SLA-2基因是猪白细胞抗原基因,在动物免疫应答中发挥作用。为研究SLA-2基因的结构和功能,科研人员克隆到SLA-2基因,并在构建真核表达质粒后,转染猪肾上皮细胞,进行后续研究,其主要过程如下图(SLA-2基因长度为1100bp,质粒B的总长度为4445bp,质粒中数字代表在京限制酶切点与复制原点间的距离)。请回答:
(1)从猪基因组中特异地克隆出SLA-2基因的关键是_______ ,依据基因片段的大小,实验室可利用_______ 技术初步鉴定该基因。
(2)限制酶BclI与Sau3AI切割相同DNA形成的黏性末端是否相同?_______ ,其中_______ 在该DNA上的切点可能更多。
(3)下列引物序列中,图示过程①中的引物是_______ 。为提出SLA-2基因的表达量,研究人员同时对基因的5'序列进行密码子优化设计(如GGT优化为GGC),优化的序列位于基因的________ (编码区/编码区上游/编码区下游),这种优化实现变异属于_______ 。
①5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAATCCTC
②5'-GTTGCGGCCGCTCACACTGTGGCTTGGTAACAC
③5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAATCCTC
④5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGCCCTTGGTC
(4)过程②和过程⑤中均构建了重组质粒,其中属于真核表达质粒是在过程_______ 中构建的,这类表达质粒上必须有目的基因、_______ 等结构,其目的是_______ 。
限制酶 | BclⅠ | NotⅠ | XhaⅠ | Sau3AⅠ |
识别序列及切割位点 | T↓GATCA ACTAG↑T | GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG | T↓CTAGA AGATC↑T | ↓GATC CTAG↑ |
(1)从猪基因组中特异地克隆出SLA-2基因的关键是
(2)限制酶BclI与Sau3AI切割相同DNA形成的黏性末端是否相同?
(3)下列引物序列中,图示过程①中的引物是
①5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAATCCTC
②5'-GTTGCGGCCGCTCACACTGTGGCTTGGTAACAC
③5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAATCCTC
④5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGCCCTTGGTC
(4)过程②和过程⑤中均构建了重组质粒,其中属于真核表达质粒是在过程
更新时间:2024-05-10 08:44:55
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【推荐1】植物叶片颜色变黄会影响光合速率。叶片颜色变黄的机制是作物育种研究的重要课题。
(1)中国农科院在培育的黄瓜(雌雄同株,单性花)中发现一叶色突变体甲,表现为“苗期黄”。甲与野生型黄瓜正反交的F1均为野生型,F1自交,F2植株表现苗期黄的比例为_______________ ,可说明突变体甲表现的性状为隐性性状,即苗期黄是隐性基因控制的,该突变为单基因隐性突变。你认为该研究设计正反交实验的目的是_______________________________ 。
(2)SSR是染色体上的一段特异性短核苷酸序列,可作为基因定位的遗传标记。取(1)中突变体甲、野生型、F1、F2野生型、F2苗期黄植株,提取DNA并将F2表现型一致的植株DNA混合。PCR扩增不同样本的以下几种SSR遗传标记,电泳结果如图1,据图1可判断出控制苗期黄的基因位于_______ 号染色体上(不考虑交叉互换),理由是_______________________________________ 。
(3)发现另一叶色黄化的单基因隐性突变体乙,表现为“心叶黄”。杂交实验证明甲和乙这两种黄叶突变性状是由位于非同源染色体上的非等位基因控制的。为进一步验证这个结论,选择6号染色体上的另一位点设计引物进行SSR标记。对(1)中100株F2苗期黄植株的DNA进行PCR扩增,结果如图2;用突变体乙重复(1)的操作,对获得的100株F2心叶黄植株的DNA进行PCR扩增,结果如图3。图2和图3结果是否支持该结论?请阐述理由。________________________ 。
