幽门螺杆菌(Hp菌)因为其导致胃痛、胃癌,成为最臭名昭著的细菌之一、它是一种异养微厌氧菌,胃里面还有胃酸(pH为1.5左右),绝大部分的细菌都适应不了。在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:
请回答下列问题:
(1)微生物的实验室培养需用到无菌技术,该技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,另一个目的是_____ 。
(2)上述培养过程中,能够“浓缩”幽门螺杆菌的步骤是_____ 。
(3)有的化工厂会产生尿素废水,研究者提出用幽门螺杆菌来处理废水,如果该方法可行,根据题干信息可知,该处理过程对温度和氧气的要求分别是_____ 。
(4)实践证明有一种尿素分解菌比幽门螺杆菌处理尿素废水的能力强很多,最可能的原因是前者比后者产生的_____ 多。
(5)为了证明不分餐能导致胃幽门螺杆菌交叉传播,研究者提取了某胃炎患者家庭的100g剩菜,加入无菌水稀释。取上述稀释液分别接种到3个适宜的培养基中置于适宜的条件下进行培养,三个平板上胃幽门螺杆菌菌落数均介于30~300之间且相差不大,求平均值得到菌落数为B个。实验过程中,接种的方法为_____ ,此方法对活菌计数时,其结果往往比实际值偏低,原因是_____ 。根据上述情景不能计算出每克剩菜中的幽门螺杆菌的数量,原因是_____ 。
请回答下列问题:
(1)微生物的实验室培养需用到无菌技术,该技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,另一个目的是
(2)上述培养过程中,能够“浓缩”幽门螺杆菌的步骤是
(3)有的化工厂会产生尿素废水,研究者提出用幽门螺杆菌来处理废水,如果该方法可行,根据题干信息可知,该处理过程对温度和氧气的要求分别是
(4)实践证明有一种尿素分解菌比幽门螺杆菌处理尿素废水的能力强很多,最可能的原因是前者比后者产生的
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更新时间:2022-03-30 11:40:52
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【推荐1】酵母菌是木糖醇生产菌,生产木糖醇时,发酵体系的温度会因产热而升高。研究人员筛选高温诱导启动子,构建高温诱导启动子——木糖还原酶基因(XYL1)表达载体并导入酵母菌,用以生产木糖醇。(1)启动子是______ 的识别和结合部位,为筛选高温诱导启动子,研究人员选择A1—A7共7个待选启动子并构建了“启动子——绿色荧光蛋白基因”表达载体,然后导入酵母菌中。高温条件下,研究人员根据重组菌的__________________ 选出了A1启动子。
(2)XYL1含有内含子(基因编码区中不能表达的片段),获取无内含子XYLl(cXYL1)的方法是__________________ 。为将cXYLl正向插入质粒中,cXYLl的上游和下游应分别构建限制酶的酶切位点,构建方法是将限制酶序列构建在两引物的5′端,然后PCR。双酶切验证重组质粒上含有“A1-cXYL1”时,应选择的限制酶是______ ,电泳结果应出现与分子大小相符的______ 个条带。
(3)研究人员分别在30℃、37℃、42℃测定了重组菌的木糖还原酶活性,实验应以______ 为酶活性指标。若重组菌构建成功,实验结果应为________________________ 。
(2)XYL1含有内含子(基因编码区中不能表达的片段),获取无内含子XYLl(cXYL1)的方法是
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【推荐2】为探究不同离子对肠淀粉酶(最适pH为8)活性的影响,某同学开展了相关的实验,其实验步骤和结果见表。请回答:
(1)本实验的自变量是___________ ,无关变量是__________ 。
(2)四组实验中属于空白对照的是___ 号试管的实验。
(3)实验中加入缓冲液的作用是_____________________ 。
