回答下列（一）、（二）小题：（一）回答与柑橘加工与再利用有关的问题：（1）柑橘果实经挤压获得果汁后，需用果胶酶处理，主要目的是提高果汁的_________

题型：非选择题-解答题难度：0.4 引用次数：2974 题号：10523924

回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与柑橘加工与再利用有关的问题：
（1）柑橘果实经挤压获得果汁后，需用果胶酶处理，主要目的是提高果汁的__________。为确定果胶酶的处理效果，对分别加入不同浓度果胶酶的果汁样品，可采用3种方法进行实验：①取各处理样品，添加相同体积的__________，沉淀生成量较少的处理效果好。②对不同处理进行离心，用比色计对上清液进行测定，OD值__________的处理效果好。③对不同处理进行__________，记录相同体积果汁通过的时间，时间较短的处理效果好。
（2）加工后的柑橘残渣含有抑菌作用的香精油及较多的果胶等。为筛选生长不被香精油抑制且能高效利用果胶的细菌，从腐烂残渣中分离得到若干菌株，分别用无菌水配制成__________，再均匀涂布在LB固体培养基上。配制适宜浓度的香精油，浸润大小适宜并已__________的圆形滤纸片若干，再贴在上述培养基上。培养一段时间后，测量滤纸片周围抑制菌体生长形成的透明圈的直径大小。从直径__________的菌株中取菌接种到含有适量果胶的液体培养基试管中培养，若有果胶酶产生，摇晃试管并观察，与接种前相比，液体培养基的__________下降。
（二）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
（1）天然农杆菌的Ti质粒上存在着一段DNA片段（T-DNA），该片段可转移并整合到植物细胞染色体上。为便于转基因植物在组织培养阶段的筛选，设计重组Ti质粒时，应考虑T-DNA中要有可表达的目的基因，还需要有可表达的__________。
（2）结合植物克隆技术进行转基因实验，为获得转基因植株，农杆菌侵染的宿主一般要选用具有优良性状、较高的遗传稳定性、__________及易被农杆菌侵染等特点的植物材料。若植物材料对农杆菌不敏感，则可用__________的转基因方法。
（3）利用带侧芽的茎段获得丛状苗的过程与利用茎段诱导产生愈伤组织再获得丛状苗的过程相比，前者总培养时间__________，且不经历__________过程，因而其遗传性状稳定，是大多数植物快速繁殖的常用方法。
（4）与发芽培养基相比，配制转基因丛状苗生根培养基时，可根据实际情况适当添加__________，促进丛状苗基部细胞分裂形成愈伤组织并进一步分化形成__________，最终形成根。还可通过改变MS培养基促进生根，如_____（A．提高蔗糖浓度B．降低培养基浓度C．提高大量元素浓度D．不添加琼脂）。

2020·浙江·高考真题查看更多[3]

更新时间：2020-07-11 11:09:10 |

纠错收藏下载加入试卷

【知识点】其他微生物的分离与计数解读果胶酶的组成和作用植物组织培养技术综合解读基因工程的操作程序综合

相似题推荐

非选择题-解答题 | 较难 (0.4)

解题方法

发酵工程的基本环节结合实例考查微生物的选择培养和计数

【推荐1】聚羟基丁酸酯（PHB）是某些细菌在碳源充足、氮源缺乏状态下产生的一类颗粒状、可作为细菌体内碳源和能量储备物的高分子化合物，能被苏丹染料染色，可溶于氯仿。PHB具有生物可降解性和生物相容性，用于可降解包装材料及医药行业。天然菌中的PHB产量较低，对天然菌进行诱变和筛选可得到高产PHB合成菌。请回答下列问题。
(1)PHB合成菌的分离培养基的成分有水、葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、NaCl和__________，其中能提供维生素的有__________，为使PHB合成菌细胞内积聚更多PHB，该培养基成分配比的特点是__________。
(2)将等浓度土壤稀释液接种在PHB分离培养基上后，甲组用紫外线照射，乙组不作处理。倒置培养一段时间后，发现甲组的菌落数少于乙组，原因是___________，倒置培养有利于__________。通过显微观察法初筛PHB合成菌的具体操作是在培养基中加入__________，然后在显微镜下观察，有较多橘黄色颗粒的细菌即为PHB合成菌。复筛时需要提取胞体内的PHB，将细胞破碎后用__________来萃取PHB，从而提取细胞内的PHB。
(3)对复筛得到的A~E五个菌株单独培养，检测PHB产量，结果如下图。A~E菌株中适于作工程菌的是菌株__________，依据是___________、___________。