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【推荐2】小麦雌雄同株植物,是我国重要的粮食作物,研究抗虫性的小麦新品种具有较好的经济、环保前景。
(1)科研人员用x射线和γ射线照射纯种普通的小麦(品系1)获得单雌性突变型小麦(品系2),经基因检测发现是单基因突变引起的,位于M号染色体。将品系1与品系2杂交,品系2果穗上所结的籽粒发育为F1植株。F1植株分别自交后得到F2,发现有些F2植株果穗上籽粒约有1/4发育为品系2植株。
①上述实验所涉及的普通基因、突变基因为什么可用A、a表示?__________ 。
②果穗上籽粒约有1/4发育为品系2的植株,在F2植株中所占比例约为__________ 。
(2)科研人员将抗虫基因(B)插入到品系2染色体中,获得了具有抗虫性普通茎高的植株甲、具有抗虫性的矮株(抗倒伏)乙。为研究抗虫基因B的位置及其影响,进行了以下实验:
①由实验一可知,所研究的基因B__________ (“是”或“否”)位于M号染色体上。
②由实验二可知,上述所研究的性状遗传遵循__________ 定律,简述判断理由__________ 。
③若要利用上述实验所获的小麦籽粒培育出农田生产所需要的纯种小麦,培育的简要思路是:__________ 。
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【推荐3】遗传密码的破译是多位科学家共同努力的成果,经历了从抽象的理论分析到具体的实验研究的过程。回答下列问题:
(1)克里克假设遗传密码是按三联体方式、不重叠阅读的。按照克里克的假设,以下情况中,对蛋白质的氨基酸排序影响最小的是_____________ (填字母)。按照这样的思路,克里克证明了以上假设。
a.插入一个碱基
b.插入一个碱基,在其后的位置删除一个碱基
c.删除一个碱基
d.删除一个碱基,在其后的位置插入一个碱基
(2)尼伦伯格和马太合成了仅由尿嘧啶组成的RNA,将其加入到去掉DNA和mRNA的细胞提取液中,分别加入20种氨基酸,发现只有加入苯丙氨酸时,才可合成多肽链。由此可得出结论:________________ 。以上实验___________ (填“能”或“不能”)说明只有UUU可以编码苯丙氨酸,原因是___________________ 。
(3)尼伦伯格的研究小组继续利用含有不同核苷酸的RNA探索其他氨基酸所对应的密码子,他们利用U: C=5: 1的体系合成RNA,就可能有8种不同的三联体:UUU、UUC、UCU、CUU、UCC、CUC、CCU和UCC。以上各个三联体出现的几率等于三联体中各个碱基出现的几率的乘积,例如UUU对UUC(或UCU或CUU)三联体的比率与聚合物的U:C的比率是相同的,也就是5:l;UUU对UCC(或CUC或CCU)三联体的比率是25:1:。利用上述RNA合成的多肽链中,苯丙氨酸和丝氨酸的比例约为4.4:1,由,此推测,丝氨酸的密码子可能是____________________ 。
(1)克里克假设遗传密码是按三联体方式、不重叠阅读的。按照克里克的假设,以下情况中,对蛋白质的氨基酸排序影响最小的是
a.插入一个碱基
b.插入一个碱基,在其后的位置删除一个碱基
c.删除一个碱基
d.删除一个碱基,在其后的位置插入一个碱基
(2)尼伦伯格和马太合成了仅由尿嘧啶组成的RNA,将其加入到去掉DNA和mRNA的细胞提取液中,分别加入20种氨基酸,发现只有加入苯丙氨酸时,才可合成多肽链。由此可得出结论:
(3)尼伦伯格的研究小组继续利用含有不同核苷酸的RNA探索其他氨基酸所对应的密码子,他们利用U: C=5: 1的体系合成RNA,就可能有8种不同的三联体:UUU、UUC、UCU、CUU、UCC、CUC、CCU和UCC。以上各个三联体出现的几率等于三联体中各个碱基出现的几率的乘积,例如UUU对UUC(或UCU或CUU)三联体的比率与聚合物的U:C的比率是相同的,也就是5:l;UUU对UCC(或CUC或CCU)三联体的比率是25:1:。利用上述RNA合成的多肽链中,苯丙氨酸和丝氨酸的比例约为4.4:1,由,此推测,丝氨酸的密码子可能是
