组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 发酵工程 > 微生物的培养与应用 > 分离特定微生物并测定其数量 > 其他微生物的分离与计数
题型:非选择题-解答题 难度:0.4 引用次数:634 题号:16931786
(一)饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙,很难被动物吸收利用。若在饲料中添加植酸酶,则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从土壤中分离产植酸酶细菌菌株的过程示意图。

(1)为了解土壤中产植酸酶的细菌数量,取10g土壤加入90mL无菌水,制备成细菌悬液,经_______后,获得细胞密度不同的细菌悬液。若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1ml涂布到三个培养基。一段时间后,菌落数分别是168、175、167个,则10g土壤中含有此菌的菌体数是_______
(2)制备产植酸酶的细菌菌株初筛平板时,需要将培养基的pH调至_______性,灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌植酸钙粉末、充分混匀后倒平板,加入植酸钙的目的是_______,达到检测菌种分泌植酸酶的能力。实验结果显示A~E五种菌株中,_______是产植酸酶最理想的菌株。
(3)若获得理想的菌株后,按照图示的方法进一步纯化菌种,接种环需要灼烧_______次。最后,若要对该菌种进行长期保存,则需将该菌液与30%已灭菌的_______液体混合在-80℃的冷冻箱中保存。
(二)利用植物修复技术将土壤中的Cd富集到植物体内并收集植物组织器官异地妥善储存,可降低土壤中Cd的含量。为提高植物对Cd污染土壤的修复能力,研究者将酵母液泡Cd转运蛋白(YCF1)基因(图①表示其中已知的一段碱基序列)导入杨树植物细胞。

(4)欲通过PCR技术进行获得YCF1基因,故在配制PCR体系时,可加入下列_______组合作为引物对。
A.5'-TAAGTTGTCT-3'和5'-CTTGGATGAT-3'
B.5'-TCTGTTGAAT-3'和5'-CTTGGATGAT-3'
C.5'-GAACCTACTA-3'和5'-ATTCAACAGA-3'
D.5'-ATCATCCAAG-3'和5'-ATTCAACAGA-3'
(5)利用农杆菌将YCF1基因导入植物细胞的一般方法是将消毒后的外植体如愈伤组织,在含有_______的溶液中浸泡后,取出并转移至添加_______且包含适当营养物质和植物生长调节剂的MS培养基上进行培养。然后经由愈伤组织表面形成类似种子胚的结构再发育成完整植株的_______途径。同时,研究者进一步获得了转YCF1基因的不育杨树株系,其目的是_______
(6)为检测YCF1基因是否导入植物细胞,可采用PCR技术对转基因植物株系进行检测。但需先提取待测株系的DNA,为充分溶解DNA,研磨液应含有_______(要求写具体浓度)。再用电泳技术对PCR产物进行鉴定。DNA在琼脂糖凝胶电泳中的移动速率与_______(至少写2点)有关。图②中的1~5是待测植物株系,6是野生型杨树,PC是含目的基因的Ti质粒,MK是DNAMarker,由图②电泳结果可知,_______号杨树株系含有目的基因。

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【推荐1】发酵型青梅果醋的生产主要采用碱中和青梅汁之后再进行酒精发酵、醋酸发酵的方法,然而这种生产工艺会损失青梅的功能性成分。因此,筛选能够耐受青梅高酸环境的醋酸菌是提高发酵青梅果醋品质的关键(已知醋酸能与培养基中的碳酸钙反应生成能溶于水的醋酸钙)。请回答以下问题。
(1)食醋生产的三个主要的过程:一是原料中淀粉的分解,即糖化作用(水解);二是酒精发酵,即____(填微生物名称)将糖转化成乙醇;三是醋酸发酵,即醋酸菌将乙醇转化成乙酸,该微生物的代谢类型是____
(2)①菌种筛选及发酵生产涉及三种培养基:

培养基A

葡萄糖、酵母粉、无水碳酸钙、琼脂、3%乙醇

培养基B

葡萄糖、酵母粉、3%乙醇

培养基C

葡萄糖、酵母粉、6%乙醇

具体流程为:取腐烂一周的青梅若干,加入装有培养基B的摇瓶中培养一段时间,经____稀释后,接种于培养基A上,选取____且生长良好的单菌落10株。将上述初筛的10株醋酸菌接种于培养基C中,结果如图1。研究者选择菌株J-27作为后续实验菌株,原因是____

②研究人员对 J-27 进行诱变处理,选取突变菌株 J-2736,与两种商业化的醋酸菌—沪酿 1.01、 AS1.41 分别接种于青梅果酒中进行青梅果醋发酵,结果如图2。

沪酿 1.01 和 AS1.41 发酵结束时青梅果醋发酵液中总酸含量为 15g·L-1左右,而两者应用于粮食醋发酵时,发酵液总酸含量一般可以达到 50g·L-1左右。推测原因可能是____
③图 2 结果说明在青梅果醋发酵过程中,菌株 J-2736 发酵性能优于沪酿 1.01 和 AS1.41。研究人员继续对 J-2736 的发酵条件进行了研究,发现初始乙醇含量可能对青梅果醋发酵具有一定影响,实验结果如图3。由结果表明____,试分析造成这种现象的原因:____

(3)乙醇脱氢酶(ADH)催化乙醇生成乙醛是醋酸发酵的第一阶段,乙醛脱氢酶(ALDH)催化乙醛生成乙酸是醋酸发酵的第二阶段。某同学从 J-27 的突变体菌株中分别提取ADH和ALDH,分别用高浓度的乙醇处理后测酶活性,由此可根据____进一步筛选出耐乙醇醋酸高产菌株。
2024-03-19更新 | 299次组卷
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2022-10-12更新 | 595次组卷
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2024-04-13更新 | 189次组卷
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