2 . 我国科学家利用猴胚胎干细胞首次培育出人工“猴胚胎”，培育流程如图所示。请回答下列问题：

   

(1)胚胎干细胞在形态上的特点是____。胚胎干细胞应置于____℃左右的恒温培养箱中进行培养和诱导分化。用于体外培养胚胎干细胞的合成培养基中含有的营养物质有____（答出两点）。正常情况下，培养液应定期进行更换，目的是____。
(2)若需要对胚胎进行DNA分析性别鉴定，最好选择____（填图中序号）所示细胞；若需同时获得多个遗传物质相同的胚胎，可在实体显微镜下对囊胚进行分割，操作时需要注意将____（填图中序号）均等分割。
(3)胚胎移植前____（填“需要”或“不需要”）对胚胎和受体进行配型，理由是____。

4 . 干细胞的培养成功是动物细胞培养领域重大的成就之一。请回答下列与干细胞培养相关的问题：
(1)图为科研人员利用恒河猴获取单倍体胚胎干细胞的一种方法：

科研人员应注射____________________使恒河猴超数排卵，图①细胞具备与精子受精的能力，为___________________期的卵母细胞，图④的名称为____________________________。单倍体胚胎干细胞能分化形成不同功能的细胞、组织和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究______________________________（填“显性”或“隐性”） 基因功能的理想细胞模型。
(2)人体的P 基因缺失可诱发多种神经发育障碍疾病，研究者利用人诱导多能干细胞（hiPSC）制备的人脑类器官进行相关实验。
①研究者获得P 基因敲除的人诱导多能干细胞（P-KO），并将野生型人诱导多能干细胞（WT）和P-KO 培养在气体环境为___________________的培养箱中。hiPSC 贴壁生长至相互接触时会出现_______________________现象，用___________________________酶处理进行传代。经过诱导分化形成的神经祖细胞，产生多层不同的神经细胞，最终形成人脑类器官。
②与利用动物模型进行实验相比，hiPSC 诱导形成的人脑类器官作为神经系统研究模型的优势是___________________________________________。

5 . 利用体细胞核移植来克隆高产奶牛的大致流程如下图，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶。回答下列问题：

(1)过程①应选用处于________的卵母细胞，采用显微操作法去“核”，其实是去除________。在过程②③中所需气体主要有O₂和CO₂，O₂是细胞代谢所必需的，CO₂的主要作用是________。
(2)重构细胞经分裂、发育至________时期，可移植到受体母牛子宫中。移植之前，需要对受体母牛进行________处理。若要获得遗传性状完全相同的多只犊牛，可对重构胚进行________，再进行移植。犊牛的表型不完全与高产奶牛一致，原因可能是________（答一点）。
(3)科研人员为确定Kdm4d的mRNA的作用，进行了如下实验，其中A组用正常培养液培养重构胚，B组用正常培养液培养注入了Kdm4d的mRNA的重构胚，实验结果如图所示。根据实验结果推测Kdm4d的mRNA的作用是________。

6 . 研究发现人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品。科学家培育出转入溶菌酶基因山羊，以大规模生产人溶菌酶（从乳汁中提取），过程如图所示。其中编号①～⑨表示过程；质粒S中的基因Leu通过控制相关酶的合成而控制亮氨酸的合成（亮氨酸是山羊细胞维持生命活动必不可少的一种必需氨基酸），基因GFP控制合成绿色荧光蛋白。四种限制性内切核酸酶的识别序列及切割位点见下表。请回答下列问题：

限制酶	BamHI	BglII	HindIII	XbaI
识别序列和切割位点	G'GATCC	A'GATCT	A'AGCTT	T'CTAGA

(1)过程②需要的限制性内切核酸酶是____________，在③中，B与切割后的质粒S用______酶连接，在两个片段相邻处形成______，获得重组质粒T。
(2)为成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞，质粒S中用作标记基因的是____________。为达到筛选目的，培养基的营养成分中特殊之处是____________。若用PCR检测目的基因是否成功导入受体细胞中，实验组以待测的样本DNA为模板，使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增，同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组，将以____________为模板的组别作为阴性对照组。
(3)过程⑧中______（填“需要”或“不需要”）添加胚胎成纤维细胞，图中早期胚胎的______（填结构）将发育成完整转基因羊个体。