(4)在发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。连续发酵生产PHB时，要随时检测培养液中PHB合成菌的数量、__________等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制__________和溶解氧等发酵条件。

2024-03-30更新 | 156次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷

非选择题-解答题 | 较难 (0.4)

【推荐2】阿拉伯胶是一种多糖，也称阿拉伯树胶，是一种产于非洲撒哈拉沙漠以南的半沙漠带的天然植物胶，主要包括有树胶醛糖、半乳糖、葡萄糖醛酸等。在食品、医药、化妆品及其他工业上有广泛的应用。其水溶液易被细菌、真菌或酶降解。为研究自然界中微生物对阿拉伯胶的降解作用，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的“M”菌。
请回答下列问题：
（1）某同学将初筛菌液接种在固体培养基上，其中一个平板经培养后的菌落分布如下图所示。该同学采用的接种方法是___________；从结果推测该同学接种时可能出现的失误是：_____________________。

（2）观察发现：“M菌的菌落为粉白色，菌落初期呈突起絮状。在显微镜下观察到：菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm。可断定“M”菌为___________（填“细菌”或“真菌”），判断依据是：______________________。
（3）分离该阿拉伯胶降解酶可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的___________以及分子本身的大小、形状的不同，使之在电场中的___________不同而实现分离。
（4）下表中培养液pH均为6．0，若对“M”中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的______培养液，不选用的其他培养液的原因分别是：______________________。

实验用培养液配方
培养液	阿拉伯胶	阿拉伯胶酶	NaNO₃	牛肉膏	K₂HPO₄	MgSO₄·7H₂O	KC1	FeSO₄·7H₂O
A	25g/L	一	—	—	lg/L	lg/L	0．5g/L	0．01g/L
B	25g/L	1μg/L	一	3g/L	1g/L	1g/L	0．5g/L	0．01g/L
C	一	—	3 g/L	—	1g/L	lg/L	0．5g/L	0．01g/L
D	25g/L	—	3 g/L	一	1g/L	1g/L	0．5g/L	0．01g/L

2020-06-08更新 | 480次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷

非选择题-解答题 | 较难 (0.4)

名校

解题方法

基因工程的基本操作程序分析 PCR技术的基本操作和应用分析

【推荐3】糖化酶是将淀粉转化为葡萄糖的酶，大部分野生酵母菌因缺乏糖化酶基因而不能直接利用淀粉。研究人员将经诱变处理后获取的黑曲霉菌高产糖化酶基因导入毕赤酵母GS115（对氨苄青霉素不敏感）中，构建能直接利用淀粉的工程菌，该过程所用质粒（仅示部分结构）如图1所示。三种限制酶的识别序列及切割位点见表，请回答下列问题。

限制酶	BamHI	PstI	XbaI
识别序列和切割位点（5’→3’）	G^↓GATCC	C^↓TGCAG	T^↓CTAGA

(1)为获得糖化酶高产菌株，研究人员将经诱变处理后的黑曲霉菌接种到_______含量高的培养基上，恒温培养适宜时间后滴加碘液，挑选出透明圈（不产生蓝色）直径________（填“较大”或“较小”）的菌株。再进行复筛以及稳定性遗传实验。
(2)构建高产糖化酶基因表达载体时，用限制酶切割质粒pPIC9K，图2是高产糖化酶基因示意图（仅示部分碱基），为使其能定向插入表达载体并成功表达，应在引物的__________（5'或3'）端添加__________酶识别序列，则PCR扩增时引物的碱基序列应为下列①-⑥中的_________。若扩增4次，不同时含两种引物的DNA分子有_______个。

(3)将筛选出的菌株接种至发酵罐内进行扩增，在接种环节要对培养基和发酵设备进行严格灭菌以防止杂菌污染的原因是_________（答出一点即可）。培养过程中可定期取样并常用_______（仪器名称）对菌体进行直接计数，以评估增殖情况。如发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束后采用_______（答出1项即可）等方法获得所需的发酵产品。

2024-04-28更新 | 306次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷

非选择题-实验题 | 较难 (0.4)

