1 . 长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：

   

(1)和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②卵细胞膜反应；③透明带反应；④穿越透明带；⑤精子入卵。其正确的顺序为___________________（填序号）。
(2)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射___________________。
(3)从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有__________；图中标号3为__________细胞，它将来可发育为胎膜和胚盘。
(4)动物的早期胚胎移植到同种且___________________与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是细胞膜具有___________功能。
(5)图1中胚胎移植的犊牛的性别为___________（雌性、雄性、不能确定），克隆羊多利的性状和_____（黑面绵羊\白面绵羊）最接近。

2 . I、中国科学家团队成功构建了世界首例人猴嵌合胚胎，即同时具有人和猴细胞来源的胚胎，为解决异种嵌合效率低下等问题提供新的思路，对器官再生研究具有指导意义。如图是嵌合胚胎培育的部分过程，回答下列问题：
   
(1)嵌合胚胎早期发育所依据的原理是_____。图中①为扩展潜能干细胞（EPSCs），其功能与胚胎干细胞相似，都具有_____性。培养EPSCs时，需要定期更换培养液，目的是_____
(2)图中②时期胚胎发育是在最外层的_____内进行的，沿其内壁扩展和排列的、个体较小的是_____细胞，它们将来发育成_____。
(3)研究嵌合胚胎的目的是培养与人类似的同种器官，以缓解器官移植供体不足的困境。目前器官移植中的最大技术难题是_____。
(4)研究人员将图中嵌合胚胎在体外进行培养时，科研人员观察到了嵌合现象，但科研人员并未进行体内胚胎移植实验，这是为了规避人们最担心的类似于克隆人的_____问题。
Ⅱ、回答关于PCR技术的相关问题
(5)为确保检测的准确性，在设计PCR引物时必须注意：用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸，过短会导致_____，过长则会使反应体系有关步骤温度提高，从而超过_____酶的最适温度；引物3'端的碱基最佳选择是_____（填“G和C或“A和T），这样形成的碱基配对比较稳定，引物的“_____”端（用5'或3'作答），可以被修饰，如附加限制酶位点等；PCR时一般需要加入4种脱氧核苷三磷酸（dNTP）而不是脱氧核苷酸，其原因是在子链延伸过程中dNTP提供_____ ；连续扩增5次后需要引物至少_____ 个。

3 . 和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。请回答下列问题：
   
(1)用_________________激素处理，可使供体母牛超数排卵，过程①中产生的精子要进行_________________处理后才具有与卵细胞受精的能力。在实际胚胎工程操作中常以_________________作为受精的标志。
(2)上图移植的胚胎处于_________________期。
(3)为提高胚胎利用效率，尽快获得数量较多的子代和牛，使用的技术称为_________________。

4 . 荷斯坦牛被认为是世界上产奶量最高的牛，平均每头荷斯坦奶牛每年产奶量超过9500升。荷斯坦牛不仅产奶量高，牛奶的质量也非常高。牛的自然繁殖率比较低，如图表示科研人员利用胚胎工程培育荷斯坦奶牛的过程示意图。请回答下列问题。
   
(1)图中①过程常使用促性腺激素，但不使用性激素，原因是___________。
(2)进行人工授精时，从荷斯坦公牛体内获得的精子不能直接与成熟的卵子完成受精作用，原因是___________。为了检查受精卵的受精状况和发育能力，需将受精卵移入___________培养液中进行培养。
(3)对胚胎的性别进行鉴定时，常取囊胚的___________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞进行DNA分析。滋养层最终会发育成___________。内细胞团细胞属于胚胎干细胞，该细胞在形态上的特点是___________。
(4)图中④过程用到的生物技术为___________。荷斯坦牛的胚胎能在本地母牛的子宫内存活，其生理学基础是___________。

5 . 人凝血酶Ⅲ是一种分泌蛋白，可预防和治疗急、慢性血栓。为高效生产人凝血酶Ⅲ，某兴趣小组提出了两种方法，如图所示。回答下列问题：
   
(1)方法一中，一般选择_________法将获取的人凝血酶Ⅲ基因导入受精卵中，培养获得早期胚胎可在囊胚时期，取用部分_________细胞做性别鉴定，选取__________（填“雌性”、“雄性”或“雌性和雄性”）胚胎以用于后续培养并生产人凝血酶Ⅲ。
(2)早期胚胎能够在受体奶牛体内存活并发育，其免疫学基础是____________。
(3)方法二通过基因工程生产人凝血酶Ⅲ，该方法的核心步骤是______________。该方法选择大肠杆菌作为受体细胞，是因为大肠杆菌具有___________（答出2点）等特点。
(4)小组成员中有人对方法二提出疑问，他认为：将重组DNA导入大肠杆菌后，不能获得活性高的人凝血酶Ⅲ。其依据是_________。

7 . 细胞介素简称白介素，白介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T细胞和B细胞活化，增殖与分化及炎症反应中起重要作用。利用基因工程技术，可以让哺乳动物批量生产白介素。制备乳腺生物反应器生产白介素的过程图如图3所示。回答下列问题：

(1)可使用_____技术扩增白介素基因。已知DNA复制时，子代核苷酸链只能从引物的3'端延伸，则利用上述技术扩增白介素基因时，应选择图2中的_____（填字母）单链核苷酸序列作为引物。
(2)在构建重组质粒时，只选用BclⅠ切割白介素基因和质粒有何弊端？_____。
(3)可使用含有_____的培养基筛选导入了重组质粒的受精卵。受精卵发育到囊胚阶段时，细胞逐渐分化，将来发育成胎儿的各种组织的是_____，将来发育成胎膜和胎盘的是_____。

8 . 一对表现型正常的夫妇，生了一个β地中海贫血症患儿。在他们欲生育第二胎时，发现妻子的双侧输卵管完全堵塞，不能完成体内受精。医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断（基因检测位点HBB），最终喜获一健康女婴。回答下列问题：
(1)体外受精主要包括____________、___________、受精等主要步骤。
(2)形成的受精卵在卵裂过程中胚胎总体积_____________（填“增大”“缩小”或“不增加或略有缩小”），原因是___________。
(3)通常采用β地中海贫血症诊断的金标准——Southern技术进行产前基因诊断，该技术用已知核苷酸片段加以标记作为探针，通过分子杂交来检测待测样品中是否存在互补的核酸序列。临床检验证明该技术是有效的，且具有稳定性强、检测率高、检测准确等优点。
①基因诊断的主要原理是___________。
②医生采用Southern技术对胎儿进行了准确的基因检测，让该夫妇最终喜获健康女婴。检测基因的思路是____________。