1 . 新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的核酸检测采用逆转录PCR技术。将待测样本处理后，先将样本RNA逆转录成cDNA，再以cDNA为模板进行扩增。请回答下列问题：
（1）样本RNA逆转录成cDNA的原料是________________。
（2）逆转录PCR反应中使用的DNA聚合酶是从水生栖热菌Thermus Aquaticus（ Taq）中分离提取的，与普通DNA聚合酶相比，该酶的特点是__________________。
（3） PCR-般要经历三十多次循环，每次循环可以分为_____________、_______________和延伸三步。在循环之前，常要进行一次______________，以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。
（4）下表是用于新冠病毒的cDNA扩增的两种引物序列，请据表回答相关问题：

引物名称	引物序列（5＇—3＇）
引物1	TTCGATGTT	GAGGGTG	CTCAT
引物2	TCACACCAGTTGAAAATCCTAATTG

①引物1方框内对应的模板链序列为_______________。
②下图为cDNA的部分序列，请问引物1和引物2分别对应的位置是_____________。

2 . (5分)2019新型冠状病毒，即“COVID19”（图1），为有包膜病毒。颗粒呈圆形或椭圆形，直径50～200 nm。颗粒表面有棒状突起，使病毒表面看起来形如花冠，故而得名。COVID19基因组长度为29．8 kb，为单股正链RNA，其5′端为甲基化帽子，3′端有多聚腺苷酸(Po1yA)结构，可直接作为翻译模板。

(1)下列说法错误的是________(填字母)。
A．细胞膜能控制物质进出，故该病毒只能侵染受损细胞，使人患病
B．由于没有核糖体，这种病毒无法合成蛋白质，其包膜组成一定不含蛋白质
C．病毒的遗传物质水解后可产生一分子核苷、一分子含氮碱基与一分子磷酸
D．此病毒的单股正链RNA，只有转录形成对应的负链RNA才能附着在细胞的核糖体上
(2)研究人员紧急研发了核酸检测试剂盒，以此来检测病毒，检测此病毒的核酸可使用________法。
(3)病毒入侵人体后，引起相关细胞分泌抗体，该抗体并不会与其他病症的抗原结合，这体现了__________________，此原理也可应用于该病的检测。
(4)将COVID19不稳定的RNA转换成DNA后，技术人员常采用荧光定量PCR技术定量检测样本中病毒的核酸含量。其原理如图（图2），在PCR反应体系中每加入一对引物的同时，加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当________________催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。反应最终的荧光强度除与PCR的循环数相关还与起始状态________含量呈正相关。

3 . 2019新型冠状病毒，即“COVID19”，为有包膜病毒。颗粒呈圆形或椭圆形，直径50～200 nm。颗粒表面有棒状突起，使病毒表面看起来形如花冠，故而得名。COVID19基因组长度为29．8 kb，为单股正链RNA，其5′端为甲基化帽子，3′端有多聚腺苷酸(Po1yA)结构，可直接作为翻译模板。

（1）下列说法错误的是________(填字母)。
A． 细胞膜能控制物质进出，故该病毒只能侵染受损细胞，使人患病
B． 由于没有核糖体，这种病毒无法合成蛋白质，其包膜组成一定不含蛋白质
C． 病毒的遗传物质水解后可产生一分子核苷、一分子含氮碱基与一分子磷酸
D． 此病毒的单股正链RNA，只有转录形成对应的负链RNA才能附着在细胞的核糖体上
（2）这种病毒的遗传物质为________，研究人员紧急研发了核酸检测试剂盒，以此来检测病毒，检测此病毒的核酸可使用________法。研究人员发现，病毒的中间宿主为蝙蝠，某些情况下，病毒可在不同动物身体内翻译出基本相同的多肽链，这是因为________。
（3）病毒入侵人体后，引起相关细胞分泌抗体，该抗体并不会与其他病症的抗原结合，这体现了__________________，此原理也可应用于该病的检测。若要用细胞工程的方法生产针对COVID19上抗原的单克隆抗体，用到的技术有____________和____________。

（4）将COVID19不稳定的RNA转换成DNA后，技术人员常采用荧光定量PCR技术定量检测样本中病毒的核酸含量。其原理如图，在PCR反应体系中每加入一对引物的同时，加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当________催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。反应最终的荧光强度与PCR起始状态________含量呈正相关。

