1 . 我国科学家攻克了灵长类动物体细胞核移植技术的瓶颈，获得了体细胞克隆食蟹猴中中和华华。此过程涉及了提供卵母细胞的A猴，提供成纤维细胞的B猴，以及作为代孕母亲的C猴。
(1)请利用箭头加文字的形式完善中中和华华的基本构建流程____________ 。
(2)此过程中涉及的生物工程技术有____________ （编号选填）。
①体细胞融合技术 ②动物细胞培养技术 ③核移植技术 ④胚胎移植技术⑤体外受精技术
(3)获取相关食蟹猴的核DNA，对其特定序列（同一物种不同个体间存在差异的DNA片段）进行测序，结果如表，表中数据代表等位基因的长度（单位bp）。依据上图和表中信息，在表中横线上填写相应的食蟹猴名称。
(4)食蟹猴与恒河猴同属弥猴属，C猴能否用恒河猴替代？______________________________
(5)正常胚胎发育初期会发生染色质的重塑：DNA去甲基化和染色体上组蛋白的乙酰化。重构胚中来自体细胞的染色质会抵抗这种重塑。有研究表明用去甲基化酶．（K）处理核移植得到的胚胎，可提高胚胎发育率。科研人员用K和T（去乙酰化酶抑制剂）处理重构胚后，再进行胚胎移植，检测并计算出发育成囊胚的比例（囊胚率=囊胚数/重构胚），结果如图，T+K理的结果明显高于K单独处理。下列相关推测合理的是____________。
(1)请利用箭头加文字的形式完善中中和华华的基本构建流程
(2)此过程中涉及的生物工程技术有
①体细胞融合技术 ②动物细胞培养技术 ③核移植技术 ④胚胎移植技术⑤体外受精技术
(3)获取相关食蟹猴的核DNA，对其特定序列（同一物种不同个体间存在差异的DNA片段）进行测序，结果如表，表中数据代表等位基因的长度（单位bp）。依据上图和表中信息，在表中横线上填写相应的食蟹猴名称。
食蟹猴 | 位点1 | 位点2 | 位点3 |
中中 | 250/277 | 135/148 | 200/217 |
华华 | 250/277 | 135/148 | 200/217 |
① | 250/277 | 135/148 | 200/217 |
② | 274/278 | 255/255 | 202/223 |
C猴 | 268/268 | 254/256 | 202/208 |
(4)食蟹猴与恒河猴同属弥猴属，C猴能否用恒河猴替代？
(5)正常胚胎发育初期会发生染色质的重塑：DNA去甲基化和染色体上组蛋白的乙酰化。重构胚中来自体细胞的染色质会抵抗这种重塑。有研究表明用去甲基化酶．（K）处理核移植得到的胚胎，可提高胚胎发育率。科研人员用K和T（去乙酰化酶抑制剂）处理重构胚后，再进行胚胎移植，检测并计算出发育成囊胚的比例（囊胚率=囊胚数/重构胚），结果如图，T+K理的结果明显高于K单独处理。下列相关推测合理的是____________。
| A．对照组与实验组重构胚的核DNA序列不同 |
| B．K、T分别降低了DNA甲基化与组蛋白乙酰化程度 |
| C．K、T可能通过类似方式提高重构胚的囊胚率 |
| D．K、T通过改变重构胚中DNA的碱基排序提高囊胚率 |
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2 . 根据所学知识，完成下列题目：
(1)图甲是基因工程中重组质粒的模式图，图中插入基因和抗生素抗性基因在基因工程中分别称作____ 、____ 基因。
(2)模型是人们为了某种特定目的对认识的对象所做的一种简化的概括性描述，模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法。图乙是基因工程的操作流程图，图中C和D可分别表示____ 、____ 。若图乙表示单克隆抗体制备过程，则从A、B到C的过程需要的化学试剂是____ 。
(3)有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字（括号中填文字）完善图丙表示该过程_______ 。
(4)组成内细胞群的细胞具有全能性，这些细胞就是____ 干细胞，此干细胞在形态上的特征表现为____ 。
(5)在进行植物组织培养时，由离体细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生哪些变化
(1)图甲是基因工程中重组质粒的模式图，图中插入基因和抗生素抗性基因在基因工程中分别称作
(2)模型是人们为了某种特定目的对认识的对象所做的一种简化的概括性描述，模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法。图乙是基因工程的操作流程图，图中C和D可分别表示
(3)有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字（括号中填文字）完善图丙表示该过程
(4)组成内细胞群的细胞具有全能性，这些细胞就是