(4)分析结果,得出结论:
①比较3号与4号试管的实验结果,可得出的结论是__________ 对肠淀粉酶催化活性没有影响。
②比较2号与3号试管的实验结果,可得出的结论是______ 对(肠淀粉)酶的催化活性有抑制作用。
③比较1号与3号试管的实验结果,可得出的结论是____ 对(肠淀粉)酶的催化活性有促进作用。
试管编号及试剂 | 1号1%NaCl溶液(mL) | 2号1% CuSO4溶液(mL) | 3号1% Na2SO4溶液(mL) | 4号蒸馏水(mL) | |
①加入试剂 | 1 | 1 | 1 | 1 | |
②加入pH 8缓冲液(mL) | 1 | 1 | 1 | 1 | |
③加入1%淀粉溶液(mL) | 1 | 1 | 1 | 1 | |
④加入肠淀粉酶溶液(mL) | 1 | 1 | 1 | 1 | |
⑤各试管室温下反应2min | |||||
⑥加入刚配制好的斐林试剂1mL | |||||
⑦将各试管放入盛有50℃~65℃温水的大烧杯中加热约2min | |||||
⑧观察、记录结果 | 深砖红色 | 无砖红色(或浅蓝色) | 浅砖红色 | 浅砖红色 | |
(1)本实验的自变量是
(2)四组实验中属于空白对照的是
(3)实验中加入缓冲液的作用是
(4)分析结果,得出结论:
①比较3号与4号试管的实验结果,可得出的结论是
②比较2号与3号试管的实验结果,可得出的结论是
③比较1号与3号试管的实验结果,可得出的结论是
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【推荐3】2022年8月1日贵阳市气象台发布7月天气实况中显示,全市平均气温为24.6℃,创下1961年以来同期最高,但相比省外多地35至38℃、甚至突破40℃的高温天气,市民只要出行时不被太阳直射,凉爽仍然是主旋律,中国“避暑之都”仍旧实至名归。在酷热的夏天一定要注意防范中暑,严重的中暑又称“热射病”,是指因高温引起的人体体温调节功能失调,从而引发神经器官受损,死亡率很高。回答下列问题:
(1)由于外界的高温刺激,某人中暑前表现出大量流汗的现象,请写出一条反射弧来描述此人流汗的缘由___________ 。
(2)人体体温调节中枢位于___________ ,其中有体温调节中枢、水盐平衡中枢等,还与___________ 等有关。
(3)中暑的发生说明人体内环境稳态的调节能力是___________ ,而人体内环境稳态的主要调节机制是___________ 。
(4)热射病的病理机制十分复杂,涉及多脏器、多系统的相互作用。目前研究较多的机制之一是“直接热损伤”,从细胞代谢角度分析直接热损伤的原因是___________ 。
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【推荐1】某研究小组欲研究手机外壳表面上的微生物种类和数量,设计了如下实验步骤:
①配置培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨10g、NaCl5g、X20g、H2O1000ml)并制作无菌平板培养基; ②用无菌棉签蘸蒸馏水擦拭手机外壳表面后将无菌棉签浸入100mL的蒸馏水中并充分振荡制成细菌悬液; ③吸取0.1ml细菌悬液,用涂布器将其接种到无菌平板上。重复操作,制成多个接种平板; ④将平板置于37℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题:
(1)该培养基中的成分X通常是_________ 。牛肉膏可为微生物生长提供_______________ 等营养物质。
(2)倒平板时需要等到灭菌的培养基冷却到_________ ℃时,再在_________ 附近进行。
(3)除用上述方法接种外,还可以采用__________ 接种,但无论是那种方法接种,核心都是要_______________________ 。
(4)上述实验步骤并不完整,请改进:_____________________________ 。
