1 . 某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N蛋白胞外段，制备相应的单克隆抗体，增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。N蛋白胞外段抗原制备流程如图1，分析回答下列问题：

(1)用脂质体（如图2）将重组慢病毒质粒导入病毒包装细胞，质粒被包在脂质体_____（填“a”或“b”）处。
(2)质粒在包装细胞内组装出由_____组成的慢病毒，用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化N蛋白胞外段。
(3)N蛋白胞外段单克隆抗体制备流程如图3，分析回答下列问题：

用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用_____酶处理，制成细胞悬液，置于含有混合气体的_____中培养，离心收集小鼠的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，利用了细胞膜_____的结构特点。
(4)用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行克隆化培养。用_____技术检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，将其进行扩大培养，扩大培养的方法有_____，经扩大培养后，提取单克隆抗体。
(5)利用此方法获得的单克隆抗体的优点是_____。

2 . 2023年2月，用于治疗HER2（人表皮生长因子受体2，该蛋白增多可促进乳腺癌细胞的生长和扩散）阳性晚期乳腺癌的抗体偶联药物—“优赫德”获国家药监局批准上市。“优赫德”通常由抗HER2单克隆抗体、接头和化疗药物构成。下列有关的叙述正确的是（       ）

A．可通过体外培养单个B淋巴细胞来获得抗HER2单克隆抗体

B．“优赫德”通过抗HER2单克隆抗体与细胞膜上的受体特异性结合，以主动运输的方式进入肿瘤细胞

C．抗HER2单克隆抗体能将连接的化疗药物输送到乳腺癌细胞中

D．给小鼠多次注射HER2，从其血清中分离出来的抗体为单克隆抗体

3 . 女性怀孕后会合成并分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG），并且该激素会出现在尿液中。HCG是一种蛋白质，包括α亚基和β亚基。用抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以诊断是否怀孕。如图表示早早孕诊断试剂盒内部试纸条的构造，其中抗体1是以HCG的β亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体2是以HCG的α亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体3是针对抗体1的抗体，抗体2和抗体3分别固定在试纸条的检测 线（T线）和质控线（C线），抗体1进行了胶体金标记，该标记物可以在T线或C线处显色。回答下列问题：

   

(1)女性在妊娠第8天左右，尽管体内HCG含量很低，但仍可用抗人绒毛膜促性腺激素单抗制成的“早早孕诊断试剂盒”作出诊断，体现出单克隆抗体具有_____________的优点。
(2)图1中单克隆抗体2制备的过程中，需要反复向小鼠注射______作为抗原，然后从小鼠的脾脏中获取已免疫的B淋巴细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合。经选择培养后获得的杂交瘤细胞的特点是_______。为了得到能够分泌所需抗体的杂交瘤细胞，需要进行克隆化培养和抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行，先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是___________。最后将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或________________，从而获取大量的单克隆抗体。
(3)图2表示三位女士的检测结果，其中表示没有怀孕的是______，检测结果无效的是______。出现甲结果的原理是________________________________________。

4 . 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC）。请回答下列问题：
(1)本研究中制备单克隆抗体时，应选用__________作为抗原注射小鼠。
(2)单克隆抗体制备过程中第一次筛选获得的杂交瘤细胞具有的特点是___________________。
(3)已知正常细胞内DNA合成包括全合成及补救合成两条途径，物质A能阻断DNA的全合成途径；全合成途径被阻断后，正常细胞可以利用环境中获取的物质H和物质T经激酶或转化酶的催化合成DNA，即启动补救合成途径。骨髓瘤细胞缺少补救合成途径所需的激酶或转化酶，故只有全合成途径。具体筛选原理如下图（不能增殖的细胞在体外培养时很快死亡，筛选时不用特别考虑）：
为筛选得到杂交瘤细胞，选择培养基必须含有下图中的_____物质，试分析其筛选原理：_______________。

       

(4)由单克隆抗体研制成的抗体—药物偶联物（ADC），其中一部分被称为“瞄准装置”，它作用的原理是_________________。
(5)单克隆抗体除可以运载药物外，还有___________________（答出1点）等作用。

