【推荐1】药物A是一种新型免疫调节剂，临床用于肿瘤的治疗。研究人员利用H细胞对其作用机理进行了相关研究。
（1）H细胞是一种肝癌细胞，机体主要通过________免疫发挥免疫监控和清除作用。但由于各种原因，癌细胞表面特异性抗原表达量________，无法被免疫细胞识别，从而实现免疫逃逸。
（2）将H细胞培养一段时间后，分别加入D溶剂溶解的不同浓度的药物A溶液，24h后测定细胞存活率。实验结果如表，由数据可知药物A对H细胞无明显的细胞毒性，原因是___________________。

浓度/µmol·L-1	0	1	5	10	15	20
细胞存活率/%	100．0	98．21	97．85	97．12	96．87	96．24

（3）研究人员对药物A的免疫调节作用进行研究。将H细胞与T淋巴细胞按一定比例混合，分别加入不同浓度的药物A溶液，培养一段时间后统计各组癌细胞的凋亡率。对照组的设置应为________。
①单独培养的H细胞        ②单独培养的T淋巴细胞       ③混合培养的H细胞与T淋巴细胞
④加入等量的D溶剂             ⑤加入等量的生理盐水
凋亡率统计结果如表，据此提出药物A的免疫调节作用是_____________。

浓度/µmol·L-1	凋亡率/%
对照组	3
1	13．4
10	29．3
15	55．3

（4）为进一步探究药物A发挥免疫调节作用的机理，研究人员又做了如下实验：
①已知IL-2、TNF-α是T细胞产生的两种杀伤性细胞因子，研究人员利用癌症模型鼠进行实验，测定了不同组小鼠IL-2、TNF-α的表达量，结果如表：

A药剂量/mg·kg-1	IL-2	TNF-α
0	14．12	11．25
5	18．31	16．54
10	24．32	20．23
15	31．54	27．50

②T细胞表面的PD-1和癌细胞表面的PD-L1结合后可以抑制T细胞的活性，使其无法识别癌细胞，导致癌细胞的免疫逃逸。研究者分别测定了①实验中T细胞表面的PD-1和癌细胞表面的PD-L1表达量，结果如图。上述实验结果_______（支持/不支持）药物A免疫作用机理的假设，原因是_____________________________________。

（5）请结合PD-1/PD-L1信号通路的作用机理，利用免疫学知识为治疗癌症提供一种新思路______________________。

【推荐2】机体受到流感病毒侵染后，免疫系统通过细胞免疫和体液免疫清除病原体，维持内环境的稳态。此外，感染病原体后，产生的焦虑、紧张情绪刺激大脑，兴奋传至下丘脑，一方面通过分泌的促甲状腺激素释放激素分级调节甲状腺激素的分泌，另一方面通过交感神经刺激肾上腺髓质分泌肾上腺素，共同促进细胞代谢。但焦虑、紧张情绪也会降低T细胞的活性，影响免疫功能。调控模式如下图，请回答下列问题：

（1）侵染机体宿主细胞内的流感病毒首先需经过___________免疫裂解靶细胞释放病毒，但病毒的彻底清除需要_________细胞分泌的抗体的作用，抗体与病毒结合后，抑制了病毒__________，进而形成沉淀，被吞噬细胞吞噬消化。
（2）感染流感病毒后，往往会发烧，从而提高免疫系统的功能。发烧的原因是病毒产生的毒素或人体免疫器官细胞分泌的免疫因子刺激下丘脑，最终使有关腺体分泌的甲状腺激素和肾上腺素的量增加，从而使产热增加，而汗腺、皮肤等散热结构散热减少，导致体温升高。因此，两种激素在体温调节方面具有__________作用。
（3）焦虑、紧张刺激引起甲状腺激素和肾上腺素分泌过程中，属于神经调节中的效应分别是_________________和____________________。但焦虑和紧张会降低T细胞的活性，进而会降低_____________免疫能力。