①配置培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨10g、NaCl5g、X20g、H2O1000ml)并制作无菌平板培养基; ②用无菌棉签蘸蒸馏水擦拭手机外壳表面后将无菌棉签浸入100mL的蒸馏水中并充分振荡制成细菌悬液; ③吸取0.1ml细菌悬液,用涂布器将其接种到无菌平板上。重复操作,制成多个接种平板; ④将平板置于37℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题:
(1)该培养基中的成分X通常是
(2)倒平板时需要等到灭菌的培养基冷却到
(3)除用上述方法接种外,还可以采用
(4)上述实验步骤并不完整,请改进:
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【推荐2】四川是我国重要的柑橘产地之一,柑橘果实采后贮藏期间极易受柑橘青霉菌侵染而腐烂,造成重大经济损失,目前主要通过使用化学杀菌剂来控制采后病害。为寻求安全新型的生物杀菌剂,研究者进行了如下实验。请回答下列问题:
(1)PDA培养基配方见下表,该培养基中为微生物提供碳源的是___________ ,配制好的培养基用___________ 法灭菌。
(2)称取10g柑橘根系部位土壤,放入90mL___________ 中,通过梯度稀释,分别得到103、104和105倍的土壤稀释液,再接种于PDA培养基。培养一段时间后,根据菌落的____________ (答出两点)等特征,挑出不同的单菌落接种到新的平板上,纯化培养获得多种不同的待选菌株。
(3)用10%的二甲亚矾水溶剂分别提取不同待选菌株的代谢产物获得代谢产物提取液,将代谢产物提取液分别溶解于PDA培养基中制成若干平板待用,用____________ 制成的平板作为对照组。在每个平板中间接入一枚6mm柑橘青霉菌菌饼,定期观察测量,筛选出____________ 的平板所对应的待选菌株作为最佳菌株。
(4)为了便于后续研究,可以采用____________ 方法对最佳菌种进行长期保存,具体的方法是将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中,_____________ 。
(1)PDA培养基配方见下表,该培养基中为微生物提供碳源的是
成分 | 马铃薯 | 琼脂 | 蔗糖 | 水 | pH |
含量 | 200g | 15~20g | 20g | 1000mL | 自然 |
(3)用10%的二甲亚矾水溶剂分别提取不同待选菌株的代谢产物获得代谢产物提取液,将代谢产物提取液分别溶解于PDA培养基中制成若干平板待用,用
(4)为了便于后续研究,可以采用
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【推荐3】塑料给人们的生活带来了便利,塑料的发明使用曾被誉为白色革命,但它的物理化学性质很稳定又疏水,极难自然降解,导致现在的塑料废弃物被称为白色污染。黄粉虫的幼虫能吃塑料,并降解其中的聚苯乙烯(塑料的最主要成分)。我国北京航空航天大学的研究者们对此进行了系统的研究。
实验一:用13C标记的聚苯乙烯喂食黄粉虫幼虫,一段时间后,不仅检测到黄粉虫幼虫呼吸释放13CO2,还在黄粉虫幼虫体内检测到13C标记的化合物。
实验二:制备黄粉虫幼虫肠道菌悬液,用 ① 均匀涂抹在培养基平板上,将含庆大霉素、青霉素、氯霉素、四环素等的圆形滤纸片置于平板上,再将培养皿 ② 于适宜温度的恒温箱中培养,结果显示含庆大霉素的滤纸片抑菌圈范围最大。
实验三:给黄粉虫幼虫喂食庆大霉素,十天后,再喂食聚苯乙烯,发现黄粉虫幼虫对聚苯乙烯的降解效率几乎为零。
实验四:将黄粉虫幼虫的肠道菌悬液加入含聚苯乙烯薄片的无碳培养基a中培养,以增加聚苯乙烯降解菌的数量;待聚苯乙烯薄片明显变小、变薄,将培养物用 ③ 接种到含聚苯乙烯的无碳培养基b中,培养得到单个菌落;对菌落进行筛选,鉴定出对聚苯乙烯有较强降解能力的微小杆菌和金黄杆菌。
根据以上实验,回答下列问题:
(1)实验一的实验结果说明________________________ 。
