DDX5基因在细胞周期调控、肿瘤发生等方面发挥重要作用。研究人员运用CRISPR-Cas9基因编辑技术对口蹄疫病毒易感的PK-15细胞株中的DDX5基因进行敲除,为后续研究DDX5基因在病毒感染中的作用提供基础。请据图回答下列问题。
(1)图1中,Ori是_______ (酶)首先结合的核苷酸序列。构建CRISPR-Cas9表达载体时使用的工具酶主要有______ 。 结合对图2中CRISPR-Cas9技术原理的理解,图1表达载体中需要插入两种sgRNA基因,原因是_____ 。
(2)研究中先将CRISPR-Cas9表达载体导入大肠杆菌DH5a,再将菌液利用________ 法接种到加有________ 的细菌培养基上,待菌落长成后,直接挑取菌落加入到PCR反应系统中进行基因鉴定。PCR过程中不需要先提取细菌DNA的原因是______ 。
(3)研究中采用培养转化的大肠杆菌对CRISPR-Cas9表达载体进行扩增。与PCR相比,利用大肠杆菌进行目的基因扩增的优点有________ 、____________ 。
(4)取转化的PK15细胞悬液进行有限稀释,再接种到6孔培莽板上,一段时间后对各孔内的细胞株进行DDX5蛋白检测,结果如图(其中B-actin是真核细胞骨架蛋白)。对细胞悬液有限稀释法的目的是________ , 细胞培养时CO2培养箱中充入的气体应是_______ 。 根据检测结果,敲除DDX5基因的细
胞株编号有___________ 。
(1)图1中,Ori是
(2)研究中先将CRISPR-Cas9表达载体导入大肠杆菌DH5a,再将菌液利用
(3)研究中采用培养转化的大肠杆菌对CRISPR-Cas9表达载体进行扩增。与PCR相比,利用大肠杆菌进行目的基因扩增的优点有
(4)取转化的PK15细胞悬液进行有限稀释,再接种到6孔培莽板上,一段时间后对各孔内的细胞株进行DDX5蛋白检测,结果如图(其中B-actin是真核细胞骨架蛋白)。对细胞悬液有限稀释法的目的是
胞株编号有
更新时间:2021-12-21 10:06:49
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适中
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【推荐1】研究人员在饲养黄粉虫幼虫的过程中,发现这小小的虫子具有一项神奇功能——将塑料转化为有机肥。其原理是黄粉虫肠道内的某些微生物能够降解塑料的最主要成分——聚苯乙烯。下图表示分离聚苯乙烯分解菌的基本操作过程。请回答下列问题:
(1)培养基是微生物生长繁殖的营养基质,培养基除含有主要营养物质外,还要满足微生物生长对______ 的要求。培养基①和④的组成成分的差异为______ 。
(2)取黄粉虫幼虫肠道组织,适当研磨后溶解于______ 制成悬浮液;然后进行①~③过程的培养,其目的是______ 。④~⑤过程中,用平板划线法和用稀释涂布平板法获得单个菌落分别依靠______ 。
(3)若对⑥~⑧过程的菌种进行临时保藏,具体操作为______ 。结合实际生活经验,从环保角度谈防治塑料废弃物污染的具体对策:______ (答出1条即可)。
(1)培养基是微生物生长繁殖的营养基质,培养基除含有主要营养物质外,还要满足微生物生长对
(2)取黄粉虫幼虫肠道组织,适当研磨后溶解于
(3)若对⑥~⑧过程的菌种进行临时保藏,具体操作为
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非选择题-实验题
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适中
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【推荐2】泡菜是我国的传统食品之一。
(1)制作泡菜时,所用盐水通常需要煮沸,其目的是___________ 。为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的目的是___________________________________ 。
(2)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化乳酸菌时,首先需要用________ 对泡菜滤液进行梯度稀释。
(3)在示意图A和图B中,________ 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是_____________________ 。
(4)腐乳又称豆腐乳,亦是中国流传数千年的传统民间美食。腐乳制作过程中有多种微生物参与,其中起主要作用的是_________ ,主要利用其产生的________ 酶。通过发酵,豆腐中营养物质的种类________ (填“减少”或“增多”)。
(1)制作泡菜时,所用盐水通常需要煮沸,其目的是
(2)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化乳酸菌时,首先需要用