【推荐3】已知皮肤移植引起的免疫排斥反应可导致皮肤脱落，且二次免疫比初次免疫更加迅速、强烈，药物M能有效降低个体的免疫水平（持续给药一周后出现显著效应）。现提供下列材料，并以皮肤移植为主要实验手段（具体手术方法不要求），来完成对上述结论的验证。请完善实验方案并回答有关问题：
材料：品系甲、品系乙克隆小鼠各若干、药物M制剂适量、注射器、手术器材、生理盐水、饲料等。
步骤：第一步：取 ① 小鼠若干，随机、均等地分成两组，编号A₁、A₂；
第二步：给A₁、A₂组小鼠背部分别移植取自于品系乙小鼠的皮肤，正常饲养，并 ② ，结果分别记为T₁、T₂；
第三步：A₁组小鼠继续正常饲养，A₂组小 ③ ，其他条件同A₁组；
第四步：一周后，给A₁、A₂组小鼠 ④ ，并按第二步的方法测得相应指标，结果分别记为T₃、T₄。
（1）完善实验步骤：
①____________________________；
②____________________________；
③____________________________；
④____________________________。
（2）设计A₁组主要是为了验证_____________________________________________。
（3）若_______________，则药物M能将二次免疫的水平降低至低于初次免疫的水平。
（4）若（3）成立，则在第四步后取A₁、A₂组小鼠体内的淋巴细胞并计数，发现存在较大差异的是___细胞。

【推荐1】杂交水稻虽然性状优良，但在有性繁殖过程中，具有高产等优良特性会出现分离。由此，杂交作物的后代（杂种植物）无法保持同样的优良性状。在研究过程中，科研人员发现了一个关键的B基因，为探究其作用，进行了如下研究。
（1）绿色荧光蛋白基因（GFP）在紫外光或蓝光激发下，会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。将绿色荧光蛋白基因（GFP）与野生型水稻的B基因利用____________酶形成融合基因，转入到普通水稻获得转基因水稻（B-GFP），该变异属于___________。
（2）将野生型水稻与转基因水稻进行杂交或自交，授粉2．5小时后，利用免疫荧光技术检测胚中B基因的表达情况，请完成下表和问题。

杂交组合	♀B—GFP×♂野生型	♀野生型×♂B—GFP	♀B—GFP×♂B—GFP
预期结果	具荧光：无荧光=1：1		_____________
实际结果	无荧光	全部具荧光	1/2具荧光

根据结果可知只有来自________________________（父本/母本）的B基因表达，而出现了上述实验现象，并没有表现出________________________定律的特征。
（3）研究人员进一步检测授粉6．5小时后的受精卵，发现来自于母本的B基因也开始表达。由此推测，可能是来自于父本B基因的表达__________________（促进/抑制）后期来自于母本中的该基因的表达，从而启动胚的发育。
（4）研究人员设想：可以使野生型水稻（杂种植物）在未受精的情况下，诱发卵细胞中B基因表达，发育为胚。研究人员进行了如下图操作，请你根据技术操作及相关知识回答问题：

①卵原细胞经M技术处理后进行____________________分裂形成卵细胞。
②精细胞参与了形成_____________________的过程，卵细胞在未受精情况下发育为新个体，该育种方式的优势是_________________________。

【推荐2】CRISPR/Cas9是一种基因编辑技术，可用于基因敲除、定向基因突变和插入外源DNA分子。CRISPR具有靶向特异性，这是由两部分决定的，一部分是向导RNA和靶DNA之间的碱基配对，另一部分是Cas9蛋白复合体和一个短DNA序列（PAM序列），序列通常在靶DNA的3'末端作用。Cas9内切酶是一种RNA引导的内切核酸酶，用于通过产生序列特异性双链断裂进行基因组编辑，向导RNA则作用于体内一种称为RNA编辑的后转录修饰过程中。下图为借助CRISPR/Cas9基因编辑技术插入外源基因的过程图，回答下列问题：
   