(2)实验二中,对滤纸片灭菌应该用______ 法;①处使用的接种工具是______ ,②处培养皿的放置方式是______ 。
(3)实验四的培养基a中的碳源是______ ,培养基a和b中,需要添加琼脂的培养基是培养基______ ;③处接种方法是____________ 。
(4)综合分析实验一~四的结果,简述黄粉虫幼虫能吃塑料并降解聚苯乙烯的原因是__________________ 。据此可判断,黄粉虫与微小杆菌、金黄杆菌的种间关系是____________ 。
实验一:用13C标记的聚苯乙烯喂食黄粉虫幼虫,一段时间后,不仅检测到黄粉虫幼虫呼吸释放13CO2,还在黄粉虫幼虫体内检测到13C标记的化合物。
实验二:制备黄粉虫幼虫肠道菌悬液,用 ① 均匀涂抹在培养基平板上,将含庆大霉素、青霉素、氯霉素、四环素等的圆形滤纸片置于平板上,再将培养皿 ② 于适宜温度的恒温箱中培养,结果显示含庆大霉素的滤纸片抑菌圈范围最大。
实验三:给黄粉虫幼虫喂食庆大霉素,十天后,再喂食聚苯乙烯,发现黄粉虫幼虫对聚苯乙烯的降解效率几乎为零。
实验四:将黄粉虫幼虫的肠道菌悬液加入含聚苯乙烯薄片的无碳培养基a中培养,以增加聚苯乙烯降解菌的数量;待聚苯乙烯薄片明显变小、变薄,将培养物用 ③ 接种到含聚苯乙烯的无碳培养基b中,培养得到单个菌落;对菌落进行筛选,鉴定出对聚苯乙烯有较强降解能力的微小杆菌和金黄杆菌。
根据以上实验,回答下列问题:
(1)实验一的实验结果说明
(2)实验二中,对滤纸片灭菌应该用
(3)实验四的培养基a中的碳源是
(4)综合分析实验一~四的结果,简述黄粉虫幼虫能吃塑料并降解聚苯乙烯的原因是
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【推荐1】β-胡萝卜素具有保护视力、抗氧化、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗骨质疏松、提高免疫力和预防血管硬化等许多重要的生理功能,在食品、药品及保健品领域具有广阔的应用前景。回答下列
问题:
(1)β-胡萝卜素是胡萝卜素中的一种,胡萝卜素与______ 合称类胡萝卜素,可以用纸层析法分离和鉴定。在工业生产上,可以用______ 法从植物体中提取,生产的效率主要取决于____________ ,同时还受到原料颗粒、生产温度和时间等条件的影响。
(2)目前生产胡萝卜素倾向于采用红酵母发酵,红酵母是单细胞的______ (填“真核”或“原核”)生物,该菌种具有生长周期短,营养要求低、易于培养等特点,因此,提高红酵母发酵生产β-胡萝卜素的合成能力成为研究的热点。
(3)现从红色淤泥中筛选出一种生产胡萝卜素的红酵母菌株,可以用______ 或______ 进行接种以便纯化培养,接种时需要对接种环进行______ 处理。若要频繁使用该菌种,应对其采用______ 的方法进行短暂保存。
问题:
(1)β-胡萝卜素是胡萝卜素中的一种,胡萝卜素与
(2)目前生产胡萝卜素倾向于采用红酵母发酵,红酵母是单细胞的
(3)现从红色淤泥中筛选出一种生产胡萝卜素的红酵母菌株,可以用
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【推荐2】泡菜是我国的传统食品之一。
(1)制作泡菜时,所用盐水通常需要煮沸,其目的是___________ 。为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的目的是___________________________________ 。
(2)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化乳酸菌时,首先需要用________ 对泡菜滤液进行梯度稀释。
(3)在示意图A和图B中,________ 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是_____________________ 。