(3)在示意图A和图B中,
(4)腐乳又称豆腐乳,亦是中国流传数千年的传统民间美食。腐乳制作过程中有多种微生物参与,其中起主要作用的是
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非选择题-解答题
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适中
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【推荐3】在石油开采过程中,利用表面活性剂可提高采收率,而某些微生物可代谢产生生物表面活性剂。筛选含油污水中耐高温高压的产生生物表面活性剂菌株,流程如下图。
(1)为分离能利用石油的耐高温菌种,需要配制以石油为_____ 的培养基。获得纯净培养物的关键是_____ ,通过_____ 技术可以实现这一点。
(2)图中A处应采用_____ 法进行接种,60℃条件下培养,分离获得16个菌株。
(3)为进一步筛选耐高压、高产生物表面活性剂的菌种,研究者将上述待选菌种分别接种于含_____ 的液体培养基,在_____ 条件下培养,挑选_____ 的菌株
(4)可根据菌种在平板上形成_____ 的特征,对菌种进行初步鉴定,再根据基因测序进行进一步鉴定,获得耐高温、高压能产生生物表面活性剂的菌种BQ-2.
(5)菌种BQ-2为好氧菌,但油井深处通常缺氧。现有一耐高温高压、不能产生生物表面活性剂的厌氧菌DQ-l。为获得_____ 的目的菌株,研究者将BQ-2参与生物表面活性剂合成的基因导入DQ-1中,在适宜条件下培养并分离,再筛选菌株。
(1)为分离能利用石油的耐高温菌种,需要配制以石油为
(2)图中A处应采用
(3)为进一步筛选耐高压、高产生物表面活性剂的菌种,研究者将上述待选菌种分别接种于含
(4)可根据菌种在平板上形成
(5)菌种BQ-2为好氧菌,但油井深处通常缺氧。现有一耐高温高压、不能产生生物表面活性剂的厌氧菌DQ-l。为获得
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适中
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【推荐1】Anti基因是小型猪器官表面抗原基因,人工合成的reAnti基因的模板链与Anti基因的模板链互补。科学家利用合成的reAnti基因培育出转基因克隆猪,用于解决器官移植时免疫排斥的问题。
(l)可用________ 对reAnti基因进行扩增,在构建基因表达载体时,一般用_____ 种不同的限制酶切割reAnti基因和运载体DNA来获得不同的黏性末端,使得目的基因定向连接到运载体上。
(2)培育转基因猪时,使用__________ 技术将含有reAnti基因的表达载体导入猪成纤维细胞。再将该转基因猪的细胞核注入____________ (时期)的卵母细胞中,构建重组胚胎。
(3)胚胎培养液中除了一些无机盐和有机物外,还需要添加“两酸、两素”以及动物血清,其中的“两素”是指________________________ 。
(4)用_________________ 技术检测出转基因克隆猪的细胞核DNA中含有reAnti基因,可推断器官表面_________ (填“含有”或“不含有”)抗原,原因是_____________________ 。
(l)可用
(2)培育转基因猪时,使用
(3)胚胎培养液中除了一些无机盐和有机物外,还需要添加“两酸、两素”以及动物血清,其中的“两素”是指
(4)用
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【推荐2】【生物-选修3:现代生物科技专题】
研究人员通过利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因,提高了光合作用过程中Rubisco酶对CO2的亲和力,从而显著提高了植物的光合作用速率。回答下列问题:
(1)PCR过程所依据的原理是______________ ,利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段________ 的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物;PCR利用了DNA的热变性原理,DNA受热变性后解链为单链,冷却使_____________ 与DNA模板链结合,然后再_____________ 的催化下进行互补子链的合成。细胞内DNA复制时解链是在______________ 的催化下完成的。
(2)cDNA文库中的Rubisco酶基因____________ (填“含有”或“不含有”)启动子和内含子。检测Rubisco酶基因是否转录出mRNA采用_____________ 技术。通过对Rubisco酶基因进行改造从而实现对Rubisco酶的改造属于_______________ 工程。
