回答下列(一)、(二)小题:
(一)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素,因Hp能产生脲酶,目前临床上常用两种方法进行检测:13C呼气检测法(让病人服下一定量的药剂,后收集待检者呼出的气体并检测是否含有13CO2);胃黏膜活组织样本检测法(在胃镜下取少量胃黏膜组织,进行细菌培养、镜检)。
(1)13C呼气检测时,呼气前让待测者服下的药剂是_______________ ,其检测结果的可靠性是建立在胃部上皮细胞不产生_______________ 的前提下。
(2)把待测者胃镜下采集的样品制成菌液并稀释后,使用_______________ 法接种到含有酚红的特定培养基上进行培养﹐如果培养基上出现_______________ ,则表明待测者Hp阳性。
(3)在上述菌液培养过程操作规范正确,但发现平板上的菌落很少发育良好,其原因最可能是_______________ 。
(4)固定化脲酶在处理某些发酵食品和酒精饮料中的某种潜在致癌物前体有较好应用效果。可将Hp经_______________ 后再进行离心,取上清液进一步纯化获得脲酶,并制成固定化酶制剂。利用固定化脲酶处理发醛食品时,若发酵液在一次流经反应柱后,相关物质含量仍高于产品标准,在生产工艺流程方面可以改良的措施有_______________ (写出两个即可)等。
(二)回答利用农杆菌培育转基因抗虫烟草植物相关问题:
(5)将烟草种子置于离心管中用75%酒精和0.1%的氯化汞浸泡v并用无菌水冲洗,再用_______________ 吸干种子表面水分,接种到MS固体培养基上,萌发出幼苗。将无菌幼苗叶片切成小块,用经灭菌的手术刀划出伤口以促进_______________ 过程,形成愈伤组织。将处理后的小切块在特定MS培养基上预培养2~3天备用。
(6)将预培养后的小切块放入含有已成功转入_______________ 的农杆菌的培养液中共培养,一段时间后,转移至含有_______________ (激素)与_______________ 的MS培养基上培养。筛选已分化出丛状芽的切块,分株处理后再移至不含任何激素的培养基上_______________ 。再生植株长到5cm后打开瓶盖进行炼苗,移栽到培养土的盆钵中进行培养,其中培养土通常由草木灰、_______________ 和珍珠岩按一定比例配制。
(7)按上述方法获得植株经筛选后获得的转基因烟草自交,发现F1中出现51:9、48:12、34:26等性状分离比,这可能与_______________ 以及外源基因插入的位置有关。
(一)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素,因Hp能产生脲酶,目前临床上常用两种方法进行检测:13C呼气检测法(让病人服下一定量的药剂,后收集待检者呼出的气体并检测是否含有13CO2);胃黏膜活组织样本检测法(在胃镜下取少量胃黏膜组织,进行细菌培养、镜检)。
(1)13C呼气检测时,呼气前让待测者服下的药剂是
(2)把待测者胃镜下采集的样品制成菌液并稀释后,使用
(3)在上述菌液培养过程操作规范正确,但发现平板上的菌落很少发育良好,其原因最可能是
(4)固定化脲酶在处理某些发酵食品和酒精饮料中的某种潜在致癌物前体有较好应用效果。可将Hp经
(二)回答利用农杆菌培育转基因抗虫烟草植物相关问题:
(5)将烟草种子置于离心管中用75%酒精和0.1%的氯化汞浸泡v并用无菌水冲洗,再用
(6)将预培养后的小切块放入含有已成功转入
(7)按上述方法获得植株经筛选后获得的转基因烟草自交,发现F1中出现51:9、48:12、34:26等性状分离比,这可能与
更新时间:2021-12-15 20:27:34
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【推荐1】染料废水是一种难处理的工业废水。研究发现,活性污泥中能筛选出对蓝色的2BLN染料废水具有高效脱色能力的菌株,它们通过降解具生物毒性的分散蓝2BLN而降低废水危害。图1表示目标菌株GN-1的筛选和脱色实验流程,图2表示GN-1菌株接种量对脱色效果影响的实验结果。______ (答出2点)等物质,培养基制作后需使用______ 法进行灭菌。图1中含分散蓝2BLN的液体培养基甲的作用是______ 。
(2)图中所用到的接种方法是______ 。所示菌落①至④中,目标菌株GN-1应从菌落______ (选填编号)中挑取。分离和纯化培养须使用固体培养基,理由是______ 。
(3)随着染料废水中分散蓝2BLN初始浓度的持续增加,CN-1菌株的脱色能力可能怎样变化?______ 。阐述分析过程______ 。根据图2所示结果,综合考虑脱色效果(6d脱色率达90%以上为合格)和经济效益,CN-1菌株的最佳接种量为______ 。
(2)图中所用到的接种方法是
(3)随着染料废水中分散蓝2BLN初始浓度的持续增加,CN-1菌株的脱色能力可能怎样变化?