(5)在进行植物组织培养时，由离体细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生哪些变化
| A．基因突变 | B．染色体数目变异 | C．染色体结构变异 | D．基因重组 |
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名校
3 . 下图1是利用两种不同生物技术将小鼠培育成大鼠的过程。图2中质粒是基因工程中常用的质粒pIJ702，其中tsr为硫链丝菌素抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶ClaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。
（1）图1中应用到的生物工程技术有______________ 。
A.核移植技术 B.转基因技术
C.胚胎移植 D.动物细胞培养
（2）若大鼠甲和大鼠乙体内X染色体上均带有某种致病基因，则培育出的大鼠丙和大鼠丁携带致病基因的是________ （不考虑基因突变）。
（3）c分子称为____________ 。构建c时，应选用限制酶和________ ，影响酶处理效果的因素可能有________
A. 反应温度 B. 缓冲液pH C. 酶的纯度 D. 氧气浓度
（4）以SacⅠ和SphⅠ同时切割大鼠生长激素基因和质粒pIJ702，获取的目的基因去置换pIJ702上0.4 kb的片段，构成质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表1中。由此判断目的基因的片段长度为__________ kb。参照表1数据，如果用PstⅠ和ClaⅠ同时酶切质粒pZHZ8，则两种酶可将pZHZ8切成__________ 个片段。
（5）质粒pZHZ8上的标记基因是____________ ，在含硫链丝菌素固体培养基上培养后，筛选过程中要淘汰________ 色的菌落。
（1）图1中应用到的生物工程技术有
A.核移植技术 B.转基因技术
C.胚胎移植 D.动物细胞培养
（2）若大鼠甲和大鼠乙体内X染色体上均带有某种致病基因，则培育出的大鼠丙和大鼠丁携带致病基因的是
（3）c分子称为
A. 反应温度 B. 缓冲液pH C. 酶的纯度 D. 氧气浓度
（4）以SacⅠ和SphⅠ同时切割大鼠生长激素基因和质粒pIJ702，获取的目的基因去置换pIJ702上0.4 kb的片段，构成质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表1中。由此判断目的基因的片段长度为
（5）质粒pZHZ8上的标记基因是
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4 . 神经纤维瘤蛋白是一种肿瘤抑制因子，表达缺陷会引起神经纤维瘤（NF），导致人体多系统损害，典型症状是患者皮肤出现牛奶咖啡斑，左图为1型神经纤维瘤的一个家系（无需考虑Ⅱ-3、Ⅱ-4、Ⅱ-5的配偶与该病的遗传）。右图为对该家系中Ⅱ-4的染色体检测的结果，Ⅲ-7与Ⅲ-8的检测结果与Ⅱ-4一致。
1．据右图分析，该家系中NFI的发病原因是______。
2．左图中患者Ⅱ-4的父母和兄弟姐妹均表现正常，推测Ⅱ-4患病的原因是______。
3．左图中若Ⅲ-7的配偶无异常，他们生下一个健康孩子的概率为______ 。
1型神经纤维瘤（NFI）的发病原因复杂多样。在另一个家系中，母女二人均患有视神经纤维瘤并且眼睛无虹膜（PAX6）。检测发现该系中夫妇二人及女儿的染色体形态和数目均正常，母亲的11号、17号染色体上带有PAX6和NF1突变基因，父亲无突变基因。
4．对母亲所携带的PAX6突变基因进行分析，发现其编码的蛋白质第38位由编码精氨酸变成了色氨酸。这种突变的原因是______________________ 。
5．该家系中的NFI、PAX6突变分别为______ 、______ （显性/隐性）。
6．综合MF1遗传的特点，为确保患者后代正常，产前检查项目应包含______。
基因编辑与生物技术
CRISPR-cas技术又称为基因编辑技术，其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。 CRISPR-cas9系广泛存在于细菌体内，是基于细菌的一种获得性免疫系统改造而成、可以定向切割外源DNA。如图表示基因编辑技术的简单示意图。
7．细菌中与CRISPR-cas9系统在物质组成上最相似的结构是______ 。
8．该系统使细菌获得抵抗______的能力。
9．PAM序列是一个NG序列（N可以是任何碱基，能被CRISPR-cas9系统识别，并在该序列附近有酶切位点，请分析其互补链上的碱基序列可以是______。
10．以下关于CRISPR-cas9系统和限制酶功能说法正确的是______
