菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志,也可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对送检样品进行卫生学评估提供证据。下图是某样品培养简化流程图,请分析回答下列问题:
(1)该营养琼脂培养基配制过程中,其基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、______________ 法灭菌等。然后将培养基放入47 ℃水浴锅保温,选择此温度的理由是_______________________ 。
(2)实验过程中须将样品剪碎并使用均质器10000 r·min-1处理1 min,其目的是________________ 。从水浴锅取出营养琼脂培养基倒平板适量,稍冷却后移液0.2mL样品于培养皿进行涂布,涂布时可_____________ ,使涂布更均匀。
(3)本实验用菌落计数的原理是基于_______________________________ ,运用这种方法统计的结果往往较实际值偏_______ 。具体培养结果如下表。选取菌落数30~300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释梯度的平均菌落数符合此范围,以该培养皿菌落数×稀释倍数报告。当有两个梯度菌落值在30~300之间,报告结果由二者菌落数比值决定,若比值不大于2,则取平均数,且菌落数大于100取两位有效数字,两位之后的数值四舍五入;若比值大于2,则报告稀释度较低(稀释次数越多,稀释度越高)的培养皿菌落数。请填写例次3中“?”处的菌落总数为__________ 。
(4)利用鲜奶进行工业生产酸奶时,不能使用____________ 污染的鲜奶为原料,否则会使乳酸菌生长受到限制;利用___________ 法可以除去鲜奶中的白细胞、杂菌和其他肉眼可见的异物,取其上清液用于发酵制酸奶。
(5)密封良好的泡菜坛内有时会长一层白膜,这些白膜是_____________ (选填“乳酸菌”或“酵母菌”)繁殖产生的。在泡菜腌制过程中坛、蔬菜等均未进行严格灭菌,而在发酵过程中一般不会出现其他杂菌大量繁殖,其原因是__________ 。
①发酵的原料中缺乏杂菌生长需要的各种营养物质
②发酵过程的温度不适合杂菌的生长
③乳酸菌产生较多乳酸,许多需氧菌被杀死
④在自然界中乳酸菌占优势
(1)该营养琼脂培养基配制过程中,其基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、
(2)实验过程中须将样品剪碎并使用均质器10000 r·min-1处理1 min,其目的是
(3)本实验用菌落计数的原理是基于
例次 | 不同稀释度平均菌落数 | 两稀释度菌 落数之比 | 菌落总数 /[CFU/mL(g)] | ||
10-1 | 10-2 | 10-3 | |||
1 | 1365 | 164 | 20 | — | 16400 |
2 | 2760 | 295 | 46 | 1.6 | 38000 |
3 | 2890 | 271 | 60 | 2.2 | ? |
(5)密封良好的泡菜坛内有时会长一层白膜,这些白膜是
①发酵的原料中缺乏杂菌生长需要的各种营养物质
②发酵过程的温度不适合杂菌的生长
③乳酸菌产生较多乳酸,许多需氧菌被杀死
④在自然界中乳酸菌占优势
更新时间:2021-01-14 11:34:22
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解题方法
【推荐1】商业酵母发酵的谷物制品口感和风味开始呈现趋同化,而传统老面酵母特殊的发酵环境可能会释放出更多的风味化合物和调味物质,赋予谷物更加浓郁的风味。为此,研究者设计了如图所示的实验,以期获得优质酵母菌(注:Ⅰ~Ⅲ表示划线的顺序)。回答下列问题:(1)在实验前需制备培养基A和培养基B,制备的基本步骤是____ ;两种培养基在实验中的用途不同,但是均可获得纯培养物一单菌落,菌落是指____ ;从培养基A上挑取菌落的依据是____ ;培养基B在____ 区可能获得目标菌株的单菌落。
(2)为探究不同传统老面中酵母菌菌种的差异,需用生理盐水分别对____ 进行稀释,使用的生理盐水必须用____ 法进行处理,以防止杂菌污染。
(3)可用糯米酒制作实验对实验获得的酵母菌进行综合评价,其基本步骤是____ 。
(2)为探究不同传统老面中酵母菌菌种的差异,需用生理盐水分别对
(3)可用糯米酒制作实验对实验获得的酵母菌进行综合评价,其基本步骤是
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【推荐2】 下面是有关食醋制作的实验。请回答:
(1)若以大米为原料经三步发酵可以制作食醋:
第一步:大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶,将原料中的淀粉分解成______ (填中间产物),然后进一步分解成葡萄糖,这一过程可用______ (填淀粉指示剂)来检测,因为该试剂遇淀粉呈蓝色,遇上述中间产物呈红色。
第二步:用酵母菌将葡萄糖转化成乙醇,这一发酵过程中,玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是____________________ 。
第三步:用_____ 菌将乙醇转化成乙酸,这一过程______ 氧气。
(2)生物技术在食品加工中的应用十分广泛,下图所示的是某种发酵装置,据图分析,下图说法正确的是( )
A.图示为果酒的发酵装置,甲瓶倒入酒-水混合物,乙瓶为发酵瓶
B.乙瓶的一个直角玻璃管内塞有棉花的作用是过滤空气,防止杂菌进入乙瓶
C.将酒-水混合物的pH调至酸性,加入适量醋曲悬液后倒入乙瓶中
D.整个过程中严格控制发酵温度为25°C
(3)在有关微生物培养过程中,有关操作正确的是_______
A.在分离分解尿素的细菌的实验中要对尿素培养基使用高压蒸汽灭菌
B.培养基分装到培养皿后进行灭菌
C.倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行
D.分离得到的菌落应先接种在平板上,培养24h后,置于4°C冰箱保存
(4)在分离、纯化细菌实验中,划线接种(甲)、培养结果(乙)如下图。有关叙述错误的是( )
A.接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌
B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次
D.甲中a区域为划线的起始位置
最后将培养皿_____ ,放入____ 中培养。培养后通常根据____ 的形状、大小、颜色等特征进行菌种鉴定。
(1)若以大米为原料经三步发酵可以制作食醋:
第一步:大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶,将原料中的淀粉分解成
第二步:用酵母菌将葡萄糖转化成乙醇,这一发酵过程中,玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是
第三步:用
(2)生物技术在食品加工中的应用十分广泛,下图所示的是某种发酵装置,据图分析,下图说法正确的是
A.图示为果酒的发酵装置,甲瓶倒入酒-水混合物,乙瓶为发酵瓶
B.乙瓶的一个直角玻璃管内塞有棉花的作用是过滤空气,防止杂菌进入乙瓶
C.将酒-水混合物的pH调至酸性,加入适量醋曲悬液后倒入乙瓶中
D.整个过程中严格控制发酵温度为25°C
(3)在有关微生物培养过程中,有关操作正确的是
A.在分离分解尿素的细菌的实验中要对尿素培养基使用高压蒸汽灭菌
B.培养基分装到培养皿后进行灭菌
C.倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行
D.分离得到的菌落应先接种在平板上,培养24h后,置于4°C冰箱保存
(4)在分离、纯化细菌实验中,划线接种(甲)、培养结果(乙)如下图。有关叙述错误的是
A.接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌
B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次
D.甲中a区域为划线的起始位置
最后将培养皿
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【推荐3】尿素是一种重要的农业氮肥,只有通过土壤中某些细菌分解为氨后,才能被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下:
(1)土壤中的某些细菌能分解尿素,是因为它们能合成脲酶,脲酶的作用是_______________ ,NH3可作为细菌生长的氮源。
(2)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4其作用有_______________ (答出两点)。
(3)检验该培养基灭菌效果的常用方法是_______________ 。
(4)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用_______________ 法接种。某同学严格按照无菌操作,取0.1mL菌液均匀涂布在培养基表面,经倒置培养后发现培养基上的菌落连成一片。最可能的原因是________________ 。
(5)将1g土样稀释至105倍,取0.1mL的稀释液接种于培养基上培养,测得的三个平板中菌落数目分别为168、173、187,则每克土样中尿素分解菌的活菌数约为_______________ 个。
KH2PO4 | Na2HPO4 | MgSO4·7H2O | 葡萄糖 | 尿素 | 琼脂 | H2O |