(4)腐乳又称豆腐乳,亦是中国流传数千年的传统民间美食。腐乳制作过程中有多种微生物参与,其中起主要作用的是_________ ,主要利用其产生的________ 酶。通过发酵,豆腐中营养物质的种类________ (填“减少”或“增多”)。
(1)制作泡菜时,所用盐水通常需要煮沸,其目的是
(2)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化乳酸菌时,首先需要用
(3)在示意图A和图B中,
(4)腐乳又称豆腐乳,亦是中国流传数千年的传统民间美食。腐乳制作过程中有多种微生物参与,其中起主要作用的是
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【推荐3】琼脂是一种多糖类物质,是配制固体培养基常用的凝固剂之一。某实验室在处理一批已进行过微生物培养的废弃固体培养基时发现,培养基上的微生物几乎全部死亡,但在其中一个培养基上存在一个正常生长的细菌菌落,该实验室研究人员对此提出“该种细菌能利用琼脂”的假说。据此回答下列问题:
(1)若要证明该假说的正确性,在配制培养基时,应选择以__________ 为唯一碳源的固体培养基进行培养,配制好的培养基需通过____________________ 法进行灭菌。
(2)通过实验证明该假说是正确的,并且发现该琼脂分解菌能分泌脱色酶,该酶可分解糖蜜发酵废液中的黑褐色色素。欲从获得的菌种中分离出分解黑褐色色素能力强的细菌,可在培养基中加入从糖蜜发酵废液中提取到的黑褐色色素,采用的接种方法是____________________ 。适宜条件下培养一段时间,发现菌落周围出现圆形凹穴和透明圈,原因是__________________ ;应选择凹穴大且周围透明圈大的菌落进行扩大培养。欲长期保存该菌种,可以采用__________ 法。
(3)实验中需要及时灭菌或消毒,才能保证实验结果的准确性,下列可以使用干热灭菌法灭菌的是__________ 。
(1)若要证明该假说的正确性,在配制培养基时,应选择以
(2)通过实验证明该假说是正确的,并且发现该琼脂分解菌能分泌脱色酶,该酶可分解糖蜜发酵废液中的黑褐色色素。欲从获得的菌种中分离出分解黑褐色色素能力强的细菌,可在培养基中加入从糖蜜发酵废液中提取到的黑褐色色素,采用的接种方法是
(3)实验中需要及时灭菌或消毒,才能保证实验结果的准确性,下列可以使用干热灭菌法灭菌的是
A.实验者的皮肤 | B.培养基 | C.吸管 | D.玻璃棒 | E.培养皿 |
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解题方法
【推荐1】为提高作物产量,种植业往往使用大量的氮素化肥,既增加了生产成本,又易造成环境污染。自生固氮菌营独立生活,为改变这种现状带来了希望。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究,部分实验流程如下图1.回答下列问题:(1)土壤是微生物的天然培养基,该培养基能为微生物的生长提供的四大营养物质分别是_____ 。
(2)下表为两种培养基的配方,步骤④应选其中的培养基_____ 。
(3)纯化培养时,需同时进行未接种培养基的培养,目的是_____ 。
(4)④的平板上统计结果数一般用_____ 表示,一般选择数目_____ 在范围的平板上计数。若甲研究员做这个实验,统计的菌落数分别是132、136、128,则每克土壤中含有的固氮菌为_____ 个,运用这种方法统计的结果往往较实际值_____ 。原因是_____ 。
(5)图3是某同学利用不同于图1方法从稀释液中分离菌株的示意图。下列对其操作及结果的叙述不正确的有_____ (填字母)。a.操作前用无水乙醇对双手进行消毒处理
b.划线时将沾有菌种的接种环插入培养基
c.只有在5这一区域中才能得到所需菌落
d.整个过程需要对接种环进行6次灼烧
(2)下表为两种培养基的配方,步骤④应选其中的培养基
培养基类型 | 培养基组分 |
培养基甲 | 甘露醇、、、NaCl、、、蒸馏水 |
培养基乙 | 甘露醇、、、NaCl、、、蒸馏水、琼脂 |
(4)④的平板上统计结果数一般用