科学家同时利用两组CRISPR-cas9系统，使目的基因两端的DNA双链断裂，再将目的基因两侧的DNA片段连接起来，实现了细胞中目标基因的敲除，如图。2019年中国科学院神经科学研究所利用该技术处理猕猴胚胎后，获得了世界首例核心节律基因BMAL1敲除的猕猴。
11．请从分子水平上列举两个BAML1基因敲除猕猴与正常猕猴的差别_____________ 。
12．分别从基因波除猕猴的手臂肌肉组织和生殖腺组织中提取DNA进行基因检测，结果显示其手警肌肉组织DNA中未检出BMALI因而在生殖腺组织DNA中检出BMAL1基因。欲培养全身细胞中的BMAL1基因均被敲除的猕猴，请简述可采用的技术手段是__________ 。
1．据右图分析，该家系中NFI的发病原因是______。
| A．染色体易位 | B．染色体重复 | C．染色体三体 | D．基因丢失 |
| A．I-1发生了体细胞变异 | B．I-1发生了生殖细胞变异 |
| C．Ⅱ-4发生了体细胞变异 | D．I-4发生了生殖细胞变异 |
1型神经纤维瘤（NFI）的发病原因复杂多样。在另一个家系中，母女二人均患有视神经纤维瘤并且眼睛无虹膜（PAX6）。检测发现该系中夫妇二人及女儿的染色体形态和数目均正常，母亲的11号、17号染色体上带有PAX6和NF1突变基因，父亲无突变基因。
4．对母亲所携带的PAX6突变基因进行分析，发现其编码的蛋白质第38位由编码精氨酸变成了色氨酸。这种突变的原因是
5．该家系中的NFI、PAX6突变分别为
6．综合MF1遗传的特点，为确保患者后代正常，产前检查项目应包含______。
| A．染色体分析 | B．基因检测 | C．性别鉴定 | D．B超检查 |
基因编辑与生物技术
CRISPR-cas技术又称为基因编辑技术，其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。 CRISPR-cas9系广泛存在于细菌体内，是基于细菌的一种获得性免疫系统改造而成、可以定向切割外源DNA。如图表示基因编辑技术的简单示意图。
7．细菌中与CRISPR-cas9系统在物质组成上最相似的结构是
8．该系统使细菌获得抵抗______的能力。
| A．噬菌体 | B．抗体 | C．抗生素 | D．溶菌酶 |
| A．TGG | B．CCC | C．GCC | D．AG |
| A．都具有特异性 |
| B．部能作用于磷酸和脱氧核糖之间的化学键 |
| C．都能切割RNA单链 |
| D．都需要和DNA连接酶配合使用，实现转基因 |
科学家同时利用两组CRISPR-cas9系统，使目的基因两端的DNA双链断裂，再将目的基因两侧的DNA片段连接起来，实现了细胞中目标基因的敲除，如图。2019年中国科学院神经科学研究所利用该技术处理猕猴胚胎后，获得了世界首例核心节律基因BMAL1敲除的猕猴。
11．请从分子水平上列举两个BAML1基因敲除猕猴与正常猕猴的差别
12．分别从基因波除猕猴的手臂肌肉组织和生殖腺组织中提取DNA进行基因检测，结果显示其手警肌肉组织DNA中未检出BMALI因而在生殖腺组织DNA中检出BMAL1基因。欲培养全身细胞中的BMAL1基因均被敲除的猕猴，请简述可采用的技术手段是
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5 . 白羊草是一种耐旱的优良草本植物。研究人员提取白羊草细胞中的M基因，将其转入拟南芥细胞中，以研究白羊草的M基因与抗旱性的相关性。
1．利用PCR技术获得M基因，需要在PCR反应体系中加入模板、引物及_____ ，若模板双链DNA的数量为a个，经过35个循环需要消耗引物的数量是_____
A．a×（235×2–2） B．a×（235×2）
C．a×（235–2） D．a×（236×2–2）
2．研究人员选择下图质粒作为运载体时，最好同时使用两种限制酶切割质粒，并且两种限制酸中不能用限制酶_____ ，原因是_____
3．研究人员想要进一步确定白羊草的M基因与其抗旱性是否有关，请以转基因拟南芥、野生型拟南芥为实验材料，设计思路______
A．以野生型拟南芥作为对照组
B．以野生型拟南芥作为实验组
C．以导入M基因的拟南芥作为实验组
D．以导入M基因的拟南芥作为对照组
E．将对照组和实验组的拟南芥置于正常环境中培养，并观察记录其生长情况
F．将对照组和实验组的拟南芥置于干旱环境中培养，并观察记录其生长情况
若_____ ，则说明M基因与白羊草的抗旱性有关。
为大量生产人血清白蛋白，将人血清白蛋白基因（HSA基因）导入动物体内获得动物乳腺生物反应器。
4．以mRNA为模板可逆转录合成HSA基因，与从供体生物的DNA中有效分离的方法相比，该方法获得的HSA基因中不包含_____序列。
5．用PCR技术扩增HSA基因时，设计引物的依据是_____
6．为使PCR产物能被限制酶切割，需在引物上添加相应的限制酶识别序列。下图为所用载体结构示意图，载体中限制酶的识别序列及切割位点见下表（HSA基因序列中无图中限制酶的识别序列）。则应在扩增的HSA基因两端分别引入_____ 两种不同限制酶的识别序列。连接经过这两种酶切割的HSA基因和载体时，选用_____