(3)改造Rubisco酶基因能够显著的提高植物的光合作用速率体现了基因通过控制___________________ 。进而控制生物体的性状。
研究人员通过利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因,提高了光合作用过程中Rubisco酶对CO2的亲和力,从而显著提高了植物的光合作用速率。回答下列问题:
(1)PCR过程所依据的原理是
(2)cDNA文库中的Rubisco酶基因
(3)改造Rubisco酶基因能够显著的提高植物的光合作用速率体现了基因通过控制
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【推荐3】基因工程中,需要使用限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。
⑴根据已知条件和图回答下列问题:
①上述质粒用限制酶________ 切割,目的基因用限制酶__________ 切割。
②将切下的目的基因片段插入质粒的切口处,还要加入适量的__________ 。
③请指出质粒上至少要有一个标记基因的理由:_____________________ 。
⑵不同生物的基因可以拼接的结构基础是____________________________________ 。
⑶利用PCR技术可获取目的基因,据图回答下列问题:
①PCR技术的原理是_____________ ,利用PCR技术获取目的基因的前提是_____________ 。
②由图中信息分析可知,催化C过程的酶是_______ ,它与正常细胞里的酶的区别是_________ 。
⑴根据已知条件和图回答下列问题:
①上述质粒用限制酶
②将切下的目的基因片段插入质粒的切口处,还要加入适量的
③请指出质粒上至少要有一个标记基因的理由:
⑵不同生物的基因可以拼接的结构基础是
⑶利用PCR技术可获取目的基因,据图回答下列问题:
①PCR技术的原理是
②由图中信息分析可知,催化C过程的酶是
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名校
【推荐1】2018年1月,两只克隆小猴“中中”和“华华”登上《细胞》,成了举世瞩目的大明星。这是世界首例非人灵长类动物的体细胞整。它们的诞生意味着以体细胞克隆猴为实验动物模型的时代就此开启。下图是该项技术的流程图,请据图回答问题:
(1)图中选择A猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养,其原因是_______________ 。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为________________ 。每一次进行传代培养,应用_____________________ 酶处理获得单个细胞,再用培养液稀释成________________ 。
(2)对B猴使用________________ 处理,使其超数排卵,收集并选取处于__________ (时期)的卵母细胞用于核移植。
(3)为获得更多的“中中”华华”,可在胚胎移植前对_______________ 时期的胚胎进行______________ 。胚胎移植的实质是早期胚胎_______________________________ 。
(4)“中中”“华华”的诞生意味着以体细胞克隆猴为实验动物模型的时代就此开启,相较于其他实验猴,其明显优势是____________________________________________ 。
(1)图中选择A猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养,其原因是
(2)对B猴使用
(3)为获得更多的“中中”华华”,可在胚胎移植前对
(4)“中中”“华华”的诞生意味着以体细胞克隆猴为实验动物模型的时代就此开启,相较于其他实验猴,其明显优势是
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适中
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【推荐2】环化一磷酸腺苷(cAMP)是一种细胞内的信号分子。研究表明,cAMP对初级卵母细胞完成减数第一次分裂有抑制作用,大致机理如下图所示。请回答下列问题:
(1)根据图中信息,被激活的酶A能催化ATP脱去________ 并发生________ 形成cAMP,cAMP能活化________ 。
(2)女性在________ 期卵原细胞就发育成为初级卵母细胞,但初级卵母细胞启动减数第一次分裂则需要等到进入青春期之后。依据上图推测,进入青春期后的女性初级卵母细胞恢复分裂的信号途径是_____________________ ,细胞内的cAMP浓度降低,活化的酶P减少,解除了对减数第一次分裂的抑制作用。