1.4g | 2.1g | 0.2g | 10.0g | 1.0g | 15.0g | 定容至1000mL |
(1)土壤中的某些细菌能分解尿素,是因为它们能合成脲酶,脲酶的作用是
(2)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4其作用有
(3)检验该培养基灭菌效果的常用方法是
(4)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用
(5)将1g土样稀释至105倍,取0.1mL的稀释液接种于培养基上培养,测得的三个平板中菌落数目分别为168、173、187,则每克土样中尿素分解菌的活菌数约为
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【推荐1】Ⅰ.细菌常被应用于生产生活中,如有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的细菌。
(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以________ 为唯一碳源的固体培养基上。为筛选出高效菌株,可比较单菌落周围清晰区域的大小。一般情况下,如图中清晰区域越大说明 ____________ 。
Ⅱ.另一同学将第一步筛选得到的甲、乙、丙三种细菌分别接种到A、B、C三种培养液中,经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间,结果如表所示:
注:“-”表示细菌没有生长。
(2)在A培养基中增殖较快的细菌是____________ 。丙细菌可以在C培养液中繁殖却无法在B培养液中繁殖,原因是 ___________ 。
(3)由于微生物的营养类型复杂,不同的微生物对营养物质的需求是不同的。如果培养能进行光合作用的微生物,培养基中的营养物质是________ (多选题)。
A.碳源 B.氮源 C.生长因子 D.无机盐 E.水
Ⅲ.下面是有关某细菌G的四项实验:
实验1:将G接种于一般培养基上,结果出现菌落。
实验2:用一定剂量的紫外线处理G,产生突变种g1。将g1接种于一般培养基后,不出现菌落;但在培养基内添加营养物质甲后,就出现菌落。
实验3:用另一剂量的紫外线处理G,得突变种g2,将g2接种于一般培养基后,也不出现菌落;但在培养基内添加营养物质乙后,就出现菌落。
实验4:将g1和g2一起接种于一般培养基上,数日后出现菌落。
(4)细菌g1和g2分别接种于一般培养基,均不能生长。其原因是用紫外线处理导致细菌G发生了________ ,从而缺乏合成营养物质甲或乙的酶。
A.基因突变 B.基因重组 C.染色体畸变 D.不可遗传变异
(5)实验1至3表明,物质甲和乙均是细菌G在代谢过程中产生的代谢产物。在实验2和3中,它们是作为________ 加入一般培养基的。
A.碳源 B.氮源 C.生长因子 D.无机盐
(6)实验4中出现菌落的原因可能是_____________________ 。
(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以
Ⅱ.另一同学将第一步筛选得到的甲、乙、丙三种细菌分别接种到A、B、C三种培养液中,经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间,结果如表所示:
培养液成分 | 繁殖一代所需的时间(分钟) | ||
甲 | 乙 | 丙 | |
A.葡萄糖、NaCl、PO、MgSO4 | 43 | 100 | - |
B.葡萄糖、NaCl、PO、MgSO4、8种氨基酸 | 28 | 40 | - |
C.葡萄糖、NaCl、PO、MgSO4、19种氨基酸 | 25 | 25 | 80 |
注:“-”表示细菌没有生长。
(2)在A培养基中增殖较快的细菌是
(3)由于微生物的营养类型复杂,不同的微生物对营养物质的需求是不同的。如果培养能进行光合作用的微生物,培养基中的营养物质是
A.碳源 B.氮源 C.生长因子 D.无机盐 E.水
Ⅲ.下面是有关某细菌G的四项实验:
实验1:将G接种于一般培养基上,结果出现菌落。
实验2:用一定剂量的紫外线处理G,产生突变种g1。将g1接种于一般培养基后,不出现菌落;但在培养基内添加营养物质甲后,就出现菌落。
实验3:用另一剂量的紫外线处理G,得突变种g2,将g2接种于一般培养基后,也不出现菌落;但在培养基内添加营养物质乙后,就出现菌落。
实验4:将g1和g2一起接种于一般培养基上,数日后出现菌落。
(4)细菌g1和g2分别接种于一般培养基,均不能生长。其原因是用紫外线处理导致细菌G发生了
A.基因突变 B.基因重组 C.染色体畸变 D.不可遗传变异
(5)实验1至3表明,物质甲和乙均是细菌G在代谢过程中产生的代谢产物。在实验2和3中,它们是作为
A.碳源 B.氮源 C.生长因子 D.无机盐
(6)实验4中出现菌落的原因可能是