注：箭头表示切割位点
7．为保证HSA基因成功表达，应将HSA基因与_____ 等调控组件（DNA的功能片段）重组在一起。将构建含有HSA基因的表达载体导入动物的_____ 中，利用胚胎工程的技术手段获得动物乳腺生物反应器。
8．为获得更多动物乳腺生物反应器，科研员采用细胞核移植克隆乳腺生物反应器。发现囊胚细胞核移植比体细胞核移植更有优势，其原因是_____
1．利用PCR技术获得M基因，需要在PCR反应体系中加入模板、引物及
A．a×（235×2–2） B．a×（235×2）
C．a×（235–2） D．a×（236×2–2）
2．研究人员选择下图质粒作为运载体时，最好同时使用两种限制酶切割质粒，并且两种限制酸中不能用限制酶
3．研究人员想要进一步确定白羊草的M基因与其抗旱性是否有关，请以转基因拟南芥、野生型拟南芥为实验材料，设计思路
A．以野生型拟南芥作为对照组
B．以野生型拟南芥作为实验组
C．以导入M基因的拟南芥作为实验组
D．以导入M基因的拟南芥作为对照组
E．将对照组和实验组的拟南芥置于正常环境中培养，并观察记录其生长情况
F．将对照组和实验组的拟南芥置于干旱环境中培养，并观察记录其生长情况
若
为大量生产人血清白蛋白，将人血清白蛋白基因（HSA基因）导入动物体内获得动物乳腺生物反应器。
4．以mRNA为模板可逆转录合成HSA基因，与从供体生物的DNA中有效分离的方法相比，该方法获得的HSA基因中不包含_____序列。
| A．起始密码子 | B．启动子 |
| C．终止密码子 | D．终止子 |
| A．HSA基因模板链的碱基序列 |
| B．HSA基因编码链的碱基序列 |
| C．HSA基因的碱基序列 |
| D．HSA基因对应mRNA的碱基序列 |
名称 | 识别序列及切割位点 | 名称 | 识别序列及切割位点 |
HindⅢ | A↓AGCTT TTCGA↑A | EcoRⅠ | G↓AATTC CTTAA↑G |
PvitⅡ | CAG↓CTG GTC↑GAC | PstⅠ | CTGC↓AG GA↑CGTC |
KpnⅠ | G↓GTACC CCATG↑G | BamHⅠ | G↓GATCC CCTAG↑G |
7．为保证HSA基因成功表达，应将HSA基因与
8．为获得更多动物乳腺生物反应器，科研员采用细胞核移植克隆乳腺生物反应器。发现囊胚细胞核移植比体细胞核移植更有优势，其原因是_____
| A．囊胚细胞分化程度更高，更易体现全能性 |
| B．体细胞分化程度更高，更易体现全能性 |
| C．囊胚细胞分化程度更低，更易体现全能性 |
| D．体细胞分化程度更低，更易体现全能性 |
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6 . （三）回答下列有关生物工程的问题。
糖尿病是一类严重代谢疾病，科学家正研究各种方法欲从根本上彻底治疗糖尿病。如图显示的是体外培养人体胚胎干细胞，诱导其产生胰岛细胞进行糖尿病治疗的部分过程。_____ （A/B）细胞，该细胞与发育成患者的受精卵相比____________ 。
A. 细胞核中所含遗传信息不同 B. 分裂方式不同
C. 都具有全能性 D. 都能自我更新
2．图中，进行核移植操作需要________________ 。
A. 显微镜 B. 持卵管 C. 注射器 D. 限制酶
3．将用如图方法获得的胰岛细胞移植入患者体内，可以治疗患者。据此判断此患者患的是_______ 型糖尿病。
在胰岛B细胞中，当胰岛素原向胰岛素转变的过程中，furin酶可以识别并切除胰岛素原分子中特定的氨基酸序列，从而完成胰岛素的加工，产生具有生物活性的胰岛素。某些糖尿病患者体内合成的胰岛素原结构异常，不能正常完成上述过程。
基因治疗该类患者的方法之一是：将胰岛素基因导入胰岛B细胞以外的细胞，同时导入一些调节因子刺激该细胞再生，使之成为能分泌具生物活性胰岛素的新B细胞。
4．形成胰岛素的过程中，furin酶能识别并切除相关氨基酸序列，由此推测，该酶的功能更接近于______________ 。
A. 氧化分解酶 B. 逆转录酶
C. 限制酶 D. DNA连接酶
5．欲使胰岛素基因的表达产物在新的B细胞中能被加工，产生生物活性，正确的操作是____ 。
A. 导入胰岛素基因时，同时导入furin酶基因
B. 导入胰岛素基因后，加入furin酶
C. 使胰岛素基因的表达产物中含furin酶切位点
D. 改造furin酶基因，使其丧失识别和切除功能
糖尿病是一类严重代谢疾病，科学家正研究各种方法欲从根本上彻底治疗糖尿病。如图显示的是体外培养人体胚胎干细胞，诱导其产生胰岛细胞进行糖尿病治疗的部分过程。
A. 细胞核中所含遗传信息不同 B. 分裂方式不同
C. 都具有全能性 D. 都能自我更新
2．图中，进行核移植操作需要
A. 显微镜 B. 持卵管 C. 注射器 D. 限制酶