(5)图3是某同学利用不同于图1方法从稀释液中分离菌株的示意图。下列对其操作及结果的叙述不正确的有
b.划线时将沾有菌种的接种环插入培养基
c.只有在5这一区域中才能得到所需菌落
d.整个过程需要对接种环进行6次灼烧
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【推荐2】养殖场排放的废水中含有大量的大肠杆菌等微生物,需要经过沉淀、过滤和发酵等处理后才能排放,国家对养殖场废水处理后的一级排放标准是大肠杆菌数不超过1×104个/L。为探究某养殖场排放的废水是否符合国家标准,生物学习小组对其中的大肠杆菌含量进行了检测,检测过程及结果如图所示。回答下列问题:
(1)过程①的操作是取1mL养殖场处理后的污水加入在盛有______ 的a试管中,得到稀释10倍的培养液,过程②的操作与过程①相似,则b试管中培养液的稀释倍数最终为______ 倍。
(2)实验室培养大肠杆菌常用______ 培养基,同时需要在培养基中加入_______ ,以便根据菌落的颜色(黑色)来鉴别大肠杆菌。配制培养基时应_______ (填“先灭菌再调节pH”或“先调节pH再灭菌”),原因是____ 。
(3)若上述实验过程操作规范,且I号三个培养皿中大肠杆菌的菌落数分别为37、38、42,则该养殖场处理后的污水中大肠杆菌数约为_____ 个/mL,该养殖场处理后的污水是否达到国家规定的一级排放标准?___ _____ 。
(4)针对Ⅱ号培养皿的接种方法,下列的说法或操作正确的是____
(1)过程①的操作是取1mL养殖场处理后的污水加入在盛有
(2)实验室培养大肠杆菌常用
(3)若上述实验过程操作规范,且I号三个培养皿中大肠杆菌的菌落数分别为37、38、42,则该养殖场处理后的污水中大肠杆菌数约为
(4)针对Ⅱ号培养皿的接种方法,下列的说法或操作正确的是____
A.只能在培养基表面上划三到五个区 |
B.通常每个划线区划三到五条平行线 |
C.划线时不能将最后一区与第一区相连 |
D.每次划线前后要对接种针用酒精消毒 |
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解题方法
【推荐3】白色污染问题已引起全社会广泛关注,降解塑料的研究和开发是解决白色污染的理想途径之一。地膜的主要成分是聚乙烯[化学式为(C2H4)n]。残留在土壤中的地膜难以被降解,为筛选出高效降解地膜的细菌,研究人员进行了如图所示的操作。X培养基是选择培养基,聚乙烯分解菌在该培养基上会形成抑菌圈。回答下列同题:(1)在筛选聚乙烯分解图过程中,应选择__________ 的土壤,制作培养基时,应将________ 作为X培养基中的唯一碳源。
(2)为了证明所配制X培养基具有选择作用,在恒温培养前,需要将接种后的X培养基平板和接种后的完全培养基平板同时进行培养,待两种培养基平板上的菌落生长稳定时,比较两种平板培养基上的菌落数。若结果为_______________ ,则可证明上述观点。
(3)可挑选X培养基中的__________ (填序号)中的单菌落接种到Y培养基上进行培养。配制Y培养基时,其pH一般调至__________ 。
(4)在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1mL,培养一段时间后,平板上的菌落数分别为28、50,52,54,313,则每升原菌液样品中细菌数为_________ 个。
(2)为了证明所配制X培养基具有选择作用,在恒温培养前,需要将接种后的X培养基平板和接种后的完全培养基平板同时进行培养,待两种培养基平板上的菌落生长稳定时,比较两种平板培养基上的菌落数。若结果为
(3)可挑选X培养基中的
(4)在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1mL,培养一段时间后,平板上的菌落数分别为28、50,52,54,313,则每升原菌液样品中细菌数为
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