4 . 根据下列甲乙丙三个图回答相关问题。


I．甲图是新型冠状病毒模式图，为有包膜病毒。颗粒呈圆形或椭圆形，直径50～200 nm。颗粒表面有棒状突起，使病毒表面看起来形如花冠，故而得名。
（1）截至目前，世界卫生组织（WIIO） 对新型冠状病毒的命名是______（填字母）?
A. SARS-CoV          B. MERS-CoV          C.2019-nCoV          D. SARI
（2）下列有关说法下列说法错误的是_______。
A．细胞膜能控制物质进出，故该病毒只能侵染受损细胞，使人患病
B．由于没有核糖体，这种病毒无法合成蛋白质，其包膜组成一定不含蛋白质
C．该病毒的遗传物质彻底水解后可产生磷酸、核糖和四种含氮碱基
D．此病毒的单股正链RNA，只有转录形成对应的负链RNA才能附着在细胞的核糖体上
（3）研究人员发现，病毒的中间宿主为蝙蝠，某些情况下，病毒可在不同动物身体内翻译出基本相同的多肽链，这是因为_______。
II．乙图是表示人体内某种免疫失调病的致病机理，回答有关的问题。
（4）b细胞是_______，抗红细胞抗体与红细胞膜上的_______特异性结合形成细胞集团或沉淀。
（5）图示免疫病属于_______病。
III．观察丙图所示的实验
（6）正常情况下LCM病毒进入小鼠体内，激发小鼠产生_______免疫。
（7）经检测上清液中⁵¹Cr释放量较高，可说明_______细胞的作用。

5 . 新型冠状病毒肺炎是由一种新型冠状病毒（2019－nCoV，简称新冠病毒）引起的。根据相关材料回答下列问题：

材料一：由于疫情发展迅速，新冠病毒核酸检测可以快速有效的对病人及疑似患者的诊断提供直接证据。新冠病毒核酸检测采用荧光定量PCR仪，通过检测荧光信号的累积（以Ct值表示）来确定样本中是否有病毒核酸。新冠病毒的遗传物质为RNA，科学家先将病毒RNA逆转录，再将得到的cDNA进行扩增得到了大量DNA片段。
（1）过程①中，需要使用_______________酶。
（2）过程③中，需要设计________种引物，且设计时要避免引物之间__________，而造成引物自连。
（3）采集新冠肺炎疑似患者的咽部细胞样本提取核酸进行上述过程，若经逆转录获得了1 个cDNA，则在过程③中经 10次循环后，得到的DNA数量为________个。每一个扩增出来的DNA序列，都可与预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的靶基因越多，观察到的Ct值就越________。
材料二：应对不断蔓延的新冠肺炎，目前最好的方式仍然是接种疫苗。新冠病毒表面布满像皇冠一样的棘突蛋白（由S基因控制合成）。针对新冠病毒的疫苗可以通过模仿这些棘突蛋白，从而触发人体免疫系统的响应。下图表示疫苗的制作原理。

（4）如果利用基因工程研制新冠病毒疫苗，应选择________作为目的基因，以便用于后续操作。过程②表示构建____________，其组成除了目的基因外，还必须有__________。过程③需要用______处理细胞。

6 . 新冠肺炎（COVID-2019）是一种严重呼吸系统症状的高传染性疾病，为探究如何更好的防治该病，科研人员进行了系列研究。
（一）经研究，该病毒是一种单股正链RNA病毒，在宿主细胞内的增殖过程如图1所示。下列说法中不正确的是_____________。

A．由图示可知，+RNA和-RNA上都含有决定氨基酸的密码子
B．过程②消耗的嘧啶核苷酸数等于过程④消耗的嘌呤核苷酸数
C．可利用抗生素类药物抑制新型冠状病毒在宿主细胞内的增殖
D．新型冠状病毒和HIV的增殖过程都需要RNA复制酶的作用
（二）医学上采用实时荧光定量PCR-TaqMan探针法进行核酸检测，对疫情防控起了至关重要的作用。下图2为该方法原理示意图，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时该探针被Taq 酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增1个DNA分子，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。下图3为针对新型冠状病毒的核衣壳蛋白基因区域设计的引物和探针。请回答下列问题：

（1）医务人员利用鼻咽拭子法从鼻咽部组织采集样本获取RNA，再通过________________法合成cDNA。
（2）用TaqMan荧光探针技术检测新冠病毒时，在反应体系中要加入相应的病毒遗传物质、引物、探针和____________、Taq酶等，其中Taq 酶发挥的作用是____________、____________。
（3）根据TaqMan探针功能分析，图3探针中碱基序列的设计应主要依据核衣壳蛋白基因____________，同时要避免与_________________发生碱基互补配对。
（4）若每分子探针水解释放的R基团荧光强度为a，cDNA的初始数量为b个，请根据图示过程，试用数学公式表示反应体系中荧光信号强度（Rn）与扩增次数（n）之间的关系：______________________。

7 . 2019年末爆发的传染性肺炎由冠状病毒引起，冠状病毒是一种具有囊膜（由蛋白质、多糖和脂质构成的类脂双层膜，脂质和膜蛋白主要来自宿主细胞膜）的病毒，由于棘突蛋白像王冠上的突起，所以称为冠状病毒即“COVID19”，COVID19基因组长度为29．8 kb，为单股正链RNA，其5'端为甲基化帽子，3'端有多聚腺苷酸（PolyA）结构，可直接作为翻译模板。请回答下列问题：

