【推荐1】细胞周期可分为分裂间期和分裂期（M期），根据DNA合成情况，分裂间期又分为G1期（蛋白质合成）、S期（DNA复制期）和G₂期（蛋白质合成）。为了保证细胞周期的正常运转，细胞自身存在着一系列监控系统检验点。研究证明，细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）在细胞顺利通过检查点中发挥着重要作用。CDK可与细胞周期蛋白（Cyclin）形成CDK/Cyclin复合物，推动细胞跨越细胞周期各时期转换的检查点，且不同的CDK/Cyclin复合物在细胞周期不同时期的作用不同（如图）。请据图回答下列问题。
   
(1)细胞有丝分裂的重要意义在于通过染色体的________保持亲子代细胞之间的遗传稳定性。
(2)若将同步培养的G₁期的HeLa细胞（一种癌细胞）与S期的HeLa细胞（预先紫外线照射去核）进行电融合，结果发现G₁期细胞提前进入了S期。这一现象最可能的原因是_______
(3)图中检验染色体是否都与纺锤体相连的细胞周期蛋白最可能的是__________________。
(4)据图和所学知识分析，若要使更多细胞阻滞在G₁/S检查点，可采取的思路或者措施包括______

A．加入DNA合成抑制剂

B．抑制CyclinE活性

C．抑制脱氧核苷酸的吸收

D．加入呼吸抑制剂

【推荐2】科研人员为研究二甲双胍对人胰腺癌细胞增殖的影响，完成如下实验。
（1）癌细胞的增殖特点是________。细胞周期是指从一次分裂完成时开始，到下一次分裂________时为止，包括分裂间期和分裂期（M）两个阶段，其中分裂间期完成________，包括G₁期、S期和G₂期。
（2）科研人员用不同浓度二甲双胍处理胰腺癌细胞48小时，测定并统计得到图１所示结果。基因P是一种新发现的抑癌基因。科研人员进一步测定，用不同浓度二甲双胍处理的胰腺癌细胞中基因P的表达量，结果见图2。

①据图1分析，8．0 mmol二甲双胍处理胰腺癌细胞，可将其阻滞于________期，从而起到________胰腺癌细胞增殖的作用。
②据图2推测，二甲双胍能够________基因P的表达，从而________。
（3）综上所述，科研人员是从分子与________水平研究二甲双胍对胰腺癌细胞的影响机制，为后续癌症治疗提供研究的方向。

【推荐3】图甲表示小鼠上皮细胞一个细胞周期的4个阶段（分裂间期包括G₁、S和G₂期。G₁期主要合成RNA和蛋白质；S期是DNA合成期；G₂期DNA合成终止，合成RNA及蛋白质；分裂期即M期）。图乙表示用流式细胞仪测定的细胞群体中处于不同时期的细胞数量和核DNA的相对含量。据图回答下列问题：

   

(1)用图甲中所示字母与箭头表示一个完整的细胞周期____。在电子显微镜下观察处于M期的细胞，可见由细胞两极的____发出星射线。在M期，染色单体的消失发生在____期，染色体数与核DNA数之比为1：2的时期是____期。
(2)图乙中细胞数量呈现两个峰值，两个峰值之间（不含峰值）的细胞对应图甲中的____期细胞。细胞有丝分裂的重要意义是将亲代细胞的染色体经过复制之后，精确地____到两个子细胞中。由于染色体上有____，从而在细胞的亲代和子代之间保持了遗传的稳定性。
(3)若向小鼠上皮细胞培养液中加入过量胸苷，处于S期的细胞立刻被抑制，而处于其他期的细胞不受影响。现测得小鼠肠上皮细胞细胞周期各阶段时间如下表所示：

