【推荐1】某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Amp^r或Tet^r中会导致相应的基因失活（Amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基启动子因）。有人将此质粒载体用BamH I酶切后，与用BamH I酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：

（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有_______________________（答出两点即可）。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。
（2）如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，________________的细胞是不能区分的，其原因是二者均不含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长。并且含有_______________________________的细胞也是不能区分的，其原因是__________________________。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有__________的固体培养基。
（3）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自_____________。（填噬菌体或受体细胞）

【推荐2】TALEN技术是一种靶向基因敲除技术，使用的基因敲除工具TALEN由人造TALE蛋白和FokⅠ(核酸内切酶)等组成。图1是TALE蛋白中的二联氨基酸(如NI、NG、NN、HD等，其中字母N、I、G、H、D分别代表一种氨基酸)与恒定识别DNA的四种碱基之间的对应关系，图2是TALEN技术的基本原理示意图，其中FokⅠ形成二聚体后才能切断DNA，导致DNA双链断裂，使基因被敲除。基因敲除基本步骤如下：

步骤1   TALE靶点识别模块构建   TALE的核酸识别单元中二联氨基酸NI识别A，NG识别T，HD识别C，NN识别G。因此设计相应TALE单元串联，使TALEN特异识别某靶点基因。
步骤2 获得完整的TALEN   将构建好的一对TALE靶点识别模块融合其他必要的序列，并与质粒构建基因表达载体(TALEN质粒对)。
步骤3 将TALEN质粒对转入细胞中实现目标基因敲除   将TALEN质粒对转入细胞后，其表达的蛋白可分别找到其DNA上的靶位点并与靶位点特异结合。FokI形成二聚体，发挥内切酶活性，于两个靶位点之间打断目标基因，诱发 DNA 损伤修复机制。由于在此修复过程中总是有一定的错误率存在，在修复中发生错误的个体即形成目标基因敲除突变体。
请回答：
（1）步骤1中，欲使TALEN特异识别靶点基因，需根据____构建一对TALE靶点识别模块。若图2中左侧TALE蛋白识别的基因部分序列为-GTC-，则对应的二联氨基酸序列应为____。
（2）步骤2中需要____的催化，要获得完整的TALEN，构建的基因表达载体中还需要融合____序列。
（3）步骤3中FokI二聚体作用的化学键是____。步骤3完成后可能获得多种DNA，可利用限制酶对相邻靶位点之间的相应片段进行切割，再根据切割后形成的DNA分子大小，运用____(技术)分离筛选出发生目标基因敲除的突变个体。
（4）科研人员使用TALEN技术对水稻光周期敏感蛋白基因P进行靶向敲除，以获得长日照条件下纯合光敏雄性不育新品种。已知水稻光周期敏感蛋白基因P只在花粉细胞中表达，使其能够合成淀粉。不含光周期敏感蛋白的水稻在长日照条件下表现为雄性不育，短日照条件下均为雄性可育。
①将TALEN技术处理得到的亲本水稻植株，种植在____日照条件下自交获得F₁。
②若要鉴定F₁是否为纯合光敏雄性不育新品种，可将F₁植株种植在____日照条件下，然后____，若未出现蓝色，则该植株为所需新品种。

【推荐3】医学上常使用抗生素治疗由细菌引起的疾病。图 1 中①～⑤分别表示不同种类抗生素抑制细菌的作用机制，其中②表示抗生素通过损伤细胞膜从而达到抑菌的作用。字母 a、b、c 表示遗传信息的传递过程；F、R 表示不同的结构，均携带了遗传信息。图 2 为某抗生素的具体作用机制示意图。请分析回答有关问题：

(1)图 1 中，将 1 个细菌的 F 用 ³²P 标记后，放在含³¹P 的培养液中连续分裂 3 次，则不含³²P 标记的细菌有______个；图中R 结构在基因工程中最关键的作用是______。
(2)据图分析，图 1 中①表示抗生素能够抑制细菌______的形成从而起到抑菌的 作用；③表示抗生素能够抑制细菌______从而起到抑菌的作用，图 1 中______（填 数字）的抑菌机制与图 2 所示的一致。
(3)图 1 的 a、b、c 过程中，需要解旋酶催化的过程是______。细菌在正常状态下， 图 2 中遗传信息的传递也会有所损失，其原因是______。
(4)人类滥用抗生素往往会导致细菌产生耐药性，下图 3 为菌群耐药性形成的示意图， 下列有关叙述错误的是______（多选）

