12. 嗜热土壤微生物A菌能产生一种具有耐热性能的纤维素酶(简称“B酶”),为使大肠杆菌具备降解纤维素的能力,更好的用于生产实践,开展相关实验研究。回答下列问题:
(1)为获取B酶基因,除PCR扩增外;常用的方法还有
_________(回答2点)。
(2)利用PCR扩增B酶基因依据的原理是
__________。
(3)上图为质粒限制酶酶切图谱,而B酶基因不含图中限制酶的识别序列。为使PCR扩增的B酶基因重组进该质粒,扩增的B酶基因两端需分别引入
_________不同限制酶的识别序列。
(4)转基因大肠杆菌成功获得了降解纤维素的能力,研究人员通过
_________的方法来确定转基因大肠杆菌细胞内产生了B酶。进一步研究发现,与B酶相比,转基因大肠杆菌降解纤维素的效率较低,试分析可能的原因是
_________(回答2点)。
(5)本研究成功应用于新农村建设中的秸秆处理,与传统秸秆焚烧相比,其优点有
__________(回答2点)。