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【推荐2】1897年德国科学家毕希纳发现,利用无细胞的酵母汁可以进行乙醇发酵;还有研究发现,乙醇发酵的酶发挥催化作用需要小分子和离子辅助。某研究小组为验证上述结论,利用下列材料和试剂进行了实验。
材料和试剂:酵母菌、酵母汁、A溶液(含有酵母汁中的各类生物大分子)、B溶液(含有酵母汁中的各类小分子和离子)、葡萄糖溶液、无菌水。
实验共分6组,其中4组的实验处理和结果如下表。
注:“+”表示有乙醇生成,“-”表示无乙醇生成
回答下列问题:
(1)除表中4组外,其它2组的实验处理分别是:______________________ 。
(2)若为了研究B溶液中离子M对乙醇发酵是否是必需的,可增加一组实验,该组的处理是___________________________
(3)制备无细胞的酵母汁,酵母菌细胞破碎处理时需加入缓冲液,缓冲液的作用是__________ ,以确保酶的活性。
(4)如何检测酵母汁中是否含有活细胞?(写出2项原理不同的方法及相应原理)______________________ ;________________ 。
材料和试剂:酵母菌、酵母汁、A溶液(含有酵母汁中的各类生物大分子)、B溶液(含有酵母汁中的各类小分子和离子)、葡萄糖溶液、无菌水。
实验共分6组,其中4组的实验处理和结果如下表。
组别 | 实验处理 | 实验结果 |
① | 葡萄糖溶液+无菌水 | - |
② | 葡萄糖溶液+酵母菌 | + |
③ | 葡萄糖溶液+A溶液 | - |
④ | 葡萄糖溶液+B溶液 | - |
注:“+”表示有乙醇生成,“-”表示无乙醇生成
回答下列问题:
(1)除表中4组外,其它2组的实验处理分别是:
(2)若为了研究B溶液中离子M对乙醇发酵是否是必需的,可增加一组实验,该组的处理是
(3)制备无细胞的酵母汁,酵母菌细胞破碎处理时需加入缓冲液,缓冲液的作用是
(4)如何检测酵母汁中是否含有活细胞?(写出2项原理不同的方法及相应原理)
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【推荐3】苹果干腐病是一种名为茶藤子葡萄座腔菌真菌引起的疾病,病菌通常由枝条伤口入侵感染,在伤口处形成溃疡。某中学的科研小组计划分离出该真菌,并进行药物防治实验,为苹果干腐病的防治提供合理的建议。经过查阅资料,确定了分离时所用的PDA培养基配方,如下表所示:
(该真菌在上述PDA培养基上生长时有特定的形态特征:辐射状白色匍匐菌丝,绒毛状。氯霉素是一种常用抗生素,对多种细菌的繁殖起抑制作用。)
(1)PDA培养基中马铃薯的作用是______________ ,要获得菌落,则上表中还应添加的成分是______________ 。培养基的制备步骤包括计算、称量、______________ 、灭菌、倒平板。其中“灭菌”的目的是______________ 。
(2)用剪刀从染病枝条溃疡处剪取1×1cm2的患病组织,消毒后置于培养基中心,在适宜条件下进行培养,共培养五组。待菌落形态特征稳定后,可用______________ 法将该致病菌分别转移至含有等量0.5%苦水碱剂.40%福美砷.清水的上述PDA培养基中进行抗药性实验,并每隔24h记录一次最后划线区域的菌落数目。
①选取______________ 的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏的菌落数目。
②记录结果如下:
从结果分析可得出的结论是______________ 。
物质 | 马铃薯 | 葡萄糖 | 自来水 | 氯霉素 |
含量 | 200g | 20g | 1000mL | 0.3g |
(该真菌在上述PDA培养基上生长时有特定的形态特征:辐射状白色匍匐菌丝,绒毛状。氯霉素是一种常用抗生素,对多种细菌的繁殖起抑制作用。)
(1)PDA培养基中马铃薯的作用是
(2)用剪刀从染病枝条溃疡处剪取1×1cm2的患病组织,消毒后置于培养基中心,在适宜条件下进行培养,共培养五组。待菌落形态特征稳定后,可用
①选取
②记录结果如下:
小组 | 0.5%苦水碱剂 | 40%福美砷 | 清水 |
菌落数目 | 2 | 8 | 17 |
从结果分析可得出的结论是
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【推荐1】图1为利用苹果制备果汁、果酒、果醋的流程图,图2是澄清苹果汁生产示意图,回答下列有关问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/29/2968829982908416/2974185825173504/STEM/416042fb-cc8e-4241-a758-862d396f7fad.png?resizew=415)
(1)图1中,由①转变为②,除改变温度、调节pH外,还需调整的发酵条件是_______ 。
(2)苹果汁生产过程中,在“脱胶”时加入了适量的果胶酶,果胶酶可提高果汁的出汁率和澄清度,原因是果胶酶能够分解果胶、瓦解________________ 。