(3)初级卵母细胞的不均等分裂依赖于细胞膜内陷位置形成的缢缩环。有人认为cAMP抑制减数第一次分裂是因为影响了缢缩环,为此搜集了小鼠的初级卵母细胞,在诱导恢复分裂后,用两种特异性药物(药物H和药物F)进行了实验,结果如图所示。
①应从小鼠的_________ (器官)中获取初级卵母细胞,然后转移到37℃、含5%______ 的恒温培养箱中培养。
②根据上述结果推测,药物F对酶A有_________ 作用,cAMP抑制减数第一次分裂的原因除了阻止缢缩环的形成,还可能是_________________
(1)根据图中信息,被激活的酶A能催化ATP脱去
(2)女性在
(3)初级卵母细胞的不均等分裂依赖于细胞膜内陷位置形成的缢缩环。有人认为cAMP抑制减数第一次分裂是因为影响了缢缩环,为此搜集了小鼠的初级卵母细胞,在诱导恢复分裂后,用两种特异性药物(药物H和药物F)进行了实验,结果如图所示。
①应从小鼠的
②根据上述结果推测,药物F对酶A有
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适中
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【推荐3】下图为利用相关基因(用P表示)获得转基因小白猪的简单流程图,请据图回答下列相关问题:
(1)过程①中形成重组DNA常用的酶有_____ 和_____ ;将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是_____ 。
(2)过程②中,常用_____ 酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒的环境、_____ 、适合的温度和pH、_____ 。
(3)在构成重组细胞时,将导入目的基因的细胞转入去核的卵母细胞中,该技术称为_____ ,其利用的原理是_____ 。图中的卵母细胞应在体外培养到_____ 期,原因是_____ 。
(4)过程③中所用的胚胎工程技术是_____ ,然后将早期胚胎移入另一头与供体_____ 、但未经配种的代孕母猪的相应部位。
(1)过程①中形成重组DNA常用的酶有
(2)过程②中,常用
(3)在构成重组细胞时,将导入目的基因的细胞转入去核的卵母细胞中,该技术称为
(4)过程③中所用的胚胎工程技术是
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真题
名校
【推荐1】利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中,然后通过核移植技术培育基因编辑猪,可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程,请回答下列问题:
(1)对1号猪使用_________ 处理,使其超数排卵,收集并选取处在__________ 时期的卵母细胞用于核移植。
(2)采集2号猪的组织块,用__________ 处理获得分散的成纤维细胞,放置于37℃的CO2培养箱中培养,其中CO2的作用是________ 。
(3)为获得更多基因编辑猪,可在胚胎移植前对胚胎进行__________ 。产出的基因编辑猪的性染色体来自于_________ 号猪。
(4)为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达,可采用的方法有__________ (填序号)。
①DNA测序 ②染色体倍性分析 ③体细胞结构分析 ④抗原—抗体杂交
(1)对1号猪使用
(2)采集2号猪的组织块,用
(3)为获得更多基因编辑猪,可在胚胎移植前对胚胎进行
(4)为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达,可采用的方法有
①DNA测序 ②染色体倍性分析 ③体细胞结构分析 ④抗原—抗体杂交
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【推荐2】艾滋病是感染人类免疫缺陷病毒(HIV)导致的传染性疾病,医疗工作者一直致力于艾滋病的预防与治疗。请回答下列问题:
(1)图1表示HIV侵染辅助性T淋巴细胞的过程,①~⑧代表生理过程。图中①表示__________________________ ,通过②_____________ 形成的互补DNA通过④进入细胞核并_____________ 到宿主DNA中成为_____________ 病毒。HIV还可以感染体内其它类型的细胞,如脑细胞和_____________ 。
(2)下列说法正确的是_____________ (填字母)
A.③所需的酶是RNA聚合酶 B.④体现了膜的流动性
C.⑤所需的酶是解旋酶 D.⑥需要消耗ATP完成
(3)CRISPR/Cas9基因编辑技术可进行基因定点编辑,原理如图2所示。CRISPR/Cas9可以改造哺乳动物造血干细胞的CD4受体基因,使该细胞发生_____________ (请填写可遗传变异的类型),改造后的细胞可以通过增殖分化产生大量T淋巴细胞。这种T淋巴细胞不能合成正常的CD4受体,阻断HIV与CD4受体之间的特异性结合,可以有效防止HIV病毒感染。