A．抗生素使用之前，易感菌群中就存在耐药性个体

B．易感菌群中最初出现的耐药基因可能是突变或基因重组的结果

C．应用抗生素使种群的耐药基因频率增加，并通过有丝分裂完成世代传递

D．抗生素起到选择的作用，这种选择往往是定向的

(5)抗生素引起的不良反应比较常见，如过敏反应，请至少例举出一项有关过敏反应的常见特点______。

【推荐1】乙烯具有促进果实成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术（原理如图1），可以抑制这两个基因的表达，从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点，下图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。

(1)图2中的2A11为特异性启动子，已知该2A11应在番茄的果实中启动基因的转录。从该器官中提取________为模板，利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以进行拼接构成融合基因。
(2)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamH I和EcoR I的酶切位点，ACC合成酶基因两端含Kpn I和Sau3A I的酶切位点，这四种限制酶及其识别序列和切割位点如下图：

限制性核酸内切酶	识别序列和切割位点	限制性核酸内切酶	识别序列和切割位点
BamH I	G↓GATCC	Kpn I	GGTAC↓C
EcoR I	G↓AATTC	Sau3A I	↓GATC

先用限制酶________分别对ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因进行切割后，再将它们拼接成融合基因，相应的Ti质粒和融合基因均使用限制酶________进行切割，以确保融合基因能够插入载体中。载体上卡那霉素抗性基因的作用是________。
(3)为了获得耐运储存、宜储存的番茄，应将融合基因________（填“正向”或“反向”）插入启动子2A11的下游，原因是________，从而抑制乙烯的合成。在检测该融合基因是否整合到番茄植株的染色体DNA上时，________（填“能”或“不能”）用放射性物质标记的ACC合成酶基因片段做探针进行检测，理由是________。

【推荐2】“玉米夫人”芭芭拉·麦克林托克在玉米杂交实验中发现，使籽粒着色的基因在某一代“接上”或“拉断”，又在另一代的染色体上重新出现，科学界把这种基因称之为“跳跃基因”。“跳跃基因”是指能够进行自我复制，并能在生物染色体间移动的基因。回答下列问题：
(1)在基因工程中一般常用的运载体是____________________(至少答出两种)。而跳跃基因技术能够更有效地使引入动物细胞的基因进行稳定表达，为使跳跃基因在特定的时间和空间表达，构建的表达载体中需要有合适的______________________。
(2)进行PCR扩增，在反应体系加热到90～95℃时，跳跃基因双链间的__________打开；在退火的过程中需要一段______________________以便合成引物；延伸的过程中在____________酶的作用下形成________________键。
(3)HIV中含有这类跳跃基因，能将其复制并插入T细胞染色体上，使T细胞产生更多病毒颗粒，推测此过程可能涉及到的酶有________________(至少答出两种)。在进化过程中，许多动物形成了减少HIV跳跃基因移动的生理功能系统，这样的系统可以看成动物______________的一部分。

【推荐3】CEA 癌胚抗原是在1965年首先从结肠癌和胚胎组织中提取出的一种肿瘤相关抗原，是一种酸性糖蛋白。常用CEA 抗体检测血清中的CEA 含量，进行相关疾病的临床诊断。下图是CEA 单克隆抗体的制备流程示意图，请据图回答下列问题:

(1)制备重组质粒过程时，为确保目的基因与质粒准确连接，应采用图示中的_____________酶的切割位点。过程②常用____________法。
(2)诱导融合成为杂交瘤细胞时，常用的诱导方法有______________________（写出三种）。细胞培养过程中需要的气体条件是___________________。
(3)③表示________________过程，获得的C 细胞的特点是____________。
(4)应用获得的单克隆抗体搭载抗癌药物制成抗体—药物偶联物治疗癌症，具有的优点是________________________________。

