1 . 绵羊虽是第一种体细胞克隆成功的哺乳动物，但该技术体系仍然存在效率低下的问题，体外培养体系对绵羊体外胚胎发育至关重要。已有研究表明，在胚胎培养液中添加维生素C可显著提高猪体细胞克隆胚胎囊胚率，但不知对绵羊克隆胚胎囊胚率是否有影响，某兽医研究所对此进行了研究。下图为实验过程中获得重组细胞的大致过程，回答下列问题：

（1）图示实验二属于___________________移植，收集的小尾寒羊卵母细胞应培养到_______________________________（时期）进行去核，去核实际操作是用微型吸管吸出_________________________。
（2）下表分别为实验一和实验二在胚胎培养液中加入维生素C后的相关实验结果：
实验一：不同浓度维生素C对绵羊孤雌胚胎发育的影响

维生素C浓度/（µmol•L-1）	重复次数	胚胎总数	卵裂率	桑椹胚率（桑椹胚数/卵裂数）	囊胚率（囊胚数/卵裂数）
0	3	120	82.80	26.47	15.73
50	3	141	82.37	28.60	20.92
100	3	99	83.89	21.70	14.34
200	3	80	85.56	22.61	12.29

实验二：维生素C对绵羊体细胞克隆胚胎发育的影响

维生素C浓度/（µmol•L-1）	重复次数	胚胎总数	卵裂率	桑椹胚率（桑椹胚数/卵裂数）	囊胚率（囊胚数/卵裂数）
x	3	70	83.93	28.89	14.96
0	3	76	87.05	22.53	9.47

①题图中“孤雌激活处理”的实质是_________________________，进而能发育成早期胚胎，以便进行实验一。
②据表中数据可知，进行实验一可以为实验二提供_________________________，实验二中“x”处数据应为_________________________。
③综合实验一和实验二结果可说明_________________________。

3 . 英国PPL制药公司通过不同的技术方法获得转基因哺乳动物，让其乳腺系统高效表达人凝血因子IX，以下为技术方法。
方法一：将相关调控组件重组在一起，通过一定的方法导入哺乳动物的受精卵中，然后将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可通过其分泌的乳汁来生产所需药品。
方法二：用已在小鼠中证明为可高效表达的人凝血因子Ⅸ转基因构件和新霉素抗性基因共转染绵羊胎儿成纤维细胞，得到整合了上述两种基因的成纤维细胞，以其作为核供体，获得转基因绵羊，通过分泌的乳汁来生产所需药品。
回答下列问题：
（1）让羊的乳腺系统通过分泌乳汁来生产所需药品，这称为__________________________。
（2）方法一需要将人凝血因子Ⅸ基因与_________的启动子等调控组件重组在一起，通过____________技术导入哺乳动物的受精卵中。
（3）方法二中新霉素抗性基因的作用是________________，要鉴定该基因转染绵羊胎儿成纤维细胞是否成功需进行的操作是___________________________。用动物的胚胎干细胞作为核供体可进一步提高生产潜能，一般胚胎干细胞的来源是_________________________。
（4）与方法一相比，方法二的优点是__________________________________。

4 . 下表表示高等动植物亲代个体产生新个体的3种不同途径，请据表分析并回答问题：

生物	途径	主要流程
动植物	甲	亲代个体→受精卵→胚→新个体
植物	乙	亲代个体→体细胞→胚状体→新个体
动物	丙	亲代个体→核移植细胞→早期胚胎→新个体

（1）甲、乙、丙途径中属于有性生殖的是________，三种途径中由胚(胚状体或早期胚胎)发育成新个体都需要经过细胞的________。
（2）相比于甲，乙丙途径在应用上的优点是____________。乙途径依据的原理是____________，动物一般采用丙而不采用乙途径繁殖新个体的原因是________。
（3）丙途径中，从早期胚胎→新个体的流程中还需要进行的生物工程技术是________。该途径获得的新个体与供核的亲代个体性状不完全相同的原因是________。
（4）若从乙、丙途径获得的新个体中各取一小块组织进行体外培养。下列叙述错误的有________(填字母)。
a． 前者需先用盐酸解离，后者需先用胰蛋白酶处理
b． 前者培养基中一般加入蔗糖，后者一般加入葡萄糖
c． 前者培养过程需要持续光照，后者可在暗处培养
d． 两者培养过程中均需要保证无菌条件防止杂菌污染

5 . 现代社会压力使人类的作息很难严格遵循于体内的生物钟。因为加班、熬夜等，人的生物钟紊乱，最终出现失眠、日间过度嗜睡等问题。2019年我国科研团队获得了5只BMALl基因(与生物节律有关)敲除的克隆猴，极大地推动了生物钟紊乱相关问题的研究。培育克隆猴的步骤如图所示，回答下列问题：

(1)哺乳动物利用胚胎细胞核移植较体细胞核移植更易成功，原因是 ___________________ 。
(2)对卵母细胞去核所采用的普遍方法是___________ ，克隆猴的性状与____________(填“A”或“B”)猴的性状相似度最高，与母体相比，克隆猴体细胞染色体数目____________(填“加倍”、“不变”或“减半”)。
(3)在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞中前，必须先去掉受体卵母细胞的细胞核，原因是___________________________。
(4)为了研究这5只BMAL1基因敲除的克隆猴是否存在昼夜节律紊乱问题，科学家进行相关实验，如表所示。