3．将用如图方法获得的胰岛细胞移植入患者体内，可以治疗患者。据此判断此患者患的是
在胰岛B细胞中，当胰岛素原向胰岛素转变的过程中，furin酶可以识别并切除胰岛素原分子中特定的氨基酸序列，从而完成胰岛素的加工，产生具有生物活性的胰岛素。某些糖尿病患者体内合成的胰岛素原结构异常，不能正常完成上述过程。
基因治疗该类患者的方法之一是：将胰岛素基因导入胰岛B细胞以外的细胞，同时导入一些调节因子刺激该细胞再生，使之成为能分泌具生物活性胰岛素的新B细胞。
4．形成胰岛素的过程中，furin酶能识别并切除相关氨基酸序列，由此推测，该酶的功能更接近于
A. 氧化分解酶 B. 逆转录酶
C. 限制酶 D. DNA连接酶
5．欲使胰岛素基因的表达产物在新的B细胞中能被加工，产生生物活性，正确的操作是
A. 导入胰岛素基因时，同时导入furin酶基因
B. 导入胰岛素基因后，加入furin酶
C. 使胰岛素基因的表达产物中含furin酶切位点
D. 改造furin酶基因，使其丧失识别和切除功能
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7 . 有些人体内缺乏足够的乳糖酶（LCT），无法充分消化牛奶中的乳糖，会导致喝奶后产生腹泻等不良反应。我国科研人员利用转基因技术和克隆技术培育出了可产低乳糖牛奶的拉克斯牛，培育过程如图所示，A～C表示操作步骤。（图中胚胎成纤维细胞是由胚胎干细胞经分裂分化后产生的一类仍具有分裂能力的细胞）
(1)通过步骤A获取重组质粒T时，除需要限制酶BamHI外，还需要________ 等酶的参与。实现步骤B常用的方法是________ ，步骤C中的技术被称为________ 。
(2)动物基因工程中常用受精卵作为受体细胞，而在拉克斯牛的培育过程中选择胚胎成纤维细胞作为受体细胞，此举有何意义：________ 。
(3)在现有的技术条件下，还不能直接将重组细胞1培养成一个新个体，而必须获取重组细胞2后才能发育成新个体，你认为原因最可能是 。
(4)下列对拉克斯牛的分析中正确的有 。
(5)科研人员发现，拉克斯牛所产的牛奶除乳糖含量低之外，还含有高活性的乳糖酶，可用于生产工业用乳糖酶。在此生产过程中，用于将乳糖酶与乳清蛋白分离的操作技术是________ 。
(1)通过步骤A获取重组质粒T时，除需要限制酶BamHI外，还需要
(2)动物基因工程中常用受精卵作为受体细胞，而在拉克斯牛的培育过程中选择胚胎成纤维细胞作为受体细胞，此举有何意义：
(3)在现有的技术条件下，还不能直接将重组细胞1培养成一个新个体，而必须获取重组细胞2后才能发育成新个体，你认为原因最可能是 。
| A．重组细胞2的细胞核才具有全能性 |
| B．重组细胞2的核DNA与重组细胞1不同 |
| C．重组细胞2中核基因的表达情况与重组细胞1不同 |
| D．卵细胞较大，便于操作 |
| A．拉克斯牛体内的神经、肌肉和乳腺细胞中均含有乳糖酶基因 |
| B．除乳糖酶基因外，拉克斯牛的核基因与图中黑白花奶牛相同 |
| C．对图中拉克斯牛进行克隆繁育，无法获得雄拉克斯牛 |
| D．导入了乳糖酶基因的重组细胞2，一定能培育出拉克斯牛 |
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8 . 植物体细胞杂交技术可将不同种植物的优势集中在一个个体上，培育人们生产所需 的优良杂种植株。如图为利用某种耐酸植物甲(4N) 和高产植物乙(2N)，培育高产耐酸植物丙的过程。回答下列问题；
(1)图中①过程为酶解法去壁，该过程所需的酶是_____________ ,进行该操作前需对甲、乙植物细胞进行________ (选填“消毒”或“灭菌”)处理，以防止杂菌污染。
(2)PEG诱导后，除了“甲’+乙′”,还存在_______ ，_______
(3)图中过程②称为________ ，由杂种细胞发育为植物丙的原因是_______
(4)在再分化阶段所用的培养基中，含有植物激素X 和植物激素Y, 逐渐改变培养基这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如下图所示，植物激素X的名称是_____________ ，植物激素Y的名称是_________________ 。当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，___________________ 。
2017年11月-12月，中科院神经科学研究团队利用体细胞克隆技术克隆出了猕猴“中中”和“华华”,该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。
(5)图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是_________________ 。
