【推荐1】霍乱是因摄入受到霍乱弧菌污染的食物或水而引起的一种急性传染病。霍乱弧菌粘附于小肠黏膜上皮细胞，产生霍乱肠毒素。霍乱肠毒素是一种蛋白质，由一个A亚单位和多个B亚单位组成，A亚单位又含有A1和A2两条多肽链，A1催化ADP-R的合成。霍乱肠毒素作用于小肠黏膜上皮细胞，使患者剧烈腹泻，并严重脱水，其具体作用机理如图。

（1）霍乱弧菌与人体细胞共有的结构有(            )
A．核糖体                     B．核膜                   C．线粒体               D．细胞壁
（2）据题意分析，霍乱的主要传播途径是___________传播，可能有效的预防措施有__________。
（3）由图可知，霍乱肠毒素B亚单位的功能是与图中的_________________结合，使A亚单位以_______方式进入小肠黏膜上皮细胞。ADP-R作用是___________，使cAMP在细胞内大量积累，促进________________，最终导致肠腔大量积液和腹泻。
为诊断和治疗某疑似霍乱患者，采集该患者粪便的混合菌样品，从中筛选并培养霍乱弧菌菌株，并进行抗生素敏感性实验。表为粪便中常见细菌和霍乱弧菌的适宜生长环境。     

（4）据表分析，将霍乱弧菌从混合菌液中分离出来，可依据的实验原理是(           )
A．培养基的成分不同                   B．培养的温度不同
C．培养的pH值不同                     D．培养时的氧气需求不同
（5）图为从混合菌样品分离和纯化霍乱弧菌 的培养结果，为进一步从中获取纯化的霍乱弧菌，应选择_____区域用于接种。

下表为该患者体内的霍乱弧菌对不同抗生素的敏感性实验结果（以抑菌圈直径表示），敏感标准是判断霍乱弧菌对不同抗生素是否敏感的最小抑菌圈直径。

抗生素	抑菌圈直径（mm）	敏感标准（mm）
阿莫西林	17	＝18
复方新诺明	2	＝16
妥布霉素	16	＝15
丁胺卡那	15	＝17

（6）据表分析，治疗该患者应选用的抗生素是___________。

【推荐2】某种产脂肪酶菌常被用作饲料添加剂，下表是从土壤中初筛该菌的培养基配方，请回答下列问题：

（NH4）2SO4	NaCl	MgSO4·7H2O	K2HPO4	1％橄榄油	蒸馏水	pH
0.1g	0.05g	0.01g	10g	4mL	定容至 100mL	7.0

（1）在上述培养基中，橄榄油能为产脂肪酶菌提供_________。用该培养基进行选择培养的目的是_____。在选择培养过程中，使用摇床振荡效果较好，原因是_____________。
（2）分离产脂肪酶菌时，在上述培养基的基础上，还应加入琼脂和溴甲酚紫（碱性条件下呈紫色，在酸性条件下为黄色）。在平板上产脂肪酶菌菌落的周围会出现黄色圈，原理是_________。筛选时常选择黄色圈直径大的菌落，说明_____。
（3）可用稀释涂布平板法对微生物进行计数，计算得出菌体数目往往比实际的数目低，原因是_________。使用该方法计数时研究人员分别在3个平板上接种稀释倍数为10⁴的滤液各0.1ml，培养一段时间后， 平板上长出菌落数分别为26、234、258，则每1ml样品中的活菌数为_____个。还可用滤膜法对微生物进行计数，如测定饮用水中大肠杆菌的数目，将滤膜放在_________培养基上培养，根据培养基上黑色菌落的数目计算出大肠杆菌的数量。
（4）对培养基灭菌常用的方法是_____。此方法用到下图仪器，图中甲、乙、丙指示的依次是_____。（填序号）
①安全阀、排气阀、压力表
②排气阀、安全阀、压力表
③安全阀、排气阀、温度表
④排气阀、安全阀、温度表

【推荐3】[生物一选修1：生物技术实践]工厂的污水池含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。

（1）加入化合物A的培养基属于____________培养基。化合物A可为目的菌提供生长所需的________等营养物质。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_____________。
(2)微生物培养过程中，防止杂菌污染的关键技术是_____________，为了排除杂菌污染如何设计对照实验___________________。
(3)在农业生产研究中,常需要进行微生物的培养和计数。下图是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一目的,操作上有很多注意事项。请列举两项。