组别	实验个体
对照组	?
实验组	5只BMAL1基因敲除的克隆猴

①表中对照组的实验个体是______________________________。
②结果显示，与对照组相比，实验组猴的神经内分泌激素褪黑素分泌减少；与睡眠剥夺、抑郁症以及衰老等相关的基因表达增强；不再按照24小时的周期活动，在夜间活动明显增多，这说明了 _____________________________。

6 . 角质干燥症（干眼症）是由多种因素导致的、以眼睛干涩为主要症状的泪液分泌障碍性眼病。干燥症是一种慢性疾病，目前尚无有效的治疗方法，可通过局部治疗和全身治疗缓解病情，科学家将SOX2基因等有关基因导入已分化的患者体细胞，诱导出类似胚胎干细胞（ES细胞）的多能干细胞（iPS细胞），进而培养获得眼结膜组织，可分泌泪液成分“粘液素”，有望治疗干眼症。回答下列问题:
(1)将SOX2基因导入已分化的患者体细胞并诱导出iPS细胞的过程需要借助于多种工程技术手段首先，在患者耳垂等处取出体细胞，用___处理分散成细胞悬液，将体细胞核移入去核的___，得到重组细胞；其次利用基因工程技术获得含SOX2基因的重组细胞，该技术操作的基本步骤为：________。
(2)ES细胞是从___中分离出来的一类细胞；在形态上，其表现为______；在功能上，具有___的特点。（回答两点）
(3)目前，利用iPS技术治疗人类疾病已经在临床上取得一些成功案例。与利用ES细胞治疗人类疾病相比，iPS技术治疗人类疾病具有___等优点。（回答两点即可）

7 . 目前，人体移植器官短缺是一个世界性难题。现代生物技术为此问题的解决提供了方向。回答下列相关问题:
（1）治疗大面积烧伤的病人时，可通过动物细胞培养技术获得大量的自体健康皮肤。其基本过程为:先用胰蛋白酶处理取自病人的皮肤组织，制成____________，转到培养瓶后放入二氧化碳培养箱中培养。一段时间后，在培养瓶的底部能形成单层皮肤细胞的原因是________________________。
（2）由于人体移植器官短缺，科学家将目光集中在小型猪上寻求可替代的移植器官。这是因为除了猪的内脏构造、大小、血管分布与人极为相似外，还因为猪体内隐藏的可导致人类疾病的病毒要__________（填“多于”或“少于”）灵长类动物。科学家可将某种调节因子导入到猪的基因组中，以抑制___________基因的表达，从而培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。在此过程中应用到的技术手段有____________。
（3）通过体细胞核移植技术获得组织器官也是重要途径。大致过程如图所示:
①卵母细胞在去核前，一般在体外要培养到____________期，形成的新细胞用物理或化学方法激活，使其发育。
②图中胚胎干细胞一般由早期胚胎分离并培养而来，在形态上，表现为____________等胚胎细胞的特性。
③图中通过核移植技术获得患者新的胚胎，只是为了从胚胎中提取细胞，并不是以生殖为目的，这种技术称为____________克隆。

8 . 【生物——选修3：现代生物科技专题】在治疗人类某些疾病时，人的体细胞核移植技术得到的胚胎干细胞经诱导分化，形成相应的组织器官后，可用于组织器官的移植，操作流程如图所示。请回答：

(1)进行图中过程①时，需将体内取出的卵母细胞在体外培养至_________期，该期卵母细胞核的位置靠近_________，可用微型吸管将之与细胞核一并吸出。
(2)图中过程②表示将用物理或化学方法激活重组细胞，使其在发育培养液中完成_________，最终形成囊胚的过程。
(3)图中过程③④表示从囊胚中取出_________细胞，将其培养在_________细胞上，形成大量胚胎干细胞的过程。胚胎干胞在形态上的特性表现为_________。
(4)图中过程⑤表示在培养液中加入_________，就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化，用于患者的组织器官移植。

9 . 治疗性克隆是指把患者体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞中，构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗，请回答下列问题：
（1）ES细胞是_______的简称，在形态上，表现为体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上，具有_________。将重组胚胎培养到_______时期，从该时期的______中进行分离，从而获得ES细胞。
（2）在培养液中加入_______可诱导ES细胞定向分化成所需的各种特定类型细胞，细胞分化的本质原因是基因__________的结果。
（3）科学家将患者的体细胞核植入去核的卵细胞中，而不是直接用体细胞进行培养的原因是______________。
（4）某次科学家体外培养的ES细胞进行诱导使其定向分化为胰岛B细胞，病进行了胰岛素释放实验：控制培养液中_______的浓度，检测细胞分泌的胰岛素的量，由图为实验结果，据此分析确认ES细胞诱导成功。得到此结论的依据是_____________。

10 . α₁-抗胰蛋白缺乏症是一种在北美较为常见的单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。对于该致病患者常可采用注射人α₁-抗胰蛋白酶来缓解症状。

(1)图1表示获取人α₁-抗胰蛋白酶基因的两种方法，请回答下列问题：
①a过程是在__________酶的作用下完成的，该酶的作用特点是_______________。
②c过程称为__________，该过程需要的原料是_____________________。
③要确定获得的基因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用______________技术检测该基因的碱基序列。
(2)利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α₁-抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2。
①获得目的基因后，常利用__________技术在体外将其大量扩增。
②载体上绿色荧光蛋白（GEP）基因的作用是便于__________。基因表达载体d，除图中的标示部分外，还必须含有__________________________________。
③若要使转基因羊的后代均保持其特有的性状，理论上应选用________技术进行繁殖。