分裂时期	分裂间期			分裂期	合计
	G1	S	G2	M
时长/h	3.4	7.9	2.2	1.8	15.3

预计加入过量胸苷约____h后，会有部分细胞停留在S期，其他细胞应该停留在G₁期与S期的交界处。
(4)下列是关于细胞周期过程中细胞内变化的叙述，能正确表示一个细胞周期内分裂过程的顺序是____（用序号和箭头表示）。
①两个相同核DNA分子完全分开
②出现放射状排列的细丝
③中心体发生倍增
④着丝粒排列在一个平面上
(5)某同学探究相关因素对洋葱根尖细胞有丝分裂的影响，部分结果如下（注：有丝分裂指数=分裂期细胞数/观察细胞总数×100%）：

处理	CuSO4浓度（mol/L）	0		0.05		0.10		0.20
	取材时间（h）	24	48	24	48	24	48	24	48
实验结果	有丝分裂指数（%）	6.97	7.51	6.46	6.28	5.84	5.44	5.73	4.27

该实验的自变量有____；根据实验结果分析，可以得到的结论有____。

【推荐1】SLA-2基因是猪白细胞抗原基因，在动物免疫应答中发挥作用。为研究SLA-2基因的结构和功能，科研人员克隆到SLA-2基因，并在构建真核表达质粒后，转染猪肾上皮细胞，进行后续研究，其主要过程如下图（SLA-2基因长度为1100bp，质粒B的总长度为4445bp，质粒中数字代表在京限制酶切点与复制原点间的距离）。请回答：

限制酶	BclⅠ	NotⅠ	XhaⅠ	Sau3AⅠ
识别序列及切割位点	T↓GATCA ACTAG↑T	GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG	T↓CTAGA AGATC↑T	↓GATC CTAG↑

(1)从猪基因组中特异地克隆出SLA-2基因的关键是_______，依据基因片段的大小，实验室可利用_______技术初步鉴定该基因。
(2)限制酶BclI与Sau3AI切割相同DNA形成的黏性末端是否相同?_______，其中_______在该DNA上的切点可能更多。
(3)下列引物序列中，图示过程①中的引物是_______。为提出SLA-2基因的表达量，研究人员同时对基因的5'序列进行密码子优化设计（如GGT优化为GGC），优化的序列位于基因的________（编码区/编码区上游/编码区下游），这种优化实现变异属于_______。
①5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAATCCTC
②5'-GTTGCGGCCGCTCACACTGTGGCTTGGTAACAC
③5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAATCCTC
④5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGCCCTTGGTC
(4)过程②和过程⑤中均构建了重组质粒，其中属于真核表达质粒是在过程_______中构建的，这类表达质粒上必须有目的基因、_______等结构，其目的是_______。

【推荐2】科研团队通过转基因获得了一种大肠杆菌工程菌，成为监测残留在生物组织或环境中的四环素水平的“报警器”，其监测原理如图1所示，天然大肠杆菌不具备图1中所示基因。

(1)在上述研究中，需导入天然大肠杆菌的目的基因有________。（选填序号）（多选）
①四环素合成相关基因 ②GFP 基因 ③TetR基因 ④RNA 聚合酶基因
(2)基因工程中最核心的步骤是________，其目的是________。
(3)据图1，当环境中不含四环素时，该大肠杆菌工程菌________（选填“能发出”“不发出”）荧光；环境中四环素水平越高，该种大肠杆菌工程菌的荧光________（选填“增强”“减弱”“不变”）。试概述该种四环素检测方法的原理：________。
(4)图2是2个DNA片段、质粒及其上的限制性内切核酸酶的识别序列的分布情况；其中质粒上的Amp^r代表青霉素抗性基因。表为相关限制性内切核酸酶的识别序列与切割位点。

限制酶	EcoRI	XbaI	SpeI	BamHI
识别序列及切割位点

则，BamHI酶切后产生的黏性末端为________。若要拼接DNA片段1和2，结合图2和上表中信息，在特定工具酶作用下能成功拼接的位点处碱基序列为________。（选填下表中序号）