(3)果胶酶并不只是一种酶,而是分解果胶的一类酶的总称,包括_______ 酶、果胶分解酶、_____________ 酶。
(4)在果汁生产中,除了酶和苹果的用量外,影响果汁产量的因素还有_________________ (答出两点)。
(5)酶在水溶液中很不稳定,且不利于工业化使用,常用固定化技术使之成为不溶性于水而又有酶活性的制剂。下列相关叙述中,正确的是_______。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/29/2968829982908416/2974185825173504/STEM/416042fb-cc8e-4241-a758-862d396f7fad.png?resizew=415)
(1)图1中,由①转变为②,除改变温度、调节pH外,还需调整的发酵条件是
(2)苹果汁生产过程中,在“脱胶”时加入了适量的果胶酶,果胶酶可提高果汁的出汁率和澄清度,原因是果胶酶能够分解果胶、瓦解
(3)果胶酶并不只是一种酶,而是分解果胶的一类酶的总称,包括
(4)在果汁生产中,除了酶和苹果的用量外,影响果汁产量的因素还有
(5)酶在水溶液中很不稳定,且不利于工业化使用,常用固定化技术使之成为不溶性于水而又有酶活性的制剂。下列相关叙述中,正确的是_______。
A.实验中所用的固定化果胶酶吸附后可永久使用 |
B.为防止杂菌污染,图示装置制作完毕后需瞬间高温灭菌 |
C.通过控制阀调节苹果汁流出的速率,保证反应充分进行 |
D.固定化果胶酶不可重复使用,每次生产前需重新装填反应 |
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【推荐2】新冠肺炎疫情警示人们要养成良好的生活习惯,提高公共卫生安全意识,戴口罩可以减少病原微生物通过飞沫在人与人之间的传播。为加快废弃口罩的处理,避免污染环境,某科研团队准备从土壤中筛选出能高效降解一次性口罩(熔喷布)的细菌(不分解琼脂),请回答下列问题。
(1)培养基的配置和灭菌:根据目标微生物的特性,配置相应的培养基,熔喷布主要成分为聚丙烯纤维(PP,组成仅含有C、H两种元素),用于筛选的固体培养基除需加入经过处理的聚丙烯粉末作为______________ 外,还应加入水、氮源、无机盐和琼脂等。配置好后,进行高压蒸汽灭菌,影响高压蒸汽灭菌效果的因素有____________________________ 等(答出2点即可)。
(2)目的菌的获取、选择、扩大培养:目的细菌大多分布在距地表约5cm~10cm的潮湿土壤层, 因此土壤取样时,一般______________ 。在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂,目的菌的作用可使目的菌落周围出现透明圈,应当选择______________ 的菌落作为目的菌群,接种于液体培养基中再进行扩大培养。
(3)若要测定土壤中能降解一次性口罩(熔喷布)的细菌细胞数,请写出主要实验步骤_________________________________________________ 。
(4)工业化使用:已知目的菌分解PP需要多种酶的共同参与,目的菌比酶分子大得多,工厂化降解PP时,通常采用______________ 法来固定目的菌。影响目的菌降解熔喷布效果的因素有温度、pH以及______________ 等(答出两点即可)。
(1)培养基的配置和灭菌:根据目标微生物的特性,配置相应的培养基,熔喷布主要成分为聚丙烯纤维(PP,组成仅含有C、H两种元素),用于筛选的固体培养基除需加入经过处理的聚丙烯粉末作为
(2)目的菌的获取、选择、扩大培养:目的细菌大多分布在距地表约5cm~10cm的潮湿土壤层, 因此土壤取样时,一般
(3)若要测定土壤中能降解一次性口罩(熔喷布)的细菌细胞数,请写出主要实验步骤
(4)工业化使用:已知目的菌分解PP需要多种酶的共同参与,目的菌比酶分子大得多,工厂化降解PP时,通常采用
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【推荐3】纤维素酶制剂已被广泛应用于食品、酿酒、饲料加工、纺织、洗衣、农业等多个领域,纤维素酶在自然界分布极为广泛,昆虫、软体动物、细菌、放线菌和真菌等都能产生纤维素酶。目前用于生产纤维素酶的微生物多为真菌。回答下列问题:
(1)为获取分解纤维素的菌种,从树林中多年落叶形成的腐殖土取样后,首先要进行多次选择培养以增加纤维素分解菌的浓度,选择培养所用的培养基属于__________ (填“固体培养基”“半固体培养基”或“液体培养基”)。将所取土样加入培养基后需在一定温度下振荡培养,其目的是__________ 。
(2)经选择培养后,一般可采用__________ 法将纤维素分解菌接种到鉴别培养基上,用于鉴别纤维素分解菌的培养基中除了加入微生物生长所必需的营养物质外,还需加入琼脂和__________ ,以便根据菌落周围是否出现明显的透明圈来筛选纤维素分解菌。
(3)筛选出优良的纤维素分解菌菌种后,可通过发酵的方法来生产纤维素酶制剂。分离提纯需所获得的纤维素酶制剂需置于__________ (填“低温”“高温”或“最适温度”)条件下保存。