_________________________________________________________________。

【推荐1】苯酚具有很强的毒性，有致畸、致癌和致突变作用。选育苯酚分解菌用于降解工业废水中的苯酚具有重要意义。请回答:
（1）从富含苯酚的土壤中分离苯酚分解菌时，培养基应以为苯酚为唯一碳源，原因是_______________________________________________________。
（2）苯酚分解菌为多种细菌，若在分离苯酚分解菌的同时对其计数，可用 _________法将菌液接种在培养基上。通过观察培养基上的___________________结合显微镜下的菌体观察完成对苯酚分解菌的菌种鉴定。
（3）研究表明分解苯酚的关键酶苯酚羟化酶，它在细菌细胞内的 ________上合成，属于___________填“胞内酶”或“胞外酶”)。
（4）苯酚分解菌的固定化常用包埋法。若用海藻酸钠溶液固定苯酚分解菌时，形成的胶粒球度不良出现拖尾，可能的原因是__________________________。与直接使用苯酚分解菌相比，使用固定化苯酚分解菌__________________的优点。

【推荐2】研究人员从金环蛇毒液中分离得到一种新型抗菌肽 CBF，其抗菌活性强、安全性好，同时具有抗炎作用，是抗生素的潜在替代品。
(1)运用基因工程技术，大规模生产抗菌肽，首先要从采集的麦秸秆垛底层土样分离枯草芽孢杆菌。制备的土壤悬液可采用____法分离纯化枯草芽孢杆菌。
(2)选用枯草芽孢杆菌为受体菌，通过转化法将构建好的基因表达载体导入枯草芽孢杆菌。目的基因在受体菌中能表达，但在对抗菌肽 CBF 功能进行检测时发现其功能异常，推测可能的原因是____（答一点即可），请你试提出一个相应的解决方案____。
(3)由于抗菌肽的抗菌特性使得它们对宿主菌具有潜在的致命毒性，影响抗菌肽的产量。利用SUMO融合技术（原理如图1：SUMO-CBF融合基因可以编码融合蛋白）在枯草芽孢杆菌中重组表达并制备具有活性的重组抗菌肽CBF可以减弱其对宿主菌的毒性。

SUMO-CBF融合基因可以拼接成功的理论基础是____（答两点即可）。
(4)为探究重组抗菌肽CBF-化学合成抗菌肽CBF联合抗菌机理，科学家利用透射电镜观察了各组金黄色葡萄球菌细胞内的超微结构，结果如图2。请据图回答问题。

结果显示：
（a）未加抗菌剂：细菌菌体较小，其细胞质分布均匀；
（b）化学合成抗菌肽CBF处理：细胞壁和细胞膜等结构不光滑，略显粗糙；
（c）重组抗菌肽CBF处理：细胞质出现较明显的固缩及空泡化现象；
（d）重组抗菌肽 CBF-化学合成抗菌肽 CBF联合处理：细胞壁及细胞膜等结构发生破裂，细胞质出现了严重的固缩及空泡化现象。
①设置 a组的目的是____。
②由此推测与c组比较，d组使金黄色葡萄球菌细胞质出现严重固缩及空泡化现象的机理是____。

【推荐3】回答下列（一）（二）两小题：
（一）回答下列与酿酒相关的问题：
（1）酒的种类大体分为白酒、果酒、啤酒和黄酒四类，制作方法各不相同，但都是由酵母菌发酵完成的。欲纯化野生酵母菌，最简单的分离方法是____________________，若用果汁酿造果酒，可在果汁中加入果胶酶和果胶甲酯酶将果胶完全分解成________________________，从而提高果汁的出汁率。
（2）啤酒是以大米和大麦为原料，用大麦芽的__________将淀粉水解糖化，过滤后得到麦芽汁，麦芽汁中加入啤酒花以抑菌并增加特有的苦味和香味，然后在麦芽汁中加入啤酒酵母发酵，发酵过程中通过控制____________________________（至少答出两点）等条件可得到不同风味的啤酒。
（3）如果制作的啤酒中含蛋白质较多且易混浊，可用木瓜蛋白酶处理使啤酒澄清。为节约生产成本，实现酶的重复利用，可以将酶进行__________处理。为测定木瓜蛋白酶对蛋白质的水解作用，可以用Lovery测定法对木瓜蛋白酶处理后的蛋白质溶液样品进行蛋白质含量检测。该检测方法的原理是：碱性环境下蛋白质分子中的肽键能与Cu²⁺生成络合物，同时将Cu²⁺还原成Cu⁺，BCA（二喹啉甲酸）试剂可特异性与Cu⁺结合，形成稳定的有颜色的复合物，在562nm处有高的光吸收值。颜色的深浅与蛋白质浓度____________，根据光吸收值大小，从____________________上查出相应值，计算出蛋白质的含量。若计算得到的蛋白质含量越高，则说明酶的活性__________。
（二）现代生物科技对人类生活、生产和社会发展产生了巨大影响，请回答下列与利用现代生物技术培育新品种有关的问题：
（1）转基因抗虫棉是改革开放以来我国棉花产业自主创新的缩影。与传统育种方法相比，基因工程育种的优点有 ________________________________________ （至少写两点）。
（2）苏云金杆菌含有抗虫基因，可以用于培育抗虫植物。首先获取苏云金杆菌的抗虫基因：提取苏云金杆菌的 DNA，用______________切割成不同片段，通过载体导入不同的受体菌，构建_____________，让全部基因表达，利用单克隆抗体获得______________与表达产物结合筛选出抗虫基因。然后以_____________作为载体，通过农杆菌转化法导入植物细胞。抗虫基因能在植物细胞中表达，关键是要在其两端连接上植物细胞特有的启动部位与终止部位，使植物细胞内的____________ 能与之结合及脱离，从而启动及终止转录。
（3）原生质体培养在育种中有重要作用：一方面可以借助基因工程方法培育转基因植株，再者可以通过_________________方法培育杂种植株。原生质体再生细胞壁后可发生类似受精卵发育成胚的过程，经过分裂、分化、_______________和形态建成而发育成胚状体。