（1）该病毒遗传物质的基本单位为____，研究人员紧急研发了核酸检测试剂盒，以此来检测病毒，检测此病毒的核酸可使用____法。研究人员发现，病毒的中间宿主为蝙蝠，某些情况下，病毒可在不同动物身体内翻译出基本相同的多肽链，这是因为______。
（2）病毒入侵人体后，病毒囊膜中的______可作为抗原引起相关细胞分泌抗体，该抗体并不会与其他病症的抗原结合，这体现了____，此原理也可应用于该病的检测。若要用细胞工程的方法生产针对COVID19上抗原的单克隆抗体，用到的技术有____和____。
（3）下列选项正确的是____。
A．新型冠状病毒为RNA病毒，存在逆转录过程
B．细胞膜能控制物质进出，故该病毒只能侵染受损细胞，使人患病
C．病毒遗传物质彻底水解后可产生核糖、含氮碱基和磷酸
D．此病毒的单股正链RNA只有转录形成对应的负链RNA，才能附着在细胞的核糖体上
（4）技术人员常采用荧光定量PCR技术定量检测样本中病毒的核酸含量。其原理：在PCR反应体系中每加入一对引物的同时，加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当____催化子链延伸至探针处时，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。

8 . 面对2019新型冠状病毒在全球的肆虐，包括我国在内的各国都在想方设法积极应对。下图为科研人员研发冠状病毒疫苗的几种技术思路。
     
（1）途径Ⅰ和Ⅱ都需要通过动物细胞培养获得足够数量的病毒株。在动物细胞培养中，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是____________与5%二氧化碳的混合气体，二氧化碳的主要作用是____________。途径Ⅰ与途径Ⅱ相比，生产的疫苗安全性更高的是途径____________。
（2）途径Ⅲ中，过程①的操作需要____________酶。途径Ⅲ中所示技术的核心是________（用图中数字作答）。
（3）途径Ⅳ生产的DNA疫苗在动物细胞中表达引起机体免疫应答。与DNA疫苗相比，mRNA疫苗的安全性更有优势，这是因为mRNA不需要进入____________，无整合到宿主细胞染色体基因组中的风险，且易被____________水解，不会遗传给子细胞。
（4）该病毒表面蛋白A为主要抗原，由病毒的A基因控制合成，为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的____________序列，通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。

9 . 预防新冠肺炎（COVID-19）的有效措施是接种疫苗，核酸疫苗已成为疫苗研发的新领域。图是一种自扩增mRNA疫苗的设计、制备及作用机理的过程示意图，其中树突细胞是机体免疫过程中的一类吞噬细胞。请回答：

（1）自扩增mRNA合成的原料是_____，能自我扩增是因为其中含有_____。包裹自扩增mRNA的脂质体进入树突细胞的方式是___。
（2）过程④、⑥都能独立进行是因为自扩增mRNA两个编码区中都含有____，核糖体在mRNA上的移动方向是______（填“3’→5”’或“5’→3”’）。
（3）抗原肽被呈递到树突细胞膜表面后，与 ____接触并使其活化，最终引起人体产生特异性免疫，获得_____，具备对病毒的免疫力。
（4）DNA疫苗通过抗原蛋白基因在动物细胞中表达引起机体免疫应答。与DNA疫苗相比，mRNA疫苗的安全性更有优势，这是因为mRNA不需要进入___，无整合到宿主细胞染色体基因组中的风险，且易被_____水解，不会遗传给子细胞。

10 . 自2019年12月起，由新型冠状病毒SARS-CoV-2引发的新冠肺炎成为全球公共卫生的重大威胁。某些患者早期病情较轻，后期因发生细胞因子风暴病情突然加重。细胞因子是具有免疫调节功能的小分子蛋白质，细胞因子风暴是机体免疫系统被过度激活的一种状态，其造成肺损伤的机制如下图所示。

（1）免疫细胞包含多种类型，图中未提到的一类是_______。吞噬细胞在特异性免疫中的作用是________。
（2）据图可知，利用_______的受体免疫实验动物后，制备的单克隆抗体（一类特异性很强的抗体）可用于新冠肺炎细胞因子风暴的治疗。
（3）我国医疗工作者用脐带间充质干细胞静脉输入法对4例新冠肺炎重症患者进行了治疗，效果良好。干细胞的特点是增殖（分裂）能力强和分化程度低，脐带间充质干细胞除有干细胞特点外，还可以分泌多种营养因子和调节物质，其表面抗原不明显，不会引起患者免疫排斥。由此分析，在治疗过程中间充质干细胞发挥的作用可能是 ___________   。（写出1点即可）
（4）在“疫情防控常态化”阶段，新冠疫苗研制更加重要，我国科学工作者研发的重组腺病毒疫苗已进入临床实验阶段。
①腺病毒疫苗中腺病毒是作为 _____________。
②腺病毒对于增殖和非增殖细胞均具有感染能力，且不整合进入宿主细胞的染色体基因组，与其他重组逆转录病毒疫苗相比可减少多种临床风险，__________。（请列出其中1点）
③新冠疫苗可能存在的局限性是 _________。（写出1点即可）