(4)工业生产中,若要将酶固定化,一般__________ (填“适宜”或“不适宜”)采用包埋法,其原因是__________ 。
(1)为获取分解纤维素的菌种,从树林中多年落叶形成的腐殖土取样后,首先要进行多次选择培养以增加纤维素分解菌的浓度,选择培养所用的培养基属于
(2)经选择培养后,一般可采用
(3)筛选出优良的纤维素分解菌菌种后,可通过发酵的方法来生产纤维素酶制剂。分离提纯需所获得的纤维素酶制剂需置于
(4)工业生产中,若要将酶固定化,一般
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【推荐1】下图是应用生物工程技术获得人们所需要的生物新品种或新产品的示意图。请据图回答下列问题:________ 基因。
(2)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,科学家将人的生长激素基因与__________ 的启动子等调控组件重组在一起,通过_______ 方法完成过程②。③过程需要先通过_________ 技术培养到桑椹胚或囊胚阶段,再采用___________ 技术,培育出转基因犊牛。
(3)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅱ是___ 细胞,单克隆抗体具有______________________________________________ 的优点。
(4)在抗虫棉的培育过程中,④过程中的受体细胞一般采用愈伤组织细胞,是因为其细胞表达_________ 的能力强。
(2)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,科学家将人的生长激素基因与
(3)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅱ是
(4)在抗虫棉的培育过程中,④过程中的受体细胞一般采用愈伤组织细胞,是因为其细胞表达
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【推荐2】人绒毛膜促性腺激素(hCGβ)是胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,近年研究发现,结肠癌等多种恶性肿瘤细胞的hCGβ基因也有表达,hCGβ与肿瘤的发生、发展及转移有一定关系。研发抗hCGβ疫苗已成为近年来肿瘤生物治疗新的热点,下图为其制备的基本方案。回答下列问题:
注2:AOX1为甲醇氧化酶基因的启动子,只能在以甲醇为唯一碳源的培养基中正常表达;
注3:各种限制酶对应的线条所指为其识别序列。
(1)图示 hCGβ基因是人工合成的目的基因,在设计引物对其扩增时,为防止目的基因与质粒的自身环化并保证连接的方向性,可在其左右两端分别添加______________ 限制酶的识别序列。经实验得知该基因扩增引物长度为10个核苷酸时特异性强、效率高,已知目的基因①处的碱基序列为—CCTTTCAGCTCA——,同时考虑连接的方向性和引物的特异性,则设计该端对应引物的序列是5'-_________________ -3'。
(2)图示 hCGβ基因需要与甲序列一起构建形成融合基因,其目的是__________________ 。从生产控制的角度分析,选用AOX1作为hCGβ基因启动子的优点是_________________ 。
(3)阶段Ⅱ将环化质粒导入用_________ 处理的大肠杆菌,从而实现重组DNA 的扩增,该过程需要在培养基中添加_________________ 来筛选得到含hCGβ基因表达载体的大肠杆菌,选择大肠杆菌作为受体菌是利用大肠杆菌具有___________________________ 的特点(至少答2点)。
(4)阶段Ⅳ需将处理后的酵母菌接种在培养基上培养,该培养基不需要添加以下哪些成分____ (①氨苄青霉素 ②组氨酸 ③无机盐 ④琼脂),可在此培养基上生长的酵母菌即为含有 hCGβ基因表达载体的目的菌株。将此菌株扩大培养后,离心取上清液,依据______________ 原理进行检测。若上清液中能检测到hCGβ蛋白,则说明hCGβ基因得以表达。
注2:AOX1为甲醇氧化酶基因的启动子,只能在以甲醇为唯一碳源的培养基中正常表达;
注3:各种限制酶对应的线条所指为其识别序列。
(1)图示 hCGβ基因是人工合成的目的基因,在设计引物对其扩增时,为防止目的基因与质粒的自身环化并保证连接的方向性,可在其左右两端分别添加
(2)图示 hCGβ基因需要与甲序列一起构建形成融合基因,其目的是
(3)阶段Ⅱ将环化质粒导入用
(4)阶段Ⅳ需将处理后的酵母菌接种在培养基上培养,该培养基不需要添加以下哪些成分
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【推荐3】我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗,其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质(S蛋白),对应的基因为s基因。请回答:
(1)在构建重组DNA分子时,要用限制性核酸内切酶处理___________________ ,并用______________ 酶使两者结合。将重组DNA分子通过_________ 的方式导入到哺乳动物细胞,经筛选得到工程细胞。
(2)在细胞培养过程中,通常需要加入_______ 等天然成分。工程细胞在生长过程中有_________________ 现象,需要定期使用________ 酶处理,以便于分瓶培养。
(3)由于哺乳动物细胞培养较难,成本较高,近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”,进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品。在这种技术中,作为重组DNA分子受体细胞的一般是______________ 。
(1)在构建重组DNA分子时,要用限制性核酸内切酶处理
(2)在细胞培养过程中,通常需要加入
(3)由于哺乳动物细胞培养较难,成本较高,近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”,进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品。在这种技术中,作为重组DNA分子受体细胞的一般是
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解题方法
【推荐1】不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体染色质,与未经射线照射的受体融合,所得融合产物含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。科研人员使用大剂量的X射线处理拟南芥(2n=10)的原生质体,然后诱导其与柴胡(2n=12)的原生质体融合,获得了不对称杂种植株。
(1)将悬浮培养的拟南芥、柴胡细胞,经____ 处理获得游离的原生质体。采用二乙酸荧光素(FAD)法测定原生质体活力,FAD本身无荧光,当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质,该荧光物质不能透过细胞膜,会留在细胞内发出荧光。据此应选择____ 的原生质体用于融合。
(2)获得的原生质体可使用化学方法诱导融合。融合后得到的杂种细胞经____ 过程,最终发育成完整植株。
(3)科研人员对获得的部分植株的细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定,统计结果如下表所示:
由表可知,后代植株中____ 类型一定不是杂种植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成,拟南芥亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中,而是以遗传物质重组的方式整合进柴胡的基因组,作出以上推测的依据是____ 。
(1)将悬浮培养的拟南芥、柴胡细胞,经
(2)获得的原生质体可使用化学方法诱导融合。融合后得到的杂种细胞经
(3)科研人员对获得的部分植株的细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定,统计结果如下表所示:
后代植株类型 | 愈伤组织形态 | 染色体数目、形态 | DNA分子标记鉴定 |
甲 | 柴胡表型 | 12,与柴胡染色体相似 | 含双亲DNA片段 |
乙 | 柴胡表型 | 12,与柴胡染色体相似 | 无拟南芥DNA片段 |
丙 | 柴胡表型 | 12,与柴胡染色体相似 | 含双亲DNA片段和新的DNA片段 |
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【推荐2】人参皂苷F1作为一种稀有人参皂苷,很难直接从天然人参植物中提取。已知在人参属植物三七中具有与人参皂苷F1合成相关的PnDDS、CYP12H、CYP6H和UGTPn20四个关键基因,本研究通过在烟草中表达这四个基因,首次获得能够产生人参皂苷F1的转基因烟草株系和细胞系,研究过程如图1所示。请回答下列问题:
(1)①过程需要__________ 的催化,步骤②中利用PCR技术扩增目的基因时,其原理是__________________ 。进行PCR反应时需要加热到90~95℃,目的是_______________ 。
(2)在构建基因表达载体时,通常用双酶切的好处是________________________ (答出2点)。
(3)该实验所用的农杆菌Ti质粒如图2所示,据图可知应在添加______ 的培养基中筛选导入目的基因的烟草愈伤组织细胞。烟草细胞经过______ 过程形成烟草愈伤组织细胞,该过程______ (填“有”或“没有”)体现细胞全能性。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/7/10/d2f8fb08-d1c5-4b83-802f-3bf7ceedcc51.png?resizew=676)
