人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品。科学家培育出转入溶菌酶基因山羊以大规模生产人溶菌酶(从乳汁中提取),过程如图11所示。其中编号①—⑨表示过程;质粒S中的标记基因Leu控制合成亮氨酸,标记基因GFP控制合成绿色荧光蛋白。表5为四种限制酶的识别序列及切割位点。
(1)图中涉及到的生物技术有______________ 。
(2)物质B是用_____________ 限制酶切割的结果。
(3)下列能成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞的必备过程是_____________。
(4)若山羊成纤维细胞中,含重组质粒T的细胞数与含质粒S的细胞数之比为1:6,增大DNA连接酶用量能否提高上述比值?______________ 。原因是______________ 。
(5)若已知利用酶的分离提纯技术可从乳汁获得人溶菌酶,请使用“酶的分离提纯”和“抑菌实验”等技术设计实验,证明人溶菌酶转基因羊培育成功且产生的人溶菌酶具有活性。请阐述实验设计思路_____________ 。
限制酶 | BamHI | Bgl II | Hind II | XbaI |
识别序列和切割位点 | G↓GATCC | A↓GATCT | A↓AGCTT | T'↓CTAGA |
(1)图中涉及到的生物技术有
(2)物质B是用
(3)下列能成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞的必备过程是_____________。
A.培养基中加入亮氨酸,培养一段时间后观察,细胞显示出绿色荧光 |
B.培养基中加入亮氨酸,培养一段时间后观察,细胞不显示出绿色荧光 |
C.培养基中不加亮氨酸,培养一段时间后观察,细胞不显示出绿色荧光 |
D.培养基中不加亮氨酸,培养一段时间后观察,细胞显示出绿色荧光 |
(5)若已知利用酶的分离提纯技术可从乳汁获得人溶菌酶,请使用“酶的分离提纯”和“抑菌实验”等技术设计实验,证明人溶菌酶转基因羊培育成功且产生的人溶菌酶具有活性。请阐述实验设计思路
更新时间:2022-06-12 08:36:52
|
相似题推荐
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
【推荐1】蛋白质W是某种病毒的抗原。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路,制备一种膀胱生物反应器来获得W,基本过程如图所示。
回答下列问题:
(1)步骤①中需要选择的启动子是____________________ 使目的基因能在膀胱上皮细胞中特异性表达,分泌到尿液中,随尿液排出体外。W基因的序列已知并且基因较小,那么获取W基因的方法可以是_________________ 。
(2)①过程需要DNA连接酶,根据DNA的连接酶的来源不同,可以将这些酶分为__________ 和______________ 。构建重组表达载体中的标记基因的作用是_______________________________ 。
(3)④过程的生理学基础是之一是受体对移入的外来胚胎基本_______________________ 反应,这为外来胚胎在受体子宫中存活提供可能。
(4)从上述流程可知,转基因动物发生的可遗传变异是_________________ 。对从尿液中提取的蛋白质还要进行检测以确定是否含有W,常采用的方法是___________________ 。
回答下列问题:
(1)步骤①中需要选择的启动子是
(2)①过程需要DNA连接酶,根据DNA的连接酶的来源不同,可以将这些酶分为
(3)④过程的生理学基础是之一是受体对移入的外来胚胎基本
(4)从上述流程可知,转基因动物发生的可遗传变异是
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐2】请回答下列关于基因工程的相关问题:
(1)在标准的PCR体系中需要加入___________ 和___________ 种引物,引物的作用是___________ 。
(2)构建基因表达载体时,需要用___________ 将目的基因与载体连接,因此需要在目的基因两侧加上酶切位点,若在PCR体系中加入细胞DNA作为复制模板,复制___________ 次可以得到含有双酶切位点的目的基因。
(3)用两种酶切割目的基因和质粒要优于同种酶切割,其优点是______________________ (答出两点)。