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【推荐1】土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因0sMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中,培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图,图中Ⅰ~Ⅲ为限制酶的酶切位点,bar抗除草剂基因, Kan为卡那霉素抗性基因。请分析回答:
(1)过程①需要_____________________ 催化。过程③需要用___________ 处理根瘤农杆菌,使其成为感受态细胞。
(2)过程①所用的一对引物如下,则过程②使用的限制酶是____________ 和_____________ 。
5’—CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG—3’ 5’—CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA—3”
(3)启动子的本质是____________ ,本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因,其目的是_________________________ 。
限制酶 | EcoRI | BamHI | HindIII | SacI |
识别序列和切制位点 | GAATTC | G'GATCC | A'AGCTT | GAGCT'C |
(1)过程①需要
(2)过程①所用的一对引物如下,则过程②使用的限制酶是
5’—CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG—3’ 5’—CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA—3”
(3)启动子的本质是
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【推荐2】(一)饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙,很难被动物吸收利用。若在饲料中添加植酸酶,则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从土壤中分离产植酸酶细菌菌株的过程示意图。
(1)为了解土壤中产植酸酶的细菌数量,取10g土壤加入90mL无菌水,制备成细菌悬液,经_______ 后,获得细胞密度不同的细菌悬液。若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1ml涂布到三个培养基。一段时间后,菌落数分别是168、175、167个,则10g土壤中含有此菌的菌体数是_______ 。
(2)制备产植酸酶的细菌菌株初筛平板时,需要将培养基的pH调至_______ 性,灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌植酸钙粉末、充分混匀后倒平板,加入植酸钙的目的是_______ ,达到检测菌种分泌植酸酶的能力。实验结果显示A~E五种菌株中,_______ 是产植酸酶最理想的菌株。
(3)若获得理想的菌株后,按照图示的方法进一步纯化菌种,接种环需要灼烧_______ 次。最后,若要对该菌种进行长期保存,则需将该菌液与30%已灭菌的_______ 液体混合在-80℃的冷冻箱中保存。
(二)利用植物修复技术将土壤中的Cd富集到植物体内并收集植物组织器官异地妥善储存,可降低土壤中Cd的含量。为提高植物对Cd污染土壤的修复能力,研究者将酵母液泡Cd转运蛋白(YCF1)基因(图①表示其中已知的一段碱基序列)导入杨树植物细胞。
(4)欲通过PCR技术进行获得YCF1基因,故在配制PCR体系时,可加入下列_______组合作为引物对。
(5)利用农杆菌将YCF1基因导入植物细胞的一般方法是将消毒后的外植体如愈伤组织,在含有_______ 的溶液中浸泡后,取出并转移至添加_______ 且包含适当营养物质和植物生长调节剂的MS培养基上进行培养。然后经由愈伤组织表面形成类似种子胚的结构再发育成完整植株的_______ 途径。同时,研究者进一步获得了转YCF1基因的不育杨树株系,其目的是_______ 。
