4 . 回答下列（一）、（二）小题：
（一）葡萄是常见的生活水果，也是工业化生产饮品的重要原材之一。葡萄皮中含有单宁、红色素及香味物质等重要成分，可以提高葡萄酒的醇厚感和香味，但葡萄梗中的单宁常带刺鼻气味，会影响葡萄酒的品质。利用发酵好的葡萄酒还可以进一步生产葡萄醋。回答下列葡萄饮品生产相关问题：
(1)葡萄汁在多酚氧化酶的作用下很容易出现褐化现象，工业化生产中在榨汁之前会对葡萄进行加热预处理。一方面，加热可以____________，避免褐化现象发生；另一方面，加热也能够破坏_____________结构，促进水溶性色素的释放。但加热处理会使____________酶失去活性，降低出汁率和澄清度，因此在榨汁时需补充加入该酶。
(2)工业化生产葡萄酒以葡萄汁为发酵原料，在榨汁过程中必须破皮挤出葡萄果肉，让葡萄汁和葡萄皮接触，以便_____________溶解到葡萄汁中，从而提高葡萄酒的品质。可溶性糖的含量也是衡量葡萄酒品质的重要指标，若所选的葡萄品种含糖量不高，可通过向葡萄汁中_____________以提高葡萄酒的酒精浓度和含糖量。
(3)生产葡萄醋时为选择高产、耐乙醇的醋杆菌菌种时，可将醋杆菌用______________法接种在以乙醇为唯一碳源的固体培养基上。除发酵环境条件外，影响葡萄酒及葡萄醋口感的因素有____________等（答出2点即可）。
（二）人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种对预防和治疗急性心肌梗塞等血栓性疾病有良好效果的糖蛋白。某科研机构培育出了含htPA基因的转基因羊，并从羊乳中成功获得了大量的htPA。其培育流程如下图所示：

请回答：
(4)在基因工程中，可通过多种不同途径来获取htPA基因：例如可以通过建立含htPA基因在内的____________，然后利用核酸探针，通过____________技术钓取htPA基因；也可以让htPA基因进行表达，然后利用_____________作为探针，通过抗原一抗体杂交技术，找出能与探针特异性结合的表达产物，进而获得htPA基因。
(5)在构建重组质粒时，需要用到的酶是_____________，通常会用到两种不同的酶对目的基因和质粒进行酶切处理，目的是____________。
(6)为获取更多的卵细胞，通常需对供体母羊进行_____________处理。体外培养成熟的卵细胞与经_____________处理的精子完成受精作用。在胚胎移植前_____________（需要/不需要）对胚胎进行性别鉴定。

10 . 心肌长期负荷过重引起的心肌细胞肥大、间质纤维化等过程称为心脏重塑，与基因Snhg5相关。Snhg5转录出的RNA并不翻译产生蛋白质，而是以RNA的形式发挥调节作用。研究人员利用转基因技术建立了心肌细胞特异性Snhg5转基因小鼠。
(1)Snhg5转录所需的原料是______。
(2)PCR是一项模拟细胞内DNA复制过程的DNA体外扩增技术，是获取目的基因的主要方法。以下说法正确的是______。

A．PCR过程需提供DNA模板	B．PCR过程中新链的合成只能从5’→3’
C．PCR过程需打开磷酸二酯键	D．可以利用PCR技术进行Snhg5扩增

(3)通过PCR获得的目的基因Snhg5和质粒能用相应的酶切割、连接形成重组质粒（图1）。研究人员在构建重组质粒时得到6株可能含有重组质粒的大肠杆菌，分别提取各菌株中的质粒，使用限制性内切核酸酶SalⅠ和HindⅢ切割后，经DNA凝胶电泳技术检测得到结果如图2所示，其中含有重组质粒的菌株编号是______。（编号选填）

(4)根据图1，为获得a-MHC-Snhg5-hGH转基因片段，研究人员应使用限制性内切核酸酶______切割Snhg5重组质粒。（编号选填）
①KpnⅠ       ②SalⅠ       ③HindⅢ       ④SmaⅠ       ⑤SacⅡ
(5)将a-MHC-Snhg5-hGH片段导入小鼠受精卵中可以构建a-MHC-Snhg5-hGH转基因小鼠。结合题干信息，以下说法合理的是______。

A．可以使用激素使雌鼠超数排卵

B．可以用显微注射法将a-MHC-Snhg5-hGH片段导入小鼠受精卵中

C．转基因小鼠可以成功表达出Snhg5蛋白

D．一般需要多次杂交才可以获得纯合的转基因小鼠

(6)为研究转基因小鼠在异丙肾上腺素刺激下是否更容易发生心脏重塑，研究人员进行实验，结果如图3所示。请结合数据得出结论，并阐述分析过程______。