1 . 分析下列资料，回答问题。
我国全面放开二孩政策可缓解我国低生育率及人口老龄化带来的问题，“试管婴儿技术”可为不孕夫妇重新获得生育的机会。请回答下列问题：
（1）试管婴儿技术主要用到了胚胎工程中的________________技术。（答出2项即可）
（2）自然条件下，当在________________________时，说明卵子已经完成了受精，这是判断卵子是否受精的标志。为保证有可以移植的、有活力的胚胎，需要对女性进行超数排卵处理，一般需要注射______，使其排出更多的卵子。
（3）早期胚胎可以分为桑椹胚、囊胚以及______三个阶段。囊胚中的内细胞团将来发育成__________________。
（4）当胚胎发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植。该“试管婴儿”胚胎也可移植到代孕母体子宫中，其可以在代孕母体子宫中存活的关键因素是：____________________。
（5）如果是用体外受精的方法获得的胚胎，那么受精过程一般情况下都可以在______或专用的受精溶液中完成。早期的胚胎生命力旺盛，______（填“不存在”或“存在”）与细胞凋亡有关的基因。

2 . 如图是利用克隆技术进行人类疾病治疗的示意图，图中①～④表示细胞，A-C表示过程。请据图回答下列问题：

（1）过程A表示的细胞工程技术是____，该过程用患者的体细胞作为供核细胞，用[①]____作为提供细胞质的细胞。
（2）对②进行培养时，需将培养瓶置于含适量CO₂的培养箱中，以维持培养液的____相对稳定；培养液中需添加一定量的___，以防止污染；培养液中加入____因子，可促进C过程的进行。
（3）胚胎干细胞可从图中[③]____获取，用某染料鉴定该胚胎干细胞是否为活细胞时，发现活细胞不能被染色，其原因是活细胞膜对物质的吸收具有____。若胚胎正常发育，④将发育成_____。

3 . 亚麻酸（ALA）能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响。分析回答：
①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在39℃、5%CO₂的培养箱中培养22～24h。
②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表1。
③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。
④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44～48h后检查分裂情况，每隔48h更换一次培养液，第5～9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2。
表1亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响

表2亚麻酸对水牛早期胚胎发育的影响

（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO₂的作用是_____________。
（2）步骤②中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征是_____________。步骤③中，判断是否受精的依据是_____________。
（3）步骤④中，受精卵经_____________（时期）发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是_____________。
（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol·L^-1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起_____________（促进、抑制）作用。
（5）实验结果表明，_____________μmol·L^-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利，判断依据是_____________。

4 . 2018年4月，《Reproductive BioMedicine》期刊在线发表的一篇文章显示，到2100 年，借助辅助生殖技术（即试管婴儿技术）诞生的人数可能将达到全球总入口的3．5%—约4亿人。请回答下列问题：
（1）试管婴儿技术的最后一道工序是_____。
（2）体外受精首先需采集卵子，成熟的卵子能与_________的精子结合，形成受精卵。受精卵发育成胎儿的大致过程是受精卵→_____→囊胚→_____→组织器官的分化。
（3）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O₂ 以维持细胞呼吸外。还需要提供_______以维持培养液的正常pH。母体对移入子宫的外来胚胎_____，这为胚胎在母体内存活提供了可能。
（4）借助于胚胎分割技术，理论上一次可以获得多个胎儿，胚胎分割操作过程霄要特别注意的问题是将_____均等分裂。
（5）人也是生态系统的一员，要维持地球的和谐有序发展，我们必须关注生态工程建设。下列结构示意图最能体现生态工程中系统学和工程学原理的是_____。

5 . 猪表皮细胞特异性表达E基因，经过处理的猪皮可在人身上存活3周左右，起到保护创面免受感染的作用。为了使移植的猪皮存活时间更长，有人设法导入人的相关基因（用P表示），获得转基因小白猪。但克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。其简单流程如图所示：

(1)要使P基因在特定细胞表达，过程①中构建的重组DNA分子上还应具有________。
(2)过程②中，如何处理皮肤组织块，使其分散成单个成纤维细胞？________。
(3)将重组细胞经③培养至卵裂期，合理的变化是（             ）

A．	B．
C．	D．

(4)图中X表示________过程，Bcl-2cDNA与Bcl-2基因在结构上的区别是________。
(5)从基因组数据库中查询Bcl-2mRNA的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成________用于PCR扩增，PCR扩增过程第一轮循环的模板是________，所使用的酶经80℃处理后，酶活性________。PCR扩增了五轮，共需要加入的引物对的数为________。
(6)在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2CDNA的分子数，进而计算________的分子数，从而反映出Bc1-2基因的转录水平。