(6)为检测YCF1基因是否导入植物细胞,可采用PCR技术对转基因植物株系进行检测。但需先提取待测株系的DNA,为充分溶解DNA,研磨液应含有_______ (要求写具体浓度)。再用电泳技术对PCR产物进行鉴定。DNA在琼脂糖凝胶电泳中的移动速率与_______ (至少写2点)有关。图②中的1~5是待测植物株系,6是野生型杨树,PC是含目的基因的Ti质粒,MK是DNAMarker,由图②电泳结果可知,_______ 号杨树株系含有目的基因。
(1)为了解土壤中产植酸酶的细菌数量,取10g土壤加入90mL无菌水,制备成细菌悬液,经
(2)制备产植酸酶的细菌菌株初筛平板时,需要将培养基的pH调至
(3)若获得理想的菌株后,按照图示的方法进一步纯化菌种,接种环需要灼烧
(二)利用植物修复技术将土壤中的Cd富集到植物体内并收集植物组织器官异地妥善储存,可降低土壤中Cd的含量。为提高植物对Cd污染土壤的修复能力,研究者将酵母液泡Cd转运蛋白(YCF1)基因(图①表示其中已知的一段碱基序列)导入杨树植物细胞。
(4)欲通过PCR技术进行获得YCF1基因,故在配制PCR体系时,可加入下列_______组合作为引物对。
A.5'-TAAGTTGTCT-3'和5'-CTTGGATGAT-3' |
B.5'-TCTGTTGAAT-3'和5'-CTTGGATGAT-3' |
C.5'-GAACCTACTA-3'和5'-ATTCAACAGA-3' |
D.5'-ATCATCCAAG-3'和5'-ATTCAACAGA-3' |
(6)为检测YCF1基因是否导入植物细胞,可采用PCR技术对转基因植物株系进行检测。但需先提取待测株系的DNA,为充分溶解DNA,研磨液应含有
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【推荐3】基因编辑是一种基因工程技术,能较为精确的对生物体基因组中特定目的基因进行改造。
(1)基因编辑体系包括内切核酸酶与一段小RA( crRNA),作用原理如图1所示。
crRNA通过________ 准确识别靶基因上特定序列后,引导内切核酸酶定位到靶基因上进行切割,使靶基因的________ 键断裂,随后细胞启动DNA损伤修复机制,可引发DA小片段缺失或插入,进而实现基因编辑。
(2)科研人员利用上述方法使人干细胞中的G基因功能丧失(基因敲除),导致Tsp45Ⅰ酶识别序列发生突变,Tsp45Ⅰ酶不能识别G基因中原有序列。提取进行基因编辑后的细胞(A1-A11)中的DNA,利用________ 技术扩增G基因的相关区域,再用Tsp45Ⅰ酶切处理后,电泳结果如图2所示(bp表示碱基对)
其中G基因被完全敲除的干细胞有________ ,这些干细胞的G基因碱基对数量的具体变化是________ 。A6电泳结果出现的原因是________ 。
(1)基因编辑体系包括内切核酸酶与一段小RA( crRNA),作用原理如图1所示。
crRNA通过
(2)科研人员利用上述方法使人干细胞中的G基因功能丧失(基因敲除),导致Tsp45Ⅰ酶识别序列发生突变,Tsp45Ⅰ酶不能识别G基因中原有序列。提取进行基因编辑后的细胞(A1-A11)中的DNA,利用
其中G基因被完全敲除的干细胞有
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【推荐1】癌细胞表面蛋白“PDL﹣1”与T细胞表面蛋白“PD﹣1”特异性结合后,可抑制T细胞活性并启动其凋亡,导致肿瘤细胞发生免疫“逃逸”。研究者对“PD﹣1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定,为制备抗体打基础。研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2:
(1)首先提取细胞中的mRNA反转录生成_____ 作为模板:设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物,通过_____ 技术扩增目的基因。
(2)选用图1中的两种名称分别为_____ 的限制酶将“pIRES2﹣EGFP质粒”载体进行双切,再用DNA连接酶将其与目的基因拼接,构建表达载体。该表达载体的组成,除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外,还必须具有_____ 等
(3)而后一定温度下,与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____ 培养基中,可筛选出已经完成转化的大肠杆菌,继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。