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【推荐2】丁草胺是一种有机除草剂,主要用于水稻田杂草的防除,具有潜在的致畸变和致突变性。而在水稻种植过程中农田有一段很长的淹水期,淹水会导致水稻田深层土壤处于厌氧状态。因此研究丁草胺厌氧降解菌对于水稻田土壤中丁草胺的降解具有重要意义。研究人员要对丁草胺厌氧降解菌进行分离、鉴定和扩大培养 (如下图),请回答下列问题;(1)你认为研究小组应该在哪里取样?___
(2)配制选择培养基时,研究人员先加入了K2HPO4、KH2PO4、FeSO4、MgCl2、NH4Cl、 CaCl2、NaCl、微量元素复合液、维生素复合液等,他们还需要加入一定量的____ 。对培养基灭菌通常采用___ 法。灭菌结束后,应趁热将适量培养基分装于锥形瓶中,充入氮气,塞住胶塞并用铝帽固定,这样操作的目的是__ 。若需要调节培养基的 pH,应在灭菌_____ (填前或后)进行。
(3)步骤③中,应将平板放入厌氧罐中,置于培养箱中恒温培养,对长出的菌落进行初步鉴定。菌落是初步区分微生物类型的重要特征,这些特征包括___ (至少答出2 点)等。
(4)步骤④中,从第二次划线操作起,每次总是要从上一次划线的末端开始划线。其原因是_____ 。
(2)配制选择培养基时,研究人员先加入了K2HPO4、KH2PO4、FeSO4、MgCl2、NH4Cl、 CaCl2、NaCl、微量元素复合液、维生素复合液等,他们还需要加入一定量的
(3)步骤③中,应将平板放入厌氧罐中,置于培养箱中恒温培养,对长出的菌落进行初步鉴定。菌落是初步区分微生物类型的重要特征,这些特征包括
(4)步骤④中,从第二次划线操作起,每次总是要从上一次划线的末端开始划线。其原因是
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【推荐3】苯酚是重要的化工原料,被广泛应用于酚醛树脂、炼油、焦碳、染料等的生产中,并成为这些工业废水中的主要污染物。水溶液中的苯酚可被皮肤吸收而引起中毒,含酚废水可使水中生物大量死亡。活性污泥中的微生物作为废水处理的主体,是 有毒物质分解转化的主要执行者。回答下列问题:
(1)欲选出高效分解苯酚的菌株,应从_______ 中取样,接着在_______ (填固体或液体)培养基中选择培养,目的是_______ 。对培养基进行灭菌处理时,应采 用_______ 法。
(2)某同学采用稀释涂布平板法对高效分解苯酚的菌株进行计数,其原理是_______ 。
(3)在3个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为103的稀释液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的菌落数分别为:108、114和120,因此可得出1mL初始菌液中的活菌数为_______ 个。使用血细胞计数板计数时,为了区分活菌和死菌可采用台盼蓝染色,对活菌计数时应选择 视野中_______ 的细胞进行计数。
(4)分解苯酚的关键酶是苯酚羟化酶。苯酚羟化酶经分离纯化,可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定,该方法可使电泳迁移率完全取决于_______ 。生产上常常把苯酚羟化酶固定化后使用,研究发现不能用同一种技术来固定化苯酚羟化酶和其它所有酶,可能的原因是_______ (答出两点即可)。
(1)欲选出高效分解苯酚的菌株,应从
(2)某同学采用稀释涂布平板法对高效分解苯酚的菌株进行计数,其原理是
(3)在3个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为103的稀释液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的菌落数分别为:108、114和120,因此可得出1mL初始菌液中的活菌数为
(4)分解苯酚的关键酶是苯酚羟化酶。苯酚羟化酶经分离纯化,可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定,该方法可使电泳迁移率完全取决于
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【推荐1】果醋、腐乳及酸甜香脆的酸豆角、酸黄瓜等常常是餐桌上令人喜爱的调味食品。这些食品都来自于传统发酵技术的应用。请结合所学知识回答相关问题:
(1)研究表明,多种微生物参与了腐乳的发酵,其中起主要作用微生物是毛霉,使普通豆腐变身成风味独特的腐乳的主要原因是________________________ 。
(2)为了缩短酸豆角、酸黄瓜等泡菜的腌制时间,有人还会在坛中加入陈酸汤,其目的是________________ 。腌制的初期常常会有气泡冒出,随发酵的进行这一现象逐渐消失,对这一现象的合理解释是___________ 。
(3)泡菜要适量食用,主要是因为在腌制过程中会产生亚硝酸盐,在适宜的pH、温度和一定的微生物作用下,亚硝酸盐会转变成致癌物_________ 。测定泡菜中亚硝酸盐的含量时,所用方法为_____________ 。