5 . CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，与特定分子结合后，能抑制T细胞激活或使T细胞凋亡，从而使机体肿瘤细胞免受T细胞攻击。抗CTLA-4或抗PD-1单克隆抗体具有较好的抗肿瘤效果。科研人员通过动物细胞融合技术将两种不同的杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞能够悬浮在液体培养基中生长繁殖，其产生的抗CTLA-4和抗PD-1的双克隆抗体显示具有更好的疗效，如图所示。下列叙述不正确的是（       ）

A．双杂交瘤细胞无需识别CTLA-4和PD-1抗原，就能产生双特异性抗体

B．双克隆抗体与肿瘤细胞的结合具有更强的特异性，从而减少副作用

C．筛选图中双抗时需要使用CTLA-4和PD-1两种抗原

D．使用双克隆抗体治疗肿瘤的原理是让机体产生更强的细胞免疫反应

6 . 单克隆抗体相对于传统的注射相应抗原后从动物血清中分离的抗体，不仅产量高、纯度高，而且特异性强，已经广泛应用于科学研究、临床诊断和疾病的治疗等。下列有关单克隆抗体的说法，正确的是（　　）

A．单克隆抗体是将单一的某种B细胞克隆扩增，培养后获得的抗体

B．单克隆抗体的制备过程中要进行两次筛选，而且筛选的原理相同

C．动物细胞融合、体细胞核移植技术是单克隆抗体制备技术的基础

D．单克隆抗体不仅自身能治疗疾病，还可以运载药物以及诊断疾病

7 . HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题：

(1)在制备抗HER2-ADC的过程中，需要用________对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。过程②筛选出的细胞为________，经过程②筛选的细胞还需进行过程③_______________，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。
(2)过程④是将细胞毒素类药物与能特异性识别HER2抗原的单克隆抗体结合，与传统化疗药物相比，其优点是_______________。
(3)为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的胃癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。

①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200mm³时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射________，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。
②实验结果表明__________。
③后续可通过研究抗HER2-ADC________________________（答出1点即可）等情况，为抗HER2-ADC进入临床实验奠定数据基础。

8 . CD47是一种跨膜糖蛋白，可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6~5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，下列叙述错误的是（       ）

A．对照组应设置为：巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体

B．需将脾脏中产生抗CD47抗体的B细胞筛选出来进行细胞融合

C．CD47与巨噬细胞结合后会抑制后者的抗原处理、呈递功能

D．若实验组的吞噬指数高于对照组，则单克隆抗体有解除CD47对巨噬细胞的抑制作用

9 . 细胞工程在药物生产和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答有关问题：
材料一：人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图。

材料二：西湖龙井含有的茶碱是植物细胞的代谢产物，具有提神、抗衰老功效，可利用植物组织培养技术来实现茶碱的工业化生产。
(1)从经过免疫处理的小鼠体内分离的B淋巴细胞群能合成并分泌____________（填“一种”或“多种”）抗体。诱导小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合时，采用的化学诱导试剂是____________。经特定的选择培养基培养筛选得到杂交瘤细胞，该细胞具有____________的特点，再进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，才能获得足够数量的能分泌____________的杂交瘤细胞。该过程一般在多孔细胞培养板上进行：先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0．1mL细胞稀释液，其目的是____________。
(2)单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂，如科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，制作出了早孕试纸，该试纸可以利用尿液诊断早孕的理由是________________________。鼠源性单克隆抗体可应用于肿瘤的临床免疫治疗，在注射前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低____________。
(3)若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到____________阶段，然后从____________（填细胞器）中提取茶碱；经植物组织培养培育成植株的方式属于____________（填“有性生殖”或“无性生殖”）。

10 . 下图为某生物工程操作流程模式图，①、②为相应过程。下列叙述正确的是（       ）   

A．若此图表示转基因抗虫棉的培育，则①为该技术的核心工作

B．若此图表示单克隆抗体的制备，则②过程用选择培养基筛选

C．若此图表示试管牛的培育，则①过程发生的场所是输卵管

D．若此图表示植物体细胞杂交，则②过程可用PEG诱导细胞壁再生