(4)将扩增后的“pIRES2﹣EGFP载体/PD﹣1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后,为确定PD﹣1基因是否表达,检测细胞膜表面是否具有_____ 。为判断其是否具有生物学活性和功能,则可裂解293T细胞,提取该物质看能否与_____ 发生结合,从而阻断“PD﹣1与PDL﹣1信号通路”。研究中还会有一步骤,只将“pIRES2﹣EGFP载体”转入293T细胞,其目的是_____ 。
(1)首先提取细胞中的mRNA反转录生成
(2)选用图1中的两种名称分别为
(3)而后一定温度下,与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有
(4)将扩增后的“pIRES2﹣EGFP载体/PD﹣1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后,为确定PD﹣1基因是否表达,检测细胞膜表面是否具有
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【推荐2】科研人员研究调控蔗糖转移酶基因(SUC2)的两种蛋白质 Snf1 和 Snf2 之间的相互作用的原理如下:真核细胞基因起始转录需要有转录激活因子的参与。酵母转录激活因子 GAL4 在结构上由 DNA 结构功能域(BD)和转录激活结构域(AD)组成。两个结构域分开时不能激活有转录,只有当两者空间上接近时,GAL4 转录因子才具有活性。BD 与基因上游激活序列 UAS 结合后,激活 AD 与启动子结合,使启动子下游基因转录。如图为研究相互作用的 X 蛋白和 Y 蛋白的机制模式图。
(1)操作中,首先需要用_______ 酶将目的基因分别插入到两个酵母表达载体中,得到两种融合表达载体(如下图)。酶切时通常选用两种不同的酶,这样做可以产生不同的黏性末端,从而____________________ (写出一个目的即可)。
(2)酵母菌染色体上能被 GAL4 激活转录而且显示两种蛋白质相互作用的基因称为报告基因。在操作中,还需要构建含报告基因载体来转化酵母菌。若用 AUR1-C(抗生素 AbA 抗性基因)作为报告基因。那么作为被转化的酵母细胞在抗生素抗性上应是无 AbA 抗性的。转化后需要在相应的培养基上培养和筛选,选择导入了________________ (填“融合表达载体”“报告基因载体”或“融合表达载体和报告基因载体”)的酵母细胞。除此之外,还要将酵母的 GAL4 基因敲除,以排除细胞内源转录因子 GAL4 的影响。
(3)LacZ 基因编码产生的 β-半乳糖苷酶可以分解 X-gal 产生蓝色物质,使菌落呈现蓝色;否则菌落用为白色。科研人员采用 LacZ 作为报告基因,根据上述原理和操作步骤,验证了蛋白质 Snf1 和 Snf2 之间存在相互作用。写出实验思路_____________________________ 。
(4)科研人员对(3)的实验结果进行分析:若出现_________ (填“蓝色”或“白色”)菌落,说明蛋白质 Snf1 和 Snf2 之间存在相互作用。
(1)操作中,首先需要用
(2)酵母菌染色体上能被 GAL4 激活转录而且显示两种蛋白质相互作用的基因称为报告基因。在操作中,还需要构建含报告基因载体来转化酵母菌。若用 AUR1-C(抗生素 AbA 抗性基因)作为报告基因。那么作为被转化的酵母细胞在抗生素抗性上应是无 AbA 抗性的。转化后需要在相应的培养基上培养和筛选,选择导入了
(3)LacZ 基因编码产生的 β-半乳糖苷酶可以分解 X-gal 产生蓝色物质,使菌落呈现蓝色;否则菌落用为白色。科研人员采用 LacZ 作为报告基因,根据上述原理和操作步骤,验证了蛋白质 Snf1 和 Snf2 之间存在相互作用。写出实验思路
(4)科研人员对(3)的实验结果进行分析:若出现
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真题
【推荐3】2007年我国科学家率先完成了家蚕基因组精细图谱的绘制,将13000多个基因定位于家蚕染色体DNA上.请回答以下有关家蚕遗传变异的问题:
(l)在家蚕的基因工程实验中,分离基因的做法包括用_________ 对DNA进行切割然后将DNA片段与________ 结合成重组DNA,再将重组DNA转入大肠杆菌进行扩增等.
(2)家蚕的体细胞共有56条染色体,对家蚕基因组进行分析(参照人类基因组计划要求),应测定家蚕_________ 条双链DNA分子的核苷酸序列.