(6)刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部首先会出现细胞贴壁现象。传代培养时，常利用______________________ 酶，制成细胞悬液后转入新的培养瓶中。需要控制的培养条件包括______________________
①无菌②适宜的温度③5％的CO2 ④充足的溶解氧⑤充足的光照 ⑥合适的渗透压 ⑦充足的营养物质
(7)图所示过程涉及的生物技术有______________________ （答出两点）
以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自称猴胚胎成纤维细胞的细胞核。图中步骤①是克隆猴的技术难点之一，需要将卵母细胞培养到MII期后进行去核操作，而后用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育。
(8)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中kdm4dmRNA翻译产生的酶的作用是______________________ ,kdm4dmRNA导入重组细胞的技术是______________________ 。
(1)图中①过程为酶解法去壁，该过程所需的酶是
(2)PEG诱导后，除了“甲’+乙′”,还存在
(3)图中过程②称为
(4)在再分化阶段所用的培养基中，含有植物激素X 和植物激素Y, 逐渐改变培养基这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如下图所示，植物激素X的名称是
2017年11月-12月，中科院神经科学研究团队利用体细胞克隆技术克隆出了猕猴“中中”和“华华”,该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。
(5)图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是
(6)刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部首先会出现细胞贴壁现象。传代培养时，常利用
①无菌②适宜的温度③5％的CO2 ④充足的溶解氧⑤充足的光照 ⑥合适的渗透压 ⑦充足的营养物质
(7)图所示过程涉及的生物技术有
以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自称猴胚胎成纤维细胞的细胞核。图中步骤①是克隆猴的技术难点之一，需要将卵母细胞培养到MII期后进行去核操作，而后用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育。
(8)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中kdm4dmRNA翻译产生的酶的作用是
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2023-11-30更新
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219次组卷
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2卷引用：上海市封浜高中2023-2024学年高三上学期期中生物试题
名校
解题方法
9 . 植物体细胞杂交技术可将不同种植物的优势集中在一个个体上，培育人们生产所需的优良杂种植株。如图1为利用某种耐酸植物甲（4N）和高产植物乙（2N），培育高产耐酸植物丙的过程。回答下列问题。
(1)①过程为酶解法去壁，该过程所需的酶是_____ ，进行该操作前需对甲、乙植物细胞进行_____ 处理，以防止杂菌污染。
(2)PEG诱导后，除了“甲'+乙'”，还存在_____ 。
(3)图1中过程②称为_____ 。
(4)在再分化阶段所用培养基中，含有植物激素X和植物激素Y。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如图所示。植物激素X的名称是_____ 。当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，_____ 。
2017年11月～12月，中科院神经科学研究所研究团队利用体细胞克隆技术克隆出了猕猴“中中”和“华华”，该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。如图是体细胞克隆猴的技术流程，请据图回答下列问题：
(5)图2中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是_____ 。刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后首先会出现细胞贴壁现象。传代培养时，常利用_____ 酶消化处理，制成细胞悬液后转入新的培养瓶中。