(1)①过程需要
(2)在构建基因表达载体时,通常用双酶切的好处是
(3)该实验所用的农杆菌Ti质粒如图2所示,据图可知应在添加
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/7/10/34d95e9a-a226-44be-905d-9e515f13ee0e.png?resizew=232)
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【推荐3】土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中,培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图,图中I~Ⅲ为限制酶的酶切位点,bar抗除草剂基因,Kanr为卡那霉素抗性基因。请分析回答:
(1)过程①需要____________ 催化。过程③需要用____________ 处理根瘤农杆菌,使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
(2)过程①所需引物的作用是________________________ ,过程①所用的一对引物如下,则过程②使用的限制酶是______ 和______ 。
5′-CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3′
5′-CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3′
(3)花椰菜病毒启动子含有__________________ 识别、结合的核苷酸序列,本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因,其目的是________________________ 。
(4)科研人员采用特定的方法大量提取成功转化的4株植株叶片的基因组DNA(目的基因中不含AAGCTT),用HindⅢ全酶切,将产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交,其杂交带结果如图所示(图中数字标号代表转化成功的植株)。下列有关分析正确的有______ 。
①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示
②杂交带位置不同说明经HindⅢ切后形成的DNA段长度不同
③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同
④目的基因插入到受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的
(5)过程④选择愈伤组织细胞来转化的主要原因是__________ ,图中⑤属于组织培养中的______ 过程。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/7/24/891bf9f6-2c13-45c5-adfe-cd03100543ac.png?resizew=447)
限制酶 | EcoRI | BamHI | HindIII | SacI |
识别序列和切割位点 | GAATTC | GGATCC | AAGCTT | GAGCTC |
(2)过程①所需引物的作用是
5′-CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3′
5′-CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3′
(3)花椰菜病毒启动子含有
(4)科研人员采用特定的方法大量提取成功转化的4株植株叶片的基因组DNA(目的基因中不含AAGCTT),用HindⅢ全酶切,将产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交,其杂交带结果如图所示(图中数字标号代表转化成功的植株)。下列有关分析正确的有
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/7/24/35f907f6-d34c-42cb-ac94-e3aae7c151b2.png?resizew=159)
①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示
②杂交带位置不同说明经HindⅢ切后形成的DNA段长度不同
③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同
④目的基因插入到受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的
(5)过程④选择愈伤组织细胞来转化的主要原因是
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