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题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:646 题号:14674015
DDX5基因在细胞周期调控、肿瘤发生等方面发挥重要作用。研究人员运用CRISPR-Cas9基因编辑技术对口蹄疫病毒易感的PK-15细胞株中的DDX5基因进行敲除,为后续研究DDX5基因在病毒感染中的作用提供基础。请据图回答下列问题。

(1)图1中,Ori是_______(酶)首先结合的核苷酸序列。构建CRISPR-Cas9表达载体时使用的工具酶主要有______。 结合对图2中CRISPR-Cas9技术原理的理解,图1表达载体中需要插入两种sgRNA基因,原因是_____
(2)研究中先将CRISPR-Cas9表达载体导入大肠杆菌DH5a,再将菌液利用________法接种到加有________的细菌培养基上,待菌落长成后,直接挑取菌落加入到PCR反应系统中进行基因鉴定。PCR过程中不需要先提取细菌DNA的原因是______
(3)研究中采用培养转化的大肠杆菌对CRISPR-Cas9表达载体进行扩增。与PCR相比,利用大肠杆菌进行目的基因扩增的优点有____________________
(4)取转化的PK15细胞悬液进行有限稀释,再接种到6孔培莽板上,一段时间后对各孔内的细胞株进行DDX5蛋白检测,结果如图(其中B-actin是真核细胞骨架蛋白)。对细胞悬液有限稀释法的目的是________, 细胞培养时CO2培养箱中充入的气体应是_______。 根据检测结果,敲除DDX5基因的细
胞株编号有___________

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【推荐1】研究人员在饲养黄粉虫幼虫的过程中,发现这小小的虫子具有一项神奇功能——将塑料转化为有机肥。其原理是黄粉虫肠道内的某些微生物能够降解塑料的最主要成分——聚苯乙烯。下图表示分离聚苯乙烯分解菌的基本操作过程。请回答下列问题:

(1)培养基是微生物生长繁殖的营养基质,培养基除含有主要营养物质外,还要满足微生物生长对______的要求。培养基①和④的组成成分的差异为______
(2)取黄粉虫幼虫肠道组织,适当研磨后溶解于______制成悬浮液;然后进行①~③过程的培养,其目的是______。④~⑤过程中,用平板划线法和用稀释涂布平板法获得单个菌落分别依靠______
(3)若对⑥~⑧过程的菌种进行临时保藏,具体操作为______。结合实际生活经验,从环保角度谈防治塑料废弃物污染的具体对策:______(答出1条即可)。
2022-06-26更新 | 137次组卷
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【推荐2】泡菜是我国的传统食品之一。
(1)制作泡菜时,所用盐水通常需要煮沸,其目的是___________。为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的目的是___________________________________
(2)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化乳酸菌时,首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释。
(3)在示意图A和图B中,________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是_____________________

(4)腐乳又称豆腐乳,亦是中国流传数千年的传统民间美食。腐乳制作过程中有多种微生物参与,其中起主要作用的是_________,主要利用其产生的________酶。通过发酵,豆腐中营养物质的种类________(填“减少”或“增多”)。
2020-10-28更新 | 105次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐3】在石油开采过程中,利用表面活性剂可提高采收率,而某些微生物可代谢产生生物表面活性剂。筛选含油污水中耐高温高压的产生生物表面活性剂菌株,流程如下图。
   
(1)为分离能利用石油的耐高温菌种,需要配制以石油为_____的培养基。获得纯净培养物的关键是_____,通过_____技术可以实现这一点。
(2)图中A处应采用_____法进行接种,60℃条件下培养,分离获得16个菌株。
(3)为进一步筛选耐高压、高产生物表面活性剂的菌种,研究者将上述待选菌种分别接种于含_____的液体培养基,在_____条件下培养,挑选_____的菌株
(4)可根据菌种在平板上形成_____的特征,对菌种进行初步鉴定,再根据基因测序进行进一步鉴定,获得耐高温、高压能产生生物表面活性剂的菌种BQ-2.
(5)菌种BQ-2为好氧菌,但油井深处通常缺氧。现有一耐高温高压、不能产生生物表面活性剂的厌氧菌DQ-l。为获得_____的目的菌株,研究者将BQ-2参与生物表面活性剂合成的基因导入DQ-1中,在适宜条件下培养并分离,再筛选菌株。
2023-07-13更新 | 80次组卷
共计 平均难度:一般