(6)图2所示过程涉及的主要技术有_____ 。（答出两点即可）
以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自猕猴胚胎成纤维细胞的细胞核。图2中步骤①是克隆猴的技术难点之一，需要将卵母细胞培养到MⅡ期后进行去核操作，而后用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。
(7)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图2中KDM4d mRNA翻译产生的酶的作用是_____ 。
(1)①过程为酶解法去壁，该过程所需的酶是
(2)PEG诱导后，除了“甲'+乙'”，还存在
(3)图1中过程②称为
(4)在再分化阶段所用培养基中，含有植物激素X和植物激素Y。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如图所示。植物激素X的名称是
2017年11月～12月，中科院神经科学研究所研究团队利用体细胞克隆技术克隆出了猕猴“中中”和“华华”，该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。如图是体细胞克隆猴的技术流程，请据图回答下列问题：
(5)图2中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是
(6)图2所示过程涉及的主要技术有
以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自猕猴胚胎成纤维细胞的细胞核。图2中步骤①是克隆猴的技术难点之一，需要将卵母细胞培养到MⅡ期后进行去核操作，而后用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。
(7)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图2中KDM4d mRNA翻译产生的酶的作用是
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解题方法
10 . 科学家培育出转人胰岛素基因山羊以大规模生产人胰岛素（从乳汁中提取），过程如图所示。其中编号①~⑨表示过程；质粒S中的标记基因Leu控制合成亮氨酸，标记基因GFP控制合成绿色荧光蛋白；四种限制酶的识别序列及切割位点见表。
(1)用Xba Ⅰ切割某DNA片段所获得的黏性末端的碱基序列为____ 。
(2)图中能体现高度分化的动物体细胞具有全能性的编号有____ 。
(3)含有目的基因的物质B是用限制酶____切割的结果。
(4)用BamH Ⅰ酶切的DNA末端与用Bgl Ⅱ酶切DNA末端连接，用DNA连接酶后形成的连接部位用BamH Ⅰ____ （选填“能”、“不能”或者“不一定能”）切开，用Bgl Ⅱ____ （选填“能”、“不能”或者“不一定能”）切开。
(5)下列能成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞的说法是____。
限制酶 | BamH Ⅰ | Bgl Ⅱ | Hind Ⅲ | Xba Ⅰ |
识别序列和切割位点 | G↓GATCC | A↓GATCT | A↓AGCTT | T↓CTAGA |
(1)用Xba Ⅰ切割某DNA片段所获得的黏性末端的碱基序列为
(2)图中能体现高度分化的动物体细胞具有全能性的编号有
(3)含有目的基因的物质B是用限制酶____切割的结果。
| A．BamH Ⅰ | B．Bgl Ⅱ | C．Hind Ⅲ | D．Xba Ⅰ |
(4)用BamH Ⅰ酶切的DNA末端与用Bgl Ⅱ酶切DNA末端连接，用DNA连接酶后形成的连接部位用BamH Ⅰ
(5)下列能成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞的说法是____。
| A．培养基中加入亮氨酸，培养一段时间后观察，细胞显示出绿色荧光 |
| B．培养基中加入亮氨酸，培养一段时间后观察，细胞不显示出绿色荧光 |
| C．培养基中不加亮氨酸，培养一段时间后观察，细胞不显示出绿色荧光 |
| D．培养基中不加亮氨酸，培养一段时间后观察，细胞显示出绿色荧光 |
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2023-12-09更新
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126次组卷
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2卷引用：上海市东华大学附属奉贤致远中学2023-2024学年高三上学期期中生物试题