【推荐1】随着生物科学的发展，酶已经走出实验室，进入人们的生产和生活，根据下列相关酶的叙述和应用，回答有关问题：

（1）食品种类多，酸碱度范围广，生物兴趣小组拟探究在食品生产中应用范围较广的蛋白质，查阅相关文献，得知：pH对不同蛋白酶的活力影响有差异，据图一可知，______更适宜作为食品添加剂，理由是______。蛋白酶的活力可用______的量来表示。工业生产木瓜汁时，常常利用果胶酶能将细胞壁中主要成分分解为_________________来破除细胞壁以提高出汁率。
（2）图二是表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图三是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图，据图回答：
①图二中X溶液为________，其作用是使________。
②图三发酵过程中搅拌的目的是_______。
③用海藻酸钠包埋酵母菌形成凝胶珠的过程中，加热溶解海藻酸钠时需注意______加热。溶化好的海藻酸钠溶液应_________后，再与已活化的酵母细胞充分混合。如果海藻酸钠溶液浓度过低，会导致_________，使固定效果大大降低。

2019-04-08更新 | 541次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷

非选择题-实验题 | 较难 (0.4)

名校

【推荐2】果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁更容易，也使得浑浊的果汁变得澄清。回答下列问题：
(1)果胶是由______聚合而成的一种高分子化合物，不溶于水。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、__________________等。
(2)有同学做了以下实验：
①用搅拌器制苹果泥；②取6个烧杯编号1、2、3、4、5、6，依次注入适量30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃的水，恒温水浴；③每一烧杯中放入分别装有等量苹果泥和果胶酶的试管，保温3min；④向每组烧杯的苹果泥中加入相应的等量果胶酶，振荡试管，反应一段时间；⑤过滤，比较获得苹果汁的体积。
a.此实验的实验目的是____________________________________________。
b.该实验____________（填“是”或“否”）需要一组果汁和蒸馏水相混合的对照实验。
c．若继续探究pH值对果胶酶活性的影响，则实验过程中的自变量是________，其中无关变量有__________________________(列举三条)等因素。
(3)由霉菌发酵生产的果胶酶是食品加工业中使用量较大的酶制剂之一，可通过固定化霉菌细胞生产果胶酶。固定化细胞技术一般采用包埋法固定化，原因是__________。

2019-04-04更新 | 1148次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷

非选择题-实验题 | 较难 (0.4)

【推荐3】草莓汁酸甜适口，深受大众喜爱，加工草莓汁时，草莓中的果胶易导致果汁浑浊，影响品质，为探究制作果汁的最佳条件，研究人员进行了实验，结果如下表所示。

组别	果胶酶用(mL/kg)	pH	温度(℃)	草莓汁透光(％)
1	0.025	2.5	35	24.55
2	0.035	4.5	35	96.47
3	0.035	2.5	45	22.70
4	0.045	3.5	35	96.47
5	0.045	2.5	55	13.12

请回答：
（1）草莓细胞中，去掉果胶，会使植物组织变得松散，这是因为果胶具有______________的作用。果胶酶通过_______________作用促进果胶的水解反应，使草莓细胞彼此容易分开。
（2）生产过程中，既可获得澄清度高的草莓汁，又可减少酶的用量，降低成本的条件组合是第_______组。为测定该组条件下处理后的草莓汁中是否还有果胶，可取一定量的草莓汁与等量的_______________混合。
（3）果胶酶可从某些微生物如______________中提取，为提高生产效率，可将此酶固定在适宜介质上制成___________________。
（4）在合适条件下，将果胶酶与海藻酸钠混合后，滴加到一定浓度的钙离子溶液中，使液滴形成凝胶固体小球。该过程是对酶进行__________。
A．吸附 B．包埋 C．装柱 D．洗涤

2017-09-20更新 | 503次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷

非选择题-解答题 | 较难 (0.4)

名校

【推荐1】如图为培育含β-胡萝卜素“黄金大米”的简单方案．请回答下列问题：

（1）方案中，β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是 ______ ．若研究人员已知β-胡萝卜素基因序列，可采用 ______ 方法获得β-胡萝卜素基因。
（2）水稻细胞通过③培育成转基因植株，采用的技术手段是 ______ ，该技术的两个核心过程是______ 、 ______。
（3）要制备人工种子，要在③步骤选取具有生根、发芽能力的 ______ 结构，包裹上人工种皮即可。

2017-06-28更新 | 117次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷

非选择题-解答题 | 较难 (0.4)