编号	①	②	③	④
拼接位点处的碱基序列

(5)研究人员设计了一个同时含DNA片段1和2的重组质粒的拼接方案，结合图表信息，你认为最终建构成功的重组质粒示意图最合理的是__________。

(6)下列操作能够证明重组质粒和大肠杆菌工程菌建构成功的方法及现象有         。

A．通过琼脂糖凝胶电泳实验证明重组质粒的大小符合预期

B．大肠杆菌工程菌不能在含有青霉素的培养基上生长

C．用显微镜观察重组质粒上的外源 DNA 片段的碱基序列

D．四环素浓度变化能引起大肠杆菌工程菌荧光强度的相应改变

(7)为提高对环境中四环素水平监测的有效性，研究人员将GFP的第65位丝氨酸突变成苏氨酸后，增强了绿色荧光稳定性和强度。该项技术属于_________。
①细胞工程   ②蛋白质工程   ③基因的定点突变

【推荐3】植酸酶是饲料生产中必需的一种酶，为高效、大量获得耐高温植酸酶，研人员将耐高温植酸酶基因转入酵母菌中进行表达。请回答下列问题。
(1)科研人员以耐高温植酸酶的氨基酸序列为基础设计DNA序列，确保该序列转录出的mRNA中含有较多酵母菌的偏爱密码子（指翻译同一氨基酸的密码子中酵母菌使用较多的密码子），该做法的意义是______。在设计好DNA序列后，通过______（方法）获得DNA片段。
(2)将上一步中获得的DNA片段利用特定引物进行PCR反应，为了使其能顺利插入下图所示的表达载体中（图中箭头方向代表基因表达方向），应该选择的引物是______。将PCR后的产物插入表达载体中，需要使用的工具酶是限制酶和______。

限制酶	识别序列
EcoRI	5'-GIAATTC-3'
BglII	5'-AIGATCT-3'
Xhol	5'-CLTCGAG-3'
NotI	5'-GClGGCCGC-3'

引物a：5'-CTCGAGAAAAGAGAGGCTGAGGCTTGCGACACCGTTGACTTG-3'
引物b：5'-AGATCTCGATCGTAGCTCGTAGCTAGCTACGCTATATATCGTCAC-3'
引物c：5'-GCGGCCGCTTAGGAGAAGCATTCACCCCAGTTAC-3'
引物d：5'-GAATTCACGTAGCTGACTGCTGCTAGCCCGGATCCCTAGTCC-3'
(3)将重组质粒与酵母菌混合，并施加适宜的电击，使酵母菌转化为感受态，感受态指微生物______的状态，感受态细胞质膜的通透性变______（选填“大”或“小”）。
(4)研究使用的酵母菌是组氨酸营养缺陷型，并能利用甲醇作为唯一碳源，但植酸酶合成基因整合到酵母菌染色体上时，会破坏酵母菌利用甲醇的基因。如果酵母菌可以在不含组氨酸、且以甲醇为唯一碳源的培养基上生长，则其外源DNA导入情况是______（写出两种可能）。
(5)筛选出成功将植酸酶合成基因到染色体上的酵母后，还需要检测酵母菌菌株______。最终获得高效生产植酸酶的菌株。

【推荐1】马铃薯是种植广泛的农作物，常见的繁殖方式为无性繁殖，这种繁殖方式会导致病毒积累，从而使产量及品质大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答以下问题：

(1)人工培养脱毒苗时，选择马铃薯茎尖或根尖作为外植体的理由是________。培养基中添加_________(填激素名称)，诱导离体组织细胞的增殖与分化，从而形成脱毒苗。为监控脱毒苗的质量，可采用________的方法检测病毒的蛋白质。
(2)为获得抗病的马铃薯，往往采用转基因技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内。其大致过程如图所示。
①a过程所用的工具酶有____________；b过程要使用__________处理农杆菌，致使农杆菌处于能从外界吸收DNA的生理状态；d、e过程分别表示_______________。
②目的基因在马铃薯幼苗体内能否成功转录，可采用的检测方法是________，马铃薯产生的配子中_____(填“一定”或“不一定”)含有目的基因。