(1)图1表示HIV侵染辅助性T淋巴细胞的过程,①~⑧代表生理过程。图中①表示
(2)下列说法正确的是
A.③所需的酶是RNA聚合酶 B.④体现了膜的流动性
C.⑤所需的酶是解旋酶 D.⑥需要消耗ATP完成
(3)CRISPR/Cas9基因编辑技术可进行基因定点编辑,原理如图2所示。CRISPR/Cas9可以改造哺乳动物造血干细胞的CD4受体基因,使该细胞发生
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【推荐3】回答下列(一)、(二)小题:
(一)啤酒是以粮食作物大麦(富含淀粉)酿造为主。
(1)所用大麦大多是没有发芽的,在酿造过程中需要将麦汁进行______ 过程,在实际生产中往往要将反应温度提高至90℃以上,因此添加的酶应具有________ 特点,而该步骤设置的优点有__________ (写出一点即可)。
(2)再根据酿造情况添加酵母菌,形成具有独特风味的啤酒。______ 、______ 等会影响啤酒的风味。
(3)如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为12345,下列说法中正确的是______
A.操作前要将接种环用酒精消毒
B.划线操作时将皿盖完全打开,划完立即盖上
C.只有在5区才可以得到所需菌落
D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
(4)酿造过程可在如图所示的发酵罐中进行。下列有关叙述不正确 的是:______
A.夏季生产果酒时,常需对罐体进行降温处理
B.乙醇为挥发性物质,故发酵过程中空气的进气量不宜太大
C.正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压
D.可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
(二)草甘膦是目前世界上使用量最大的除草剂,因此研制抗草甘膦的农作物新品种是国内研究热点。某科研单位培育出抗草甘膦的植物,培育过程如图1所示,请回答下面的问题。
(1)在阶段1过程中,将适当浓度的b与农杆菌混合,筛选出______ ,再通过农杆菌介导,筛选含有重组DNA的水稻细胞c,提高培育的成功率。
(2)阶段2需经过______ 培养后,获得胚状体,再发育成完整植株,该过程属于______ 途径。还可以从愈伤组织诱导出芽、根的______ 后,再生出新的植株。
(3)近年诞生了具划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术,可简单、准确地进行基因定点编辑。如图2所示,Cas9蛋白是______ 酶,通过向导RNA中的识别序列,可以特异性结合位点进行切割。
(4)研究发现,草甘膦通过水稻细胞的某受体蛋白M起作用,因此该研究单位欲通过基因编辑技术对水稻细胞进行精确的______ ,经组织培养获得完整植株后,还需进行______ 得到可连续遗传的抗草甘膦水稻品种。
(一)啤酒是以粮食作物大麦(富含淀粉)酿造为主。
(1)所用大麦大多是没有发芽的,在酿造过程中需要将麦汁进行
(2)再根据酿造情况添加酵母菌,形成具有独特风味的啤酒。
(3)如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为12345,下列说法中正确的是
A.操作前要将接种环用酒精消毒
B.划线操作时将皿盖完全打开,划完立即盖上
C.只有在5区才可以得到所需菌落
D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
(4)酿造过程可在如图所示的发酵罐中进行。下列有关叙述
A.夏季生产果酒时,常需对罐体进行降温处理
B.乙醇为挥发性物质,故发酵过程中空气的进气量不宜太大
C.正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压
D.可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
(二)草甘膦是目前世界上使用量最大的除草剂,因此研制抗草甘膦的农作物新品种是国内研究热点。某科研单位培育出抗草甘膦的植物,培育过程如图1所示,请回答下面的问题。
(1)在阶段1过程中,将适当浓度的b与农杆菌混合,筛选出
(2)阶段2需经过
(3)近年诞生了具划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术,可简单、准确地进行基因定点编辑。如图2所示,Cas9蛋白是
(4)研究发现,草甘膦通过水稻细胞的某受体蛋白M起作用,因此该研究单位欲通过基因编辑技术对水稻细胞进行精确的
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