7 . 科学家采用体外受精技术或动物细胞核移植技术获得大熊猫胚胎，并进行胚胎移植，该工作有助于恢复濒危大熊猫的种群数量；我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图1所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂；科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得多能干细胞，继而利用多能干细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如图2所示；胚胎工程技术可以提高黄牛的繁殖潜力，满足人类的需求，具体操作流程如图3。下列说法正确的是___________
  

①动物细胞核移植属于动物细胞工程技术
②体外受精前需要对大熊猫的精子进行获能处理
③体外受精前常需要对雌性大熊猫进行超数排卵处理
④胚胎早期发育时，桑葚胚内部开始出现含液体的腔
⑤胚胎移植时，受体常会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应
⑥组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程
⑦用电刺激、Ca²⁺载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
⑧图1中③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合
⑨图示流程运用了重组DNA、体细胞核移植、胚胎移植等技术
⑩为防止受体对移植的胚胎发生免疫排斥，供体和受体要进行同期发情处理
⑪胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行分割
⑫囊胚期透明带会破裂，胚胎从中伸展出来的过程叫孵化
⑬在自然条件下，哺乳动物的受精过程和早期胚胎的发育均在输卵管中完成
⑭图2多能干细胞发育成了克隆鼠X的各种组织
⑮图2对克隆鼠X进行性别鉴定时不能从滋养层处取样
⑯图2实验使用了体外受精、胚胎移植和胚胎分割等技术
⑰将克隆鼠的肝脏移植给黑鼠可避免免疫排斥反应
⑱图3对黄牛B通常采用外源促性腺激素进行超数排卵处理
⑲图3受精卵进行早期分裂时，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积增大
⑳图3为了避免发生免疫排斥反应，对黄牛C注射免疫抑制剂
图3为了获得更多的优良胚胎，可利用胚胎分割技术将桑葚胚的内细胞团均等分割
精子释放多种酶溶解卵细胞膜外的结构及卵细胞膜，随后精子入卵
防止多精入卵的两道屏障为透明带和卵细胞膜分别发生特定的生理反应
受精卵形成后即在输卵管内进行有丝分裂，开始发育
高等哺乳动物细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束

8 . 请回答下列有关胚胎工程方面的问题。
(1)受精卵在透明带内进行有丝分裂的时期称_____，当子细胞排列形成致密的细胞团时叫作_____。该实心胚进入子宫腔后，细胞间出现裂隙、胚胎内初次出现空腔，细胞开始分化，此时胚胎称为_____。
(2)早期胚胎中初次发生分化的细胞一部分形成内细胞团，将来发育成_____;而沿透明带内壁扩展和排列的细胞，称_____，将来发育成_____。此时，胚胎中央的腔称为_____。
(3)胚胎从透明带中伸展出来的过程叫作_____。

9 . 据第三次全国大熊猫野外种群调查，全世界野生大熊猫不足1600只，因此。如何保护和繁殖大熊猫是亟待解决的问题，现设计如下繁殖过程。请回答下列问题：
   
(1)图中激素处理可使供体___，从而可培育更多的早期胚胎。代孕受体在移植前需要经过__处理，以便早期胚胎成功植入或着床。代孕受体的优良特性主要包括：_______。
(2)下列对象中，通常不适合胚胎移植的是　　。

A．受精卵

B．八细胞胚

C．桑葚胚

D．早期囊胚

(3)为了繁殖更多后代，可以通过_____技术，产生同卵多仔。该技术可在囊胚期从______取样做DNA分析，鉴定性别。

10 . 长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：

   

(1)和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②卵细胞膜反应；③透明带反应；④穿越透明带；⑤精子入卵。其正确的顺序为___________________（填序号）。
(2)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射___________________。
(3)从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有__________；图中标号3为__________细胞，它将来可发育为胎膜和胚盘。
(4)动物的早期胚胎移植到同种且___________________与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是细胞膜具有___________功能。
(5)图1中胚胎移植的犊牛的性别为___________（雌性、雄性、不能确定），克隆羊多利的性状和_____（黑面绵羊\白面绵羊）最接近。