【推荐2】[生物——选修3:现代生物科技专题]
为提高小麦的品质和抗性，研究人员将普通小麦与几种不同品种的禾草进行植物体细胞杂交研究，禾草与小麦的亲缘关系越近，越容易产生杂种植株。回答下列问题：
（1）为了解不同禾草与小麦亲缘关系的远近，先将小麦分别与三种禾草进行DNA分子杂交,结果如下，说明禾草____________与小麦的亲缘关系最近,理由是__________________________。

（2）在进行体细胞杂交之前，必先用纤维素酶和果胶酶处理，获得__________,再用聚乙二醇诱导细胞融合并培养形成愈伤组织,一段时间后,将生长良好的愈伤组织转接到_______________上，可诱导出试管苗。
（3）植物组织培养过程中要求无菌操作以防止杂菌污染,原因是______________________。

【推荐3】叶绿体基因工程是将外源基因导入叶绿体中的一项工程技术，烟草叶绿体基因工程在基础研究、遗传改良以及生物反应器研究等方面都发挥了极为重要的作用，表现出巨大的应用前景。请回答下列问题：
(1)叶绿体基因工程常将 含有外源基因的质粒包裹在金粉上，通过轰击进入叶绿体中从而实现目的基因的导入，这种目的基因导入的方法称为________。检测目的基因是否转录出mRNA的方法是______。
(2)烟草对壮观霉素（一种抗生素）具有较强的敏感性，构建基因表达载体时，质粒上的壮观霉素抗性基因可作为______，其作用是___________________。
(3)某抗病基因导入植物细胞后 ，是否赋予了植物抗病特性，需要做________实验，以确定是否具有抗性及抗性程度。如果把某抗病基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中_________（填“一定”或“不一定”）含有抗病基因。
(4)与细胞核基因相比，叶绿体基因工程能防止细胞质内的蛋白酶对目标蛋白的消化作用，其原因是 ______________。

【推荐2】新冠病毒是一种带包膜的RNA病毒，通常其核酸检测在1～2h内即可得到检测结果。新冠病毒核酸检测的原理为实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测法，具体方法为：取检测者的mRNA在试剂盒中逆转录出cDNA，并大量扩增，同时利用盒中荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物中是否含有新冠病毒的cDNA。探针两端连有荧光基团（R）和抑制荧光发出的淬灭基团（Q），完整的探针不发出荧光，当探针被水解后R基团会发出荧光（如图1）。随循环次数的增加，反应产物不断累积，荧光信号强度增加。通过荧光强度的变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图（如图2）。请据图回答：
   
(1)新型冠状病毒是一种RNA病毒，因此，在核酸提取后，进行RT-PCR时需要加入的酶是_________。
(2)除了荧光检测法，还可以通过 _______法分析PCR扩增结果。下列利用到荧光标记的研究有_______。
A.证明细胞膜具有流动性
B.观察染色体两端的端粒
C.探究DNA的复制方式
D.观察基因在染色体上呈线性排列
(3)引物在DNA复制中的作用是___________。PCR过程完成六次循环后，产生的双链等长的DNA片段数目是_______。
(4)在实时荧光定量RT-PCR过程中，通过荧光强度的变化监测产生量的变化从而得到一条荧光扩增曲线图（如图3）。最初数个循环里，荧光信号变化不大，设置为基线；之后进入指数增长期，在这个时期设置一个荧光阈值线；Ct值是PCR扩增过程中，扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环次数，则Ct值越小，起始模板量越_______（填“多”或“少”），当PCR循环到一定次数时，会出现“平台期”，即荧光强度不再增加，此时限制因素可能是_______（答出2点）。