名校

【推荐2】下面是口蹄疫疫苗生产过程示意图，请据图回答下列问题：

(1)首先从口蹄疫病毒中提取部分合成病毒蛋白的RNA，而不是用口蹄疫病毒的全部RNA，原因是合成病毒蛋白的RNA控制合成的病毒蛋白质，具有__________________特性，又不会使动物致病。以合成病毒蛋白的RNA产生病毒蛋白的DNA，需用到的工具酶是______________________________________。
(2)构建基因表达载体所需要的工具酶是________________。基因表达载体除目的基因外，还应包括________________________。
(3)导入大肠杆菌前需先将大肠杆菌处理为________细胞。
(4)为检测目的基因是否导入受体细胞，常常要借助载体上________的表达，更准确的方法是利用放射性同位素标记的________作探针与基因组DNA杂交。最后还要检测目的基因是否翻译成了病毒蛋白质，利用的技术是______________。

2017-04-15更新 | 284次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷

非选择题-解答题 | 较难 (0.4)

【推荐3】近日，中国农业科学院深圳农业基因组研究所黄三文团队用马铃薯二倍体替代四倍体育种，用杂交种子替代薯块繁殖。这一研究成果，突破了百年来马铃薯育种的难题，为马铃薯杂交育种提供了全新的技术体系。请回答以下问题：
(1)目前大田种植的马铃薯一般为四倍体，依靠薯块无性繁殖。该繁殖方法的优点是_____；缺点是通过块茎进行无性繁殖的做法，使得它所积累的病毒难以去除，科学家们发明了脱毒技术，即选用_______，经脱分化与再分化形成脱毒苗来保障生产。但不论是块茎繁殖，还是脱毒技术，都会造成马铃薯生产成本的提高。
(2)2021年6月，该研究团队已培育出二倍体自交系和杂交优势显著的杂交马铃薯品系“优薯1号”。“优薯1号”的培育成功，基因编辑技术功不可没。自然界存在的二倍体马铃薯往往是自交不亲和的，使得它不能产生种子。下图是科学家用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点敲除二倍体马铃薯的自交不亲和基因的示意图。

其原理是由一条单链向导RNA引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割。
①Cas9和向导RNA结合形成的复合物能切割DNA，从功能上来看，其相当于基因工程中的____________酶；CRISPR/Cas9系统广泛存在于细菌中，推测该系统在细菌中的作用是______________。
②很显然向导RNA的设计非常关键。其中的识别序列必须根据________来设计，并通过________________的方式与目标位置结合，从而引导与其结合的Cas9蛋白对目标位置基因行使切割（㪣除）功能；
③通过基因编辑技术对该基因进行编辑后需要检测其作用效果，简便的方法是___________ 。

2021-11-20更新 | 788次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷

非选择题-解答题 | 较难 (0.4)

解题方法

基因工程的基本操作程序分析结合实例考查基因工程的应用

【推荐1】乳糖不耐受是机体乳糖酶分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹泻。科学家采用基因工程技术将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大降低，用到的质粒和目的基因的部分结构如图1和图2所示，不同限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：

名称	识别序列及切割位点
Hind Ⅲ	A↓AGCTT
Sma I	CCC↓GGG
Kpn I	GGTAC↓C
Sal I	G↓TCGAC
Nhe I	G↓CTAGC

(1)用Sma Ⅰ切割图1质粒后，______（填“能”或“不能”）用E.coli DNA连接酶再将其连接起来。在构建基因表达载体时，与用一种限制酶切割相比，用酶切后可以形成不同末端的两种限制酶同时切割目的基因和质粒的优点是________________________。
(2)为了将图2中的目的基因准确插入到图1质粒中，需要在肠乳糖酶基因的两端分别添加____________（填限制酶）的识别序列。为保证肠乳糖酶基因的正确复制和与质粒的正确连接，在设计PCR引物时，应在与

链结合的引物的______（填“3′”或“5′”）端添加____________（填限制酶）的识别序列。根据图2信息，写出该引物的部分序列：5′-________________________-3′（写出15个碱基即可）。
(3)在基因表达载体中，肠乳糖酶基因应该位于启动子和______之间。将含有肠乳糖酶基因的表达载体导入受体细胞，然后利用胚胎工程培育成个体，采用分子杂交技术检测肠乳糖酶基因在转基因个体中是否转录出mRNA的大致思路为____________________________________。

2024-04-07更新 | 248次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷

非选择题-解答题 | 较难 (0.4)

【推荐2】将PV病毒外壳蛋白基因（PVY—CP）导入马铃薯，并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯。图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作，PVY—CP可以从质粒A中获取；质粒B是选用的运载体，另已知部分限制酶识别序列和切割位点：