(4)若要用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞,应选用下图中的___________ (填字母)作为表达载体(图中→代表目的基因,箭头方向代表转录方向;Bar基因是标记基因),原因是______________________ 。
(1)在标准的PCR体系中需要加入
(2)构建基因表达载体时,需要用
(3)用两种酶切割目的基因和质粒要优于同种酶切割,其优点是
(4)若要用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞,应选用下图中的
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
解题方法
【推荐3】人体内DU145细胞是一种癌细胞,该细胞中的XIAP基因能抑制凋亡和促进癌细胞的增殖。科研人员向DU145细胞导入某目的基因,其直接表达的shRNA经过运输、剪切等作用,与XIAP转录的mRNA发生结合而使XIAP基因沉默,过程如图所示。图中Dicer是一种核糖核酸内切酶,RISC称为RNA诱导沉默复合体,①~⑨代表生理过程。请回答下列问题:(1)图中①表示目的基因的_____ 过程,该过程需要的酶是_____ ,图中⑨过程A、B核糖体合成的肽链的氨基酸序列_____ (填“相同”或“不同”),若该过程某tRNA的反密码子序列5'-GAA-3',则其识别的密码子序列为:5'-_____ -3'。
(2)Dicer通过过程③切下shRNA的茎环结构形成siRNA,其作用的化学键是_____ ,RISC中单链RNA含有的碱基序列越多,则RISC作用的靶基因的种类越_____ 。
(3)过程④siRNA与RISC结合后,RISC发挥水解作用,去掉其中一条RNA链,留下的链可以与_____ 碱基互补,过程⑥说明RISC还具有_____ 功能,从而导致_____ 不能合成,癌细胞的增殖受到抑制。
(2)Dicer通过过程③切下shRNA的茎环结构形成siRNA,其作用的化学键是
(3)过程④siRNA与RISC结合后,RISC发挥水解作用,去掉其中一条RNA链,留下的链可以与
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐1】稻米胚乳直链淀粉含量高会导致食用品质差。研究发现,水稻蜡质基因(Wx)编码直链淀粉合成酶。Wx基因模板链第226位碱基为G,此时胚乳中直链淀粉含量最高(表现为非糯性),记为品种G;若该位点突变成T,胚乳中直链淀粉的合成水平会降低(表现为糯性),记为品种T。已知品种G和品种T杂交,后代均表现为非糯性,下图表示品种G和品种T中Wx基因的部分碱基序列,请回答下列问题:
(1)研究人员以待测水稻叶片总DNA为材料进行PCR扩增,若引物1的核苷酸序列为5'-GCTTCACTTCTCTGCTTGTC-3',则引物2的核苷酸序列为5'-______ -3'。
(2)研究人员对PCR 扩增产物经AccⅠ酶(已知AccⅠ酶的识别位点为,两引物之间无另外的AccⅠ酶的识别位点)切割后进行______ 可以检测出该待测水稻属于哪种品种。若检测结果只观察到长度为______ bp的DNA条带,则表明该水稻为品种T。
(3)将品种T的Wx基因与载体结合构建基因表达载体的过程中用到的工具酶有______ 。若利用我国科学家独创的目的基因导入方法获得转基因水稻,此种方法______ (填“需要”或“不需要”)进行植物组织培养,原因是______ 。
(4)若利用基因工程改造品种G,获得胚乳直链淀粉含量低的新品种水稻,可以将Wx基因______ (填“正向”或“反向”)接入质粒,导入品种G 的受体细胞进而获得转基因水稻,从______ 水平抑制Wx基因表达。
(1)研究人员以待测水稻叶片总DNA为材料进行PCR扩增,若引物1的核苷酸序列为5'-GCTTCACTTCTCTGCTTGTC-3',则引物2的核苷酸序列为5'-
(2)研究人员对PCR 扩增产物经AccⅠ酶(已知AccⅠ酶的识别位点为,两引物之间无另外的AccⅠ酶的识别位点)切割后进行
(3)将品种T的Wx基因与载体结合构建基因表达载体的过程中用到的工具酶有
(4)若利用基因工程改造品种G,获得胚乳直链淀粉含量低的新品种水稻,可以将Wx基因
您最近一年使用:0次
非选择题-实验题
|
适中
(0.65)
【推荐2】[生物——选修3:现代生物科技专题]香蕉巴拿马病是一种由真菌(TR4)引起的香蕉传染病,由于杀菌剂无法杀死TR4,因此发病地区30年以上不能种植香蕉。澳大利亚生物技术专家利用一种不受TR4影响的野生香蕉克隆出名为RGA2的抗病基因。请回答下列问题:
(1)将野生香蕉中提取的RGA2基因进行受体细胞外克隆时,依据的原理是___________ ,反应体系中加入的物质有RGA2基因、______________________ 。
(2)将RGA2基因拼接在运载体上导入受体细胞,而不是将RGA2基因片段直接导入受体细胞,原因是___________ (至少答出两条)。
(3)研究发现,香蕉细胞中所含RGA2基因片段数量的多少,会影响到香蕉植株抗病能力的强弱。为探究导入香蕉细胞中的RGA2基因片段的最佳数量,实验的设计思路是______________________ 。
(1)将野生香蕉中提取的RGA2基因进行受体细胞外克隆时,依据的原理是
(2)将RGA2基因拼接在运载体上导入受体细胞,而不是将RGA2基因片段直接导入受体细胞,原因是
(3)研究发现,香蕉细胞中所含RGA2基因片段数量的多少,会影响到香蕉植株抗病能力的强弱。为探究导入香蕉细胞中的RGA2基因片段的最佳数量,实验的设计思路是
您最近一年使用:0次
非选择题-实验题
|
适中
(0.65)
解题方法
【推荐3】血管新生在肿瘤发生和发展中起关键作用,为了研究血管生成素(Ang)是否能促进血管生成及作用原理,科学家构建了绿色荧光蛋白(GFP)基因和血管生成素融合基因,将其导入大肠杆菌来生产GFP -Ang融合蛋白,过程如图,字母a~h代表引物,序号①~⑤表示过程。(1)Ang的cDNA可在细胞中提取mRNA后经___ 获得。为了过程②形成正确的GFP-Ang融合基因,在进行过程①(PCR)时需选择正确的引物并在引物___ (填字母)的5'端添加BamHⅠ限制酶识别序列,且添加的识别序列位于CFP基因中终止密码子编码序列的___ (“内侧”或“外侧”)。
(2)过程③的目的是___ 。此时,为了使融合基因定向插入载体,要选用___ 两种限制酶切割融合基因和载体。生产中需要大肠杆菌在某些特定诱导物作用下表达GFP-Ang融合蛋白,则要在载体上构建___ 。
(3)以大肠杆菌作为受体细胞的优点有___ (答出两点)。经过程④后的大肠杆菌需培养在含有___ 的培养液中,破碎大肠杆菌并提取到发绿色荧光的物质就是GFP-Ang融合蛋白。
(4)鉴定GFP-Ang融合蛋白与天然Ang作用效果差异,科学家取鸡胚分别用缓冲液、缓冲液溶解的天然Ang、缓冲液溶解的CFP-Ang融合蛋白处理,统计鸡胚毛细血管生成情况,结果如下表。
统计结果说明了___ 。若进一步观察到绿色荧光分布于毛细血管表面,则说明,Ang发挥作用的方式可能是与细胞表面的___ 相结合来实现的。
(2)过程③的目的是
(3)以大肠杆菌作为受体细胞的优点有
(4)鉴定GFP-Ang融合蛋白与天然Ang作用效果差异,科学家取鸡胚分别用缓冲液、缓冲液溶解的天然Ang、缓冲液溶解的CFP-Ang融合蛋白处理,统计鸡胚毛细血管生成情况,结果如下表。
组别 | 血管数量 |
缓冲液 | 7.38 |
缓冲液溶解的天然Ang | 36.5 |
缓冲液溶解的GFP-Ang融合蛋白 | 29.94 |
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐1】2022年8月,九价HPV疫苗的使用人群扩展到9~45岁适龄女性。研究发现,人类99.7%的宫颈癌是由人乳头瘤病毒(HPV)持续感染引起的。科研人员将HPV病毒表面L1衣壳蛋白基因构建重组质粒,导入大肠杆菌制备HPV疫苗,过程如下图所示。请回答下列问题:
(1)构建重组质粒之前,可利用PCR技术扩增L1基因,此时需要在反应体系中添加的有机物有
(2)构建重组质粒时应选择的限制酶为
(3)有人认为,与传统的减毒或灭活疫苗相比,重组疫苗安全性更高,试从疫苗的结构角度推测其这一观点的合理性:
您最近一年使用:0次
非选择题
|
适中
(0.65)
【推荐2】科学家通过基因工程方法,将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株体细胞内,并成功实现了表达,从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。回答问题:
(1)培育转基因抗虫棉的核心步骤是_____________________ 。
(2)将目的基因导入普通棉株体细胞的方法是_______________ 。Bt毒蛋白基因是否已经成功整合到染色体DNA上,可通过____________ 技术进行检测;如果想从个体水平鉴定转基因抗虫棉是否培育成功,应采取的方法是______________________________ 。