(1)研究表明,多种微生物参与了腐乳的发酵,其中起主要作用微生物是毛霉,使普通豆腐变身成风味独特的腐乳的主要原因是
(2)为了缩短酸豆角、酸黄瓜等泡菜的腌制时间,有人还会在坛中加入陈酸汤,其目的是
(3)泡菜要适量食用,主要是因为在腌制过程中会产生亚硝酸盐,在适宜的pH、温度和一定的微生物作用下,亚硝酸盐会转变成致癌物
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【推荐2】传统发酵技术包括果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作等,丰富了餐饮生活,根据下列要求回答问题。
(1)传统发酵技术都利用了微生物发酵,果醋和腐乳制作过程相比较,起主要作用的微生物在结构上最大的区别是前者________________ 。
(2)在制作果酒实验中,某同学为研究发酵罐中酵母菌的生长状况,要取样统计分析,并测定pH。判断取样先后顺序的主要依据是_____________________________________ 。
(3)果酒制果醋的反应式为:________________________________________ 。
(4)制作泡菜时,若菜坛有裂缝,即使其他操作正确规范,实验也会失败。说明了乳酸菌是________________ 。
(5)传统发酵技术中,都没有接种菌种,也没有严格的灭菌,但都可以得到相应的发酵产物。其菌种来源于____________________________________________________________ 。
(1)传统发酵技术都利用了微生物发酵,果醋和腐乳制作过程相比较,起主要作用的微生物在结构上最大的区别是前者
(2)在制作果酒实验中,某同学为研究发酵罐中酵母菌的生长状况,要取样统计分析,并测定pH。判断取样先后顺序的主要依据是
(3)果酒制果醋的反应式为:
(4)制作泡菜时,若菜坛有裂缝,即使其他操作正确规范,实验也会失败。说明了乳酸菌是
(5)传统发酵技术中,都没有接种菌种,也没有严格的灭菌,但都可以得到相应的发酵产物。其菌种来源于
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【推荐3】农村中泡菜的制作方法是:新鲜的蔬菜经过整理、清洁后,放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中,然后向坛中加入盐水、香料及一些“陈泡菜水”。密封后置于阴凉处,最适环境温度为28-30℃。有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸”,前者是用盐过多,后者是用盐过少。在实验室或工厂化生产泡菜时,还要跟踪检测泡菜腌制过程中产生的亚硝酸盐含量。
(1)用白酒擦试菜坛的目的是___________ 。
(2)若要获得大量乳酸菌菌种,应选用培养基培养,培养基中应有___________ 、___________ 、水、无机盐等营养,同时还必须满足___________ 、___________ 等具体培养条件的要求。
(3)菜坛为要密封的原因是______________________ 。若菜坛有裂缝,可能会出现的结果是____________ 。加入“陈泡菜水”的作用是______________________ 。
(4)若制作的泡莱特别咸而不酸,最可能的原因是__________ ,如何调整_________________ 。
(5)关于测定亚硝酸盐含量实验操作的有关叙述,正确的是( )
A.泡菜制作需要配制盐水,其中盐与水的质量比为4:1
B.在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色染料
C.制备样品处理液,加入氢氧化铝乳液的目的是除去色素等杂质,得到澄清溶液
D.泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量,但温度和食盐的用量不影响其含量
(1)用白酒擦试菜坛的目的是
(2)若要获得大量乳酸菌菌种,应选用培养基培养,培养基中应有
(3)菜坛为要密封的原因是
(4)若制作的泡莱特别咸而不酸,最可能的原因是
(5)关于测定亚硝酸盐含量实验操作的有关叙述,正确的是
A.泡菜制作需要配制盐水,其中盐与水的质量比为4:1
B.在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色染料
C.制备样品处理液,加入氢氧化铝乳液的目的是除去色素等杂质,得到澄清溶液
D.泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量,但温度和食盐的用量不影响其含量
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