(1)CRISPR是在细菌DNA中发现的一些重复序列，外来病毒DNA往往会被整合到这段序列附近并转录出向导RNA以引导Cas9内切酶切割病毒DNA。细菌细胞中的________也能起到类似Cas9内切酶的作用，使脱氧核苷酸之间的________断开。Cas内切酶________（填“会”或“不会”）切割细菌自身DNA，原因是________。
(2)在对目的细胞进行基因编辑时，需要构建含Cas9蛋白基因和设计好的向导RNA基因的________并导入受体细胞内，使其在细胞中表达出Cas9蛋白和向导RNA，并进入细胞核发挥作用。研究发现，即便向导RNA与目的序列完全互补，在PAM序列突变的情况下也无法引导Cas9内切酶，结合上图推测PAM序列的作用是________。
(3)真核细胞的DNA被切割后，会发生修复连接，便有可能实现连入供体DNA分子，也可能不会连入。若要利用CRISPR/Cas9技术敲除实验动物某个致病基因获得正常细胞，试提出操作思路：________。

【推荐3】研究人员将抗盐基因转入普通烟草培育出抗盐烟草，该过程所用的质粒与含抗盐基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制性内切核酸酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。图3表示该过程中利用含目的基因的农杆菌进行转化作用的示意图。

(1)图1质粒中没有标注出来的基本结构是____________________。
(2)用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时，可以用限制酶BamHⅠ切割质粒，用限制酶Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段，可以这样做的原因是这两种限制酶可以_______________________。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的____________，该过程还需要水作为反应物。
(3)将上述切开的质粒与目的基因混合，加入DNA连接酶连接后，导入受体细胞(不考虑基因突变)，受体细胞的类型包含_______。

A．抗X、抗Y	B．抗X、不抗Y
C．不抗X、抗Y	D．不抗X、不抗Y

(4)图3过程________(填序号)中发生了基因重组，过程②、③所用的培养基中，通常要调控好_______________________两类激素的比例。
(5)鉴定抗盐转基因烟草是否抗盐的方法是______________________________，观察转基因烟草的生长状况。

【推荐1】毕赤酵母以甲醇作为唯一碳源时需要大量表达醇氧化酶（AOX1），AOX1基因的长度为2200bp。科研人员将蜂毒肽（MEL）与石斑鱼c型溶菌酶（Ec-cLYZ）基因插入pPICZαA质粒上构建重组表达质粒，导入毕赤酵母以获得高效低毒的广谱抑菌融合蛋白，实验的主要流程如下，请回答：

注：重组质粒1是人工合成的包含MEL和Ec-cLYZ融合基因
(1)斜带石斑鱼c型溶菌酶属于免疫系统的_______。相对于原核表达系统，毕赤酵母表达系统翻译出的蛋白可以经过_______加工修饰，表达的蛋白具有天然生物学活性。
(2)为获得MEL和Ec-cLYZ融合基因，同时两端带有pPICZαA的同源序列，过程①PCR反应体系中加入的模板是_______，引物应该选择以下_______。
A.5’-GAAACTGAAGCTCCCGAATTCGGTATTGGTGGT-3’
B.5’-CATCATCATCATCCCCGTCGACTTGATGCTGCAAGC-3’
C.5’-GGGGATGATGATGATGGAATTCTTGATGCTGCAAGC-3’
D.5’-GGGAGCTTCAGTTTCGTCGACGGTATTGGTGGT-3’
(3)过程②将PCR产物片段与线性化的pPICZαA混合后，在重组酶的作用下可形成环化质粒，这一过程与传统构建重组质粒相比不需要_______酶。
(4)为了验证构建是否成功，利用限制性内切酶EcoRI和SalI对提取出的重组质粒2进行双酶切，利用琼脂糖凝胶电泳检测，结果显示分别得到大小约为_______（限制酶识别序列不计）的片段。过程③将重组质粒2导入大肠杆菌的目的是_______。
(5)过程⑤培养毕赤酵母时加入_______作为唯一碳源，目的是_______。
(6)目的基因与宿主基因组染色体的交换方式包括单交换和双交换。含有目的基因的载体插入宿主染色体的AOX1基因的上游或下游，不影响AOX1基因的正常表达，属于单交换；当发生基因取代时，含目的基因的载体与宿主染色体中AOX1基因区域发生交换，宿主AOX1基因编码区域被全部取代，属于双交换。以AOX1基因两端序列为依据设计引物，对三株重组酵母（编号1、2、3）进行菌液PCR、电泳后得到下图，根据结果推断目的基因与宿主基因组染色体发生单交换的酵母菌株有_______。