(3)Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞中并成功实现表达的过程,在基因工程中称为_________________ 。
(4)抗虫棉能抗棉铃虫的生态效果显著,有人认为抗虫棉就是无虫棉花,不必防治害虫,你认为这种观点是_____________ (填“正确”或“错误”),理由是_________________________ 。
(1)培育转基因抗虫棉的核心步骤是
(2)将目的基因导入普通棉株体细胞的方法是
(3)Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞中并成功实现表达的过程,在基因工程中称为
(4)抗虫棉能抗棉铃虫的生态效果显著,有人认为抗虫棉就是无虫棉花,不必防治害虫,你认为这种观点是
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
【推荐3】疫苗接种是当前新冠肺炎疫情防控工作的一项重要举措,我国科学家研发了多种新冠疫苗,其中重组腺病毒疫苗研发策略是:将新冠病毒的S蛋白基因整合到腺病毒DNA中,形成表达S蛋白的重组腺病毒,注射到健康人体内,腺病毒可侵染人体细胞,达到预防新冠病毒感染的效果。
(1)与直接将S蛋白注射到体内作为疫苗相比,重组腺病毒疫苗的优点是可以引起人体产生__________ 免疫,更有效清除病毒。
(2)为了构建重组腺病毒DNA,需要将S蛋白基因插入腺病毒DNA中,由于腺病毒DNA分子较大,传统的限制性核酸内切酶和DNA连接酶处理效率较低,所以采取如图1所示方法获得重组腺病毒DNA。
将质粒1和质粒2共同导入受体细胞中,据图推测,最终重组线性DNA分子上,X所示的原件应该为_____________ 。
(3)生产疫苗的过程是将上述重组线性DNA分子(不编码病毒复制必需的E1蛋白)导入到293细胞系(该细胞系可表达人体细胞没有的E1蛋白),最终包装成完整的腺病毒。这种方式生产的疫苗由于重组腺病毒_________________________________ ,从而提高了疫苗的安全性。
(4)为了检测疫苗的效果,科学家用不同方式给雪貂接种重组腺病毒疫苗后,感染新冠病毒,一段时间后检测新冠病毒含量,结果如图2,说明重组腺病毒疫苗_______________ ,且效果最好的免疫方式是______________ 。
(5)作为年满18岁的学生,你可以采取哪些行动响应国家疫苗接种的政策_________ (两方面)?
(1)与直接将S蛋白注射到体内作为疫苗相比,重组腺病毒疫苗的优点是可以引起人体产生
(2)为了构建重组腺病毒DNA,需要将S蛋白基因插入腺病毒DNA中,由于腺病毒DNA分子较大,传统的限制性核酸内切酶和DNA连接酶处理效率较低,所以采取如图1所示方法获得重组腺病毒DNA。
将质粒1和质粒2共同导入受体细胞中,据图推测,最终重组线性DNA分子上,X所示的原件应该为
(3)生产疫苗的过程是将上述重组线性DNA分子(不编码病毒复制必需的E1蛋白)导入到293细胞系(该细胞系可表达人体细胞没有的E1蛋白),最终包装成完整的腺病毒。这种方式生产的疫苗由于重组腺病毒
(4)为了检测疫苗的效果,科学家用不同方式给雪貂接种重组腺病毒疫苗后,感染新冠病毒,一段时间后检测新冠病毒含量,结果如图2,说明重组腺病毒疫苗
(5)作为年满18岁的学生,你可以采取哪些行动响应国家疫苗接种的政策
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
【推荐1】透明颤菌血红蛋白基因vgb表达产物VHb蛋白能使其在低氧的环境中生长良好。顶头孢霉是好氧性真菌,其发酵产物头孢菌素C有很大的市场需求量,但低氧环境影响其产量,传统发酵生产的增氧成本高。为提高产量科研人员将透明颤菌血红蛋白基因vgb基因和顶头孢霉pcpC启动子进行PCR拼接,并与质粒1构建重组质粒,如下图。
注:hph是潮霉素抗性基因,Vgb基因与hph基因共用终止子。
回答下列问题:
(1)PCR过程需要设计引物,引物的作用是_______ 。
(2)据图所示,重叠延伸PCR拼接时,若启动子启动方向与引物3延伸方向一致,引物2和引物3的5´端需分别添加_________ 序列。拼接形成重组基因的目的是_______ 。
(3)利用含有________ 的选择培养基筛选菌种,最后从个体生物学水平上鉴定,若______ ,则表示转化成功。
