗体的优点是______ ,(至少答2点),可以被用来制作“生物导弹”,体外培养需要放置在CO2培养箱中,体外培养到一定时期的杂交瘤细胞会因为______ 而导致分裂受阻,需进行传代培养。体内培养的优点是______ 。
(4)常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知新冠病毒的特异性蛋白S(具有抗原性)的编码序列(目的基因)。为了制备蛋白疫苗,可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程的核心步骤是______ 。
(2)要测试多孔培养板的板孔中是否是所需的特异性抗体,需吸取
(3)阳性克隆的杂交瘤细胞可以在小鼠体内或体外进一步扩大培养,生产出的单克隆抗体的优点是
(4)常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知新冠病毒的特异性蛋白S(具有抗原性)的编码序列(目的基因)。为了制备蛋白疫苗,可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程的核心步骤是
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