BamH I

HindⅢ

BglⅡ

SmaⅠ

G↓ GATCC

CCTAG↑G

A↓ AGCTT

TTCGA↑A

A↓ GATCT

TCTAG↑A

CCC↓GGG

GGG↑CCC

请结合图像，运用所学知识回答问题：
（1）含有PVY—CP的质粒A保存在某细菌群体中，各个细菌含有相关不同的基因，这样的细菌群体称为_____________________________。
（2）PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为__________________________。

（3）关于步骤②中 Klenow酶的猜测，合理的有____________。
A．降低化学反应的活化能
B．可以将DNA片段的黏性末端变成平末端
C．能催化DNA链的合成
D．与DNA连接酶的功能相同
（4）步骤④中应该使用的限制酶是_________________________。
（5）利用农杆菌转化法进行转化，首先需要将质粒C导入____________中，进而转化马铃薯，一般情况下，不能直接用未处理的农杆菌菌作为受体细胞，原因是__________________________________。

2021-05-02更新 | 250次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷

非选择题-解答题 | 较难 (0.4)

【推荐3】回答下列（一）、（二）两个小题：
（一）回答微生物的培养和分离有关问题：
（1）某生物兴趣小组想对一坛泡菜进行乳酸菌计数：
①首先在无菌条件下取适量泡菜汁样品液待用；
②配制MRS培养基（适于乳酸菌生长的培养基），其中琼脂含量为0．3%～0．4%，从物理性质角度来看，该培养基属于________培养基。取100ml培养基装在250ml三角瓶中灭菌后备用。
③待培养基冷却至“适当温度”时，用10ml无菌吸管在每支无菌试管中灌9ml，然后放入“适当温度”的水浴中保温待用。此处的两个“适当温度”均约为__________。
A．25℃～30℃ B．35℃～40℃ C．45℃～50℃ D．60℃左右
④梯度稀释：用无菌吸管吸取1ml泡菜样品液至其中一支装有9mlMRS培养基试管中，再用_______（同一支吸管、另一支吸管）上下轻搅3～5次使充分混匀。轻搅的目的是防止_______。然后吸1ml至下一支试管中，如此逐级稀释至10^－⁴～10^－⁷为止。每个稀释度做3份重复。
⑤恒温培养：待稀释均匀后，各稀释度的试管垂直放在试管架上，置于37℃恒温培养24小时左右。
⑥观察和计数：经过培养后，在高层培养基试管内形成许多_________状的菌落，数出各试管中形成的乳酸菌的菌落数目，选择菌落分离度较好和数目合适的稀释度进行计数。假设稀释度为10^－⁵试管中形成的菌落数平均为90个，则该泡菜样品液中含乳酸菌_________个/ml。
（2）思考：本实验不采用涂布分离进行计数的最可能原因是_________。如果采用划线分离的方法分离微生物，按照划线先后顺序依次划A、B、C、D四个划线区，则四个划线区面积大小顺序应该是________（用“＜”连接）。
（二）植物被野生型农杆菌感染后会产生瘤状结构（类似愈伤组织），主要原因是农杆菌的Ti质粒中含有生长素合成基因（A）、细胞分裂素合成基因（B）和冠瘿碱合成基因（C）。已知T－DNA上的基因在农杆菌中不表达，在植物细胞中可以表达。冠瘿碱是农杆菌生命活动必需的有机物质。黄萎病是危害棉花种植的常见疾病，科学家通过基因工程技术将抗黄萎病基因导入棉花，获得抗黄萎病棉花。下图为农杆菌Ti质粒的T－DNA区段结构示意图，据图回答问题：

（1）获得碱基序列未知的抗黄萎病基因，可通过____________方法。构建重组Ti质粒时，需要用两种不同的限制酶切割目的基因和Ti质粒，目的是__________。
（2）为防止农杆菌侵染植物细胞时大量繁殖，导致植物细胞死亡，抗黄萎病基因必须把T—DNA片段上的基因__________（用字母表示）替换掉。取CaCl₂处理过的农杆菌与重组质粒在离心管内，加入液体培养基，并置于摇床上__________振荡培养一段时间，从而完成转化实验。
（3）若棉花体细胞对农杆菌不敏感，还可以采用____________法，将目的基因导入受体细胞的细胞核。通常将重组细胞直接接种在适宜的培养基上进行组织培养，该培养基以MS培养基为基础，还需要加入适当种类和比例的植物生长调节剂、琼脂、水和____________。丛状苗分株培养后，为促使其生根，可通过____________无机物的浓度实现。

2021-05-07更新 | 534次组卷

相似题纠错收藏详情加入试卷