(4)为验证转化成功的重组菌株遗传稳定性,可将菌株在_______ (含/不含)潮霉素的液体培养基中连续转接10代,取第10代菌液采用________ 法接种到_______ (含/不含)潮霉素的固体培养基上,若能在固体培养基上生长,表明重组菌株遗传稳定性良好。
注:hph是潮霉素抗性基因,Vgb基因与hph基因共用终止子。
回答下列问题:
(1)PCR过程需要设计引物,引物的作用是
(2)据图所示,重叠延伸PCR拼接时,若启动子启动方向与引物3延伸方向一致,引物2和引物3的5´端需分别添加
(3)利用含有
(4)为验证转化成功的重组菌株遗传稳定性,可将菌株在
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐2】角蛋白酶能降解角蛋白,在饲料工业中具有广阔的应用前景。某实验小组将角蛋白酶基因(KerA)导人大肠杆菌中,获得了能高效表达角蛋白酶的工程菌,下图为含KerA基因的外源DNA和质粒,EcoRI、BamHI、SalI、XhoI均为限制酶,其切割位点如图所示。Kanr、Tcr分别为卡那霉素抗性基因、四环素抗性基因。请回答下列相关问题:
(1)据图可知,构建重组质粒时选用的工具酶包括________ 和DNA连接酶,这些工具酶作用的化学键________ (填“相同”或“不同”)。
(2)利用PCR技术扩增KerA基因时,需根据其两端序列设计引物。若KerA两端部分序列为一5'AATGGA……ATTCTC-3',则需要设计的一对引物序列是________ 。
(3)将目的基因导入大肠杆菌时,常出现三种情况:未转化的细菌、含空载体(普通质粒)的细菌、含重组质粒的细菌。可在添加有________ 的培养基中进行初步筛选,能在该培养基上生长的是________ 。
(4)转基因技术除了在微生物领域取得广泛的成果,在动植物领域也取得了巨大的成果。下列有关转基因技术的叙述,正确的是________ 。
①我国对农业转基因生物实行了标识制度
②只要有证据表明转基因产品有害,就应该禁止转基因技术的应用
③转基因技术本身是中性的,应理性看待该技术
④转基因植物的基因来自自然界,不会产生安全性问题
(1)据图可知,构建重组质粒时选用的工具酶包括
(2)利用PCR技术扩增KerA基因时,需根据其两端序列设计引物。若KerA两端部分序列为一5'AATGGA……ATTCTC-3',则需要设计的一对引物序列是
(3)将目的基因导入大肠杆菌时,常出现三种情况:未转化的细菌、含空载体(普通质粒)的细菌、含重组质粒的细菌。可在添加有
(4)转基因技术除了在微生物领域取得广泛的成果,在动植物领域也取得了巨大的成果。下列有关转基因技术的叙述,正确的是
①我国对农业转基因生物实行了标识制度
②只要有证据表明转基因产品有害,就应该禁止转基因技术的应用
③转基因技术本身是中性的,应理性看待该技术
④转基因植物的基因来自自然界,不会产生安全性问题
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
【推荐3】研究人员从土壤中分离获得能分解纤维素的细菌(A菌),从A菌中提取一种纤维素酶基因(CBHⅡ,长度为1.4kbp)并进行PCR扩增,然后与高效表达载体pUT质粒(长度为11.7kbp)连接构建成重组质粒并导入A菌,从而获得分解纤维素能力更强的工程菌(B菌)。回答下列问题:
(1)CBHⅡ基因两端需添加相关酶切位点才能与pUT质粒连接,因此在扩增CBHⅡ基因时,需要在两种引物上分别添加______ 碱基序列和______ 碱基序列。PCR中需要添加引物的原因是______ 。PCR反应体系中除了添加模板和引物外,还需添加______ 和______ ;扩增程序中,复性的目的是____________ 。
(2)为鉴定重组质粒是否构建成功,将重组质粒导入A菌,并将其接种在含______ 的培养基上培养,然后提取3个不同菌落的质粒分别进行双酶切验证,将酶切片段和CBHⅡ基因分别进行电泳,结果如图2所示。据此分析,菌落______ 中成功导入了重组质粒。质粒中高效表达启动子是______ 识别和结合的部位。
限制酶 | 识别序列及酶切位点 |
Bgl I | A↓GATCT |
BstE II | G↓GTAACC |
Sac I | G↓AGCTC |
Msp I | G↓CGG |
(1)CBHⅡ基因两端需添加相关酶切位点才能与pUT质粒连接,因此在扩增CBHⅡ基因时,需要在两种引物上分别添加
(2)为鉴定重组质粒是否构建成功,将重组质粒导入A菌,并将其接种在含
您最近一年使用:0次