(3)决定家蚕丝心蛋白H链的基因编码区有16000个碱基对,其中有1000个碱基对的序列不编码蛋白质,该序列叫_________ ;剩下的序列最多能编码_______ 个氨基酸(不考虑终止密码子),该序列叫________ .
(4)为了提高蚕丝的产量和品质,可以通过家蚕遗传物质改变引起变异和进一步的选育来完成.这些变异的来源有___________ .
(5)在家蚕遗传中,黑色(B)与淡赤色(b)是有关蚁蚕(刚孵化的蚕)体色的相对性状,黄茧(D)与白茧(d)是有关茧色的相对性状,假设这两对性状自由组合,杂交后得到的子代数量比如下表:
①请写出各组合中亲本可能的基因型
组合一_________ ;
组合二__________ ;
组合三___________ ;
②让组合一杂交子代中的黑蚁白茧类型自由交配,其后代中黑蚁白茧的概率是________ 。
(l)在家蚕的基因工程实验中,分离基因的做法包括用
(2)家蚕的体细胞共有56条染色体,对家蚕基因组进行分析(参照人类基因组计划要求),应测定家蚕
(3)决定家蚕丝心蛋白H链的基因编码区有16000个碱基对,其中有1000个碱基对的序列不编码蛋白质,该序列叫
(4)为了提高蚕丝的产量和品质,可以通过家蚕遗传物质改变引起变异和进一步的选育来完成.这些变异的来源有
(5)在家蚕遗传中,黑色(B)与淡赤色(b)是有关蚁蚕(刚孵化的蚕)体色的相对性状,黄茧(D)与白茧(d)是有关茧色的相对性状,假设这两对性状自由组合,杂交后得到的子代数量比如下表:
亲本子代 | 黑蚁黄茧 | 黑蚁白茧 | 淡赤蚁黄茧 | 淡赤蚁白茧 |
组合一 | 9 | 3 | 3 | 1 |
组合二 | 0 | 1 | 0 | 1 |
组合三 | 3 | 0 | 1 | 0 |
组合一
组合二
组合三
②让组合一杂交子代中的黑蚁白茧类型自由交配,其后代中黑蚁白茧的概率是
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【推荐1】糖尿病是常见病,很多糖尿病患者需要终身注射胰岛素,故胰岛素的医用量极大,图2是通过生物工程生产胰岛素的两条途径,EcoRI、BamHI 和 Sau3AI 三种限制性内切酶的识别序列与切割位点如图1 所示,请据图回答相关的问题:
(1)质粒的基本组成单位是( ) 。据图分析,为了高效重组,切割目的基因和质粒分子最为理想的限制酶是( ) 。
(2)途径 1 中涉及到的现代生物工程有____________ 。
A.细胞核移植B.动物细胞培养技术C.转基因技术 D. 动物细胞融合技术E.干细胞技术
(3)途径 2 中将胰岛素基因与质粒连接产物和受体细胞混合进行导入操作,之后还需要筛选,这是因为_________________ 。
A. 胰岛素基因和质粒连接形成重组质粒
B.胰岛素基因自我连接形成环状 DNA 分子
C.导入成功的概率很低,大部分大肠杆菌没有导入任何质粒
D.连接之后可能产生空质粒,导入后产生含有空质粒的大肠杆菌
(4)途径2中为了获得含重组质粒的大肠杆菌,应采用两步法筛选。其中用于第一步筛选的培养基成分,除了葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子之外,还应该加入的 物 质 有__________ , 目的是筛选出含______________ 的大肠杆菌 。
(5)请根据生命科学中结构与功能相适应的观点,阐述途径 1 和途径 2 获得胰岛素的差异__________________________________________________________________________ 。
(1)质粒的基本组成单位是
(2)途径 1 中涉及到的现代生物工程有
A.细胞核移植B.动物细胞培养技术C.转基因技术 D. 动物细胞融合技术E.干细胞技术
(3)途径 2 中将胰岛素基因与质粒连接产物和受体细胞混合进行导入操作,之后还需要筛选,这是因为
A. 胰岛素基因和质粒连接形成重组质粒
B.胰岛素基因自我连接形成环状 DNA 分子
C.导入成功的概率很低,大部分大肠杆菌没有导入任何质粒
D.连接之后可能产生空质粒,导入后产生含有空质粒的大肠杆菌
(4)途径2中为了获得含重组质粒的大肠杆菌,应采用两步法筛选。其中用于第一步筛选的培养基成分,除了葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子之外,还应该加入的 物 质 有