【推荐1】紫花苜蓿是一种豆科双子叶植物，可作为优良的饲料与牧草。为获得耐盐性的紫花苜蓿，提高紫花苜蓿的适应性，并达到改良土壤的目的，可将来源于拟南芥的At基因导入紫花苜蓿中，经检测鉴定后获得了耐盐性的紫花苜蓿品系。请回答下列问题：
(1)获得目的基因后，可用PCR技术扩增，PCR的全称是______，该技术中起关键作用的酶是______。
(2)紫花苜蓿是双子叶植物，可用______法将目的基因导入受体细胞，Ti质粒上的______可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上。
(3)基因表达载体中除含有复制原点、启动子、目的基因外，还要有______。为检测目的基因是否成功导入受体细胞，可采用______技术，在______的DNA片段上用放射性同位素作标记，以此作为探针。
(4)耐盐性的紫花苜蓿是否培育成功，还要进行____________水平的鉴定，将转基因紫花苜蓿和野生型紫花苜蓿进行耐盐性试验，观察两组植物的生长状况。

【推荐2】下图为科学家利用比目鱼的抗冻基因培育转基因抗冻西红柿的过程示意图，据图回答下列问题：

(1)①过程中需要建立_____文库，建立该文库需要用到的酶是_____。与比目鱼体内的抗冻基因相比，从该文库中筛选出的抗冻基因缺少_____。
(2)②过程中构建重组质粒时，相关酶作用化学键是_____，重组质粒需要转移到农杆菌的_____上，才能进一步转移到西红柿细胞中。
(3)重组细胞经过③④培养后，最终可以得到转基因西红柿植株，这表明植物细胞具有发育的_____。
(4)经图示过程获得的抗冻西红柿还需要进行抗冻实验以确定转基因抗冻西红柿是否培育成功。请你设计实验对获得的抗冻西红柿植株进行检验，要求写出实验思路即可。_____

【推荐3】研究者培育出了转K基因的植株。图1、图2分别表示在该培育过程中构建的含K基因的DNA片段和Ti质粒。回答下列问题：

(1)图中启动子的作用是____，组成T-DNA的基本单位是____。为使K基因定向连接到质粒中，应选用的限制酶组合为____，不选用EcoRⅠ或NotⅠ的原因是____。
(2)引物的作用是____。扩增含K基因的DNA片段时，需要在PCR仪中加入的引物是____。
(3)培育转K基因植株的过程中， K基因导入植物细胞的方法是____法；由图可知，在培养该转基因植物时，为得到含K基因的愈伤组织，培养基中须加入____进行筛选。

【推荐1】研究发现，小鼠四倍体胚胎具有发育缺陷，只能发育成胎盘等胚胎以外的结构。干细胞中的ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。四倍体胚胎与ES细胞的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可得到ES小鼠。请回答下列问题：
(1)ES细胞中文名称是_____，在早期胚胎发育过程中，由其正常发育形成的囊胚中的_____细胞将发育成胎盘。
(2)体外培养ES细胞时，培养基除了含有所需要的各种营养物质之外，还需要满足的条件有_____（答出2点即可）。在培养过程中，贴壁生长的细胞会因_____（答出2点即可）等因素而导致分裂受阻。
(3)诱导四倍体胚胎细胞和ES细胞融合形成嵌合体，在体外培养的胚胎移植到受体子宫时，至少应选择发育到_____（阶段）并经检查合格后的胚胎。胚胎移植的优势是_____。

【推荐2】随着我国“全面二胎”政策的实施，一些高龄夫妇借助试管婴儿技术实现了自己的愿望，结合所学知识回答下列问题。
（1）哺乳动物的体外受精主要包括____________、_________和受精等几个主要步骤。
（2）受精后形成的受精卵要移入_______培养液中继续培养一段时间再移植到母体内，早期胚胎发育到_______阶段的某一时刻，会冲破____________，称之为“孵化”。
（3）为了及时检测受孕情况，科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，制出了早孕试纸。要获得该抗体，需要先将_____________注射到小鼠体内，培养一段时间之后，将从小鼠脾脏中提取出的浆细胞和小鼠的___________细胞融合，通过__________筛选，从而获得阳性克隆的杂交瘤细胞，并最终获得人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体。

【推荐3】下图为哺乳动物的生殖和个体发育过程，请据图回答下面的问题：

(1)哺乳动物的精子和卵细胞在__________中完成受精作用。
(2)哺乳动物个体发育的起点是____________，其胚胎发育的整个过程在____________中完成。
(3)图示Ⅰ过程为____________，图中“？”处应为____________，内细胞团出现于________时期。