【推荐2】拟南芥某突变体可用于验证相关基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色（TT），某突变体的种皮为黄色（tt）。下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因（Tn）功能的流程示意图。请据图回答下列问题：

（1）图中①为_______，形成过程中需要____________酶；Tn基因能够和质粒连接成①的主要原因是_________。
（2）拟南芥t基因的mRNA的末端序列为“－AGCGCGACCUGACUCUAA－”，而油菜Tn基因的mRNA与其相比，只有末端序列中的UGA变为AGA，则Tn比ｔ多编码______个氨基酸（起始密码子位置相同，UGA、UAA为终止密码子）。油菜Tn基因能在油菜突变体中表达的原因是__________________。
（3）若②不能在含抗生素Ｋan的培养基上生长，则原因是_________________。若转基因拟南芥的种皮颜色为_______________，则说明油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能可能相同。
（4）采用PCR技术扩增目的基因时，需在PCR反应体系加入引物等物质，若共用了引物30个，则目的基因扩增了___________代。

【推荐3】人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。
（1）目的基因的获取方法通常包括___________和___________。

（2）上图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在图中用方框圈出发生改变的碱基对，这种变异被称为____________________。
（3）已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域（见上图），那么正常人的会被切成_______个片段，而患者的则被切割成长度为________对碱基和________对碱基的两种片段。
（4）如果某人的p53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是___________（以P⁺表示正常基因，P^-表示异常基因）。

【推荐1】下图是新冠病毒初次侵入人体后的部分免疫图解，请回答下列问题：

(1)图示体现的是免疫系统的____功能，若人体再次感染该抗原将引发二次免疫，直接参与免疫反应的细胞种类是____。
(2)注射从已康复的新冠患者体内取得的血清，对新冠有治疗作用，原因是____。
(3)人体产生相应抗体的过程中抗原经吞噬细胞处理后要经过____进行呈递，为确定该过程的必要性，某实验小组利用实验狗进行了探究，过程如下：
①取两组健康的生长状况相同的实验狗标记甲、乙，其甲组切除____，乙组在相应部位切开后再缝合。
②伤口愈合后给两组狗接种等量相同的灭活病毒，一段时间后检测两组狗体内的抗体的浓度
实验结论：若____说明抗体的产生需要经过该细胞的呈递；
若____说明抗体的产生不需要经过该细胞的呈递。

【推荐3】肿瘤细胞可通过大量表达PD-L1，与T细胞表面的PD-1结合，抑制T细胞活化，发生免疫逃逸，临床上常使用PD-1阻断剂进行治疗，但对某些患者疗效不显著，科研人员对此进行研究。
(1)癌细胞具有_____特点，机体通过免疫系统对其清除体现了免疫系统的_____功能。
(2)研究发现，使用PD-1阻断剂效果显著的患者在联合使用抗生素时治疗效果减弱。由此推测PD-1阻断剂疗效与肠道菌群有关。为验证此推测，研究者操作如表。

甲组	取PD-1阻断剂无效病人的粪便	将粪便移植给用Ⅱ：_____处理的小鼠后接种肿瘤	未治疗
			进行PD-1阻断剂治疗
乙组	Ⅰ：_____		未治疗
			进行PD-1阻断剂治疗

①补充实验过程：Ⅰ：_____；Ⅱ：_____
②检测肿瘤大小结果如图1，实验结果表明治疗效果显著患者的肠道菌群提高了PD-1阻断剂的疗效，依据是_____。
   
③请从下列选项中选择合适的实验操作和预期结果，为上述结论补充新证据。( )
A．从PD-1阻断剂有效病人的肠道中提取主要细菌AKK
B．从PD-1阻断剂无效病人的肠道中提取主要细菌AKK
C．用肠道菌AKK灌胃甲组小鼠
D．用肠道菌AKK灌胃乙组小鼠
E．该组小鼠接受PD-1阻断剂治疗后肿瘤大小不变
F．该组小鼠接受PD-1阻断剂治疗后肿瘤大小明显减小