6 . 下图1为某高等动物生活史示意图，图2为图1中某阶段部分过程，请据图回答：


（1）图1中A过程表示_____过程，若A过程能使生物产生正常变异，则原因之一是该过程的四分体时期同源染色体中非姐妹染色单体发生了______，出现基因重组的结果。
（2）图2是图1中___（填字母）阶段部分过程，该过程表示___。
（3）在图2中，F表示_______，数字①部位是_______，该部位细胞在功能上具有___。②部位是________。

7 . 研究人员利用小鼠(2N＝40)的单倍体ES细胞(只含一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如下图所示：

注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶，箭头指向的位置为限制酶的切割位置，Amp^r是氨苄青霉素抗性基因，Neo^r是G418抗性基因。
（1）重组质粒上的抗生素抗性基因可作为________，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞。氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo^r的小鼠细胞，结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是________(选填图中的编号)，图中③处的培养液应添加________________(填氨苄青霉素或G418 )。
（2）若图中过程①选用的2种限制酶识别序列和切割位置分别是和，则经这两种限制酶切割后所产生的黏性末端是______。此时，图中过程②应选用______(填E·coli DNA连接酶或T₄DNA连接酶)。
（3）据图分析，细胞乙内除线粒体DNA外，还有________个DNA分子；细胞乙发育成桑葚胚的过程中细胞分裂方式是____________，将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为________技术，该胚胎中每个细胞的体积变化是_______。
（4）下列关于质粒运载体的说法正确的是________。
A．没有限制酶就无法使用质粒运载体
B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达

8 . 冷冻胚胎技术是将胚胎置于零下196℃的液氮中。在这样的环境下，胚胎里的细胞生命几乎是完全静止的，但并非中断。一枚胚胎“沉睡”了18年，直至2015年11月初，在上海复旦大学附属妇产科医院专家的帮助下被“唤醒”，并成功移植到妈妈的子宫内。2016年6月27日，这位妈妈顺利诞下女婴，婴儿重3300克，身体指标一切正常。据悉，这是目前中国保存时间最久经复苏成功的胚胎，医生们形象地把这个宝宝称为中国最“抗冻”宝宝。请回答下列问题：
（1）早期胚胎可以分为_______、囊胚以及_______三个阶段。囊胚中的内细胞团将来发育成_______________。
（2）当胚胎发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植。该“抗冻”胚胎也可移植到代孕母体子宫中，其可以在代孕母体子宫中存活的关键因素是：________________。“抗冻”宝宝的性状与代孕母体是否有关？请回答并简述理由：__________________。
（3）如果是用体外受精的方法获得的胚胎，那么受精过程一般情况下都可以在______或专用的受精溶液中完成。早期的胚胎生命力旺盛，______（填“不存在”或“存在”）与细胞凋亡有关的基因。

9 . 2018年4月，（Reproductive BioMedicine ）期刊在线发表的一篇文章显示，到2100 年，借助辅助生殖技术（即试管婴儿技术 ）诞生的人数可能将达到全球总入口的3．5%---约4 亿人。请回答下列问题：
（1）试管婴儿技术是体外受精技术 ________技术等人工助孕技术的俗称。
（2）体外受精首先需采集卵子，成熟的卵子能与____________ 的精子结合，形成受精卵。受精卵发育成胎儿的大致过程是受精卵→_____→囊胚→ _____→组织器 官的分化。
（3）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外。还需要提供_______以维持培养液的正常pH。母体对移入子宫的外来胚胎____________，这为胚胎在母体内存活提供了可能。
（4）借助于胚胎分割技术，理论上一次可以获得多个胎儿，胚胎分割操作过程霄要特别注意的问题是将__________均等分裂。
（5）人也是生态系统的一员，要维持地球的和谐有序发展，我们必须关注生态工程建设。下列结构示意图最能体现生态工程中系统学和工程学原理的是______________。

10 . 1890年英国剑桥大学的生物学家将纯种安哥拉兔的两个4细胞胚胎移入一只纯种比利时兔的输卵管内，成功地产下两只纯种安哥拉兔，在此之后胚胎工程技术开始广泛地发展起来。请根据胚胎工程相关的知识回答下列问题：
（1）胚胎工程是指对动物的____________所进行的多种显微操作和处理技术。
（2）在自然条件下受精过程是在雌性的输卵管内完成的，完成这个过程的前提是____________和卵子发育至____________期。受精作用过程中防止多精入卵的生理屏障包括____________。
（3）胚胎发育的早期有一段时间是在透明带内进行的，这一时期称为卵裂期。其特点是：____________。
（4）ES或EK细胞来源于早期胚胎或____________，在功能上具有发育的全能性。体培养时，ES细胞可以____________，可对其进行冷冻保存，也可进行遗传改造。