7 . 经由食物摄取过量生物胺会引起头痛、胃肠道不适和过敏等不良反应，严重时甚至危及生命，因此必须对食品中生物胺的含量进行减控。微生物来源的多铜氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程规模化生产重组MCO在食品工业中具有广泛用途。我国科研人员采用PCR技术获得发酵乳杆菌的MCO基因，然后转入大肠杆菌中实现了高效表达。
(1)通过上述基因工程技术获取目标产物，涉及如下步骤，则合理的操作步骤排序是_________。（填写下列编号）
① 筛选和鉴定含目的基因的受体细胞   ② 选用合适的方法获取目的基因   ③ 借助发酵工程规模化生产目标蛋白     ④ 目的基因导入受体细胞     
⑤ 目的基因和运载体重组构建表达载体
(2)在PCR过程中，引物的功能是             。

A．启动DNA复制	B．规定扩增区间
C．解旋DNA双链	D．充当复制模板

(3)为获得目的基因MCO（下图灰色表示的序列），正确设计的PCR引物应为       。

(4)获取目的基因后，需要和载体重组导入受体细胞。载体的化学本质是_____________。（填DNA或RNA/DNA或RNA）
(5)在常规PCR的每一轮扩增反应中，温度随时间的变化顺序是             。

A．

B．

C．

D．

(6)若目的基因MCO经限制酶切开后呈图10（左上）所示的末端，那么载体质粒pCLY15图10（左下）需用_____________和_____________切开，才能与MCO片段高效连接。

(7)下列实验操作中，能有效鉴别载体质粒pCLY15空载还是“满载”的是         。

A．从抗药性克隆中提取质粒DNA，用合适的限制酶切割

B．在选择培养基中添加X-gal试剂，以克隆的颜色进行鉴别

C．从抗药性克隆中提取质粒DNA，以此为模板进行PCR检测

D．将Ap抗性克隆转移至含Tc（四环素）的平板上，根据大肠杆菌生长与否加以鉴别

8 . 某亲本DNA分子双链均以白色表示，以灰色表示第一次复制出的DNA子链，以黑色表示第二次复制出的DNA子链，该亲本双链DNA分子连续复制两次后的产物是

A．	B．
C．	D．