(5)请根据生命科学中结构与功能相适应的观点,阐述途径 1 和途径 2 获得胰岛素的差异
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(0.4)
【推荐2】拟南芥是遗传学研究的模式植物,其突变体可用于验证相关基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色(TT),某突变体的种皮为黄色(tt),下面是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(Tn)功能的流程示意图。
(1)与拟南芥t基因的mRNA相比,若油菜Tn基因的mRNA中UGA变为AGA,其末端序列成为“-AGCGCGACCAGACUCUAA”,则Tn比t多编码_________________ 个氨基酸(起始密码子位置相同,UGA、UAA为终止密码子)。
(2)图中①应为_________________ ,若②不能在含抗生素Kan的培养基上生长,则原因是_________________ ,若③的种皮颜色为_________________ ,则说明油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能相同。
(3)假设该油菜Tn基因连接到拟南芥染色体并替换其中的一个t基因,则③中进行减数分裂的细胞在联会时的基因型为_________________ ;同时,③的叶片卷曲(叶片正常对卷曲为显性,且与种皮性状独立遗传),用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交,其后代中所占比例最小的个体表现型为_________________ ;
(4)所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥_________________ (填“是”或“不是”)同一个物种。
(1)与拟南芥t基因的mRNA相比,若油菜Tn基因的mRNA中UGA变为AGA,其末端序列成为“-AGCGCGACCAGACUCUAA”,则Tn比t多编码
(2)图中①应为
(3)假设该油菜Tn基因连接到拟南芥染色体并替换其中的一个t基因,则③中进行减数分裂的细胞在联会时的基因型为
(4)所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥
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非选择题-解答题
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较难
(0.4)
【推荐3】健康的生活方式、乐观的心态和定期体检是预防癌症的主要手段。(CAR-T细胞疗法是治疗血液恶性肿瘤及淋巴瘤的研究热点,我国首款新型肿瘤治疗方法——CAR-T产品于2021年上市。左图为CAR-T细胞疗法的原理示意图,该疗法借助基因工程和细胞工程技术,根据CAR蛋白(右图)是多种肿瘤的嵌合抗原受体的特点而设计。回答下列问题:
(1)机体肿瘤的发生主要与免疫系统的______ 功能降低有关。
(2)图中过程①称为______ ,这是基因工程的核心步骤,需要用到的工具酶有______ 。过程②最常用的方法是______ 。CAR-T细胞输入患者体内后,其活化需要两个信号的刺激,具体是______ 。
(3)据图可知,CAR-T细胞疗法相对传统的药物化疗和放疗而言,具有______ (请写出两点)的突出优点。
(4)CAR-T细胞在治疗肺癌、肝癌、乳腺癌等实体瘤的总体效果上还不尽如人意,请根据右图并结合特异性免疫的原理,提出一种CAR蛋白改造的简单思路,以提升CAR-T细胞对实体瘤的疗效:______ 。
(1)机体肿瘤的发生主要与免疫系统的
(2)图中过程①称为
(3)据图可知,CAR-T细胞疗法相对传统的药物化疗和放疗而言,具有
(4)CAR-T细胞在治疗肺癌、肝癌、乳腺癌等实体瘤的总体效果上还不尽如人意,请根据右图并结合特异性免疫的原理,提出一种CAR蛋白改造的简单思路,以提升CAR-T细胞对实体瘤的疗效:
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