【推荐1】生物技术的迅速发展，给社会带来了巨大的经济效益，受到社会的广泛重视，请回答下列生物技术方面的问题：
(1)天然植物色素对人体健康没有危害，作为添加剂大大丰富了人们的生活。实验室提取植物色素常用的方法是__________法；植物芳香油主要通过__________法获得。
(2)纤维素可用来生产乙醇燃料，有些微生物能合成___________________分解纤维素，从土壤中分离此类微生物时需向培养基中加入纤维素粉作为______________________，这种培养基属于______________ 。
(3)在制备固定化酵母细胞的过程中，溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，目的是_________________________ 。如果在CaCl₂溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明 _______________ 。
(4)微生物培养过程中，获得纯培养物的关键是__________________________，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是_________________________。

【推荐2】【生物生物技术实践】纤维素分解性细菌是能分解纤维素的细菌。由于纤维素酶等的作用，纤维素可一直被分解到葡萄糖为止，有时在分解过程中会积累纤维二糖。这类细菌多见于腐植土中，下面是分离纤维素分解菌的实验流程。
土壤取样→①→梯度稀释→接种到②→挑选产生③的菌落
(1)以上实验流程中①是________ ，①过程中使用的培养基是________（液体培养基、固体培养基）；②是________，③是________。
(2)过程②用到的培养基中加入了一种染料与________形成________，刚果红染色法有两种，一种是先培养____，再加入刚果红进行颜色反应；另一种是在________就加入刚果红。
(3)菌落周围出现透明圈说明纤维素分解菌能分泌纤维素酶，该酶是一种复合酶至少包括________，并最终把纤维素分解成________，

【推荐3】根据资料回答下列问题：
资料一：瘤胃是反刍动物的第一胃，不同品种的反刍动物瘤胃内微生物的种类和数量不同，含细菌多的氮利用率高，含真菌多的碳利用率高。
资料二：经研究发现，A品种牛瘤胃内容物每毫升细菌数为7.30×10¹⁰、真菌数为1.36×10⁵；B品种牛瘤胃内容物每毫升细菌数为3.78×10¹⁰、真菌数为1.6×10⁵。
(1)华北地区每年6月份都会产生大量的小麦秸秆，要得到能分解秸秆的目的菌，最好选择________(填“A品种牛”或“B品种牛”)的瘤胃内容物，还需将培养基的pH调至________(填“酸性”“碱性”或“中性”)。获得该类目的菌还需要选择培养，原因是________________________________。
(2)将得到的目的菌涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上，该培养基加入的________能与纤维素形成红色复合物。科研人员分离得到了表中的4个菌株，其中最适合作为目的菌的是________号，判断依据是________最大。

菌株	透明圈直径R	菌株直径r	R/r
1号	0.4	0.3	1.3
2号	1.2	0.6	2.0
3号	2.2	0.7	3.1
4号	2.1	0.9	2.3

(3)现利用稀释涂布平板法测定该目的菌的数量，在同一稀释倍数下4个平板上均接种0.1 mL样品溶液，菌落数分别为156、178、486、191，通过计算得知原样品溶液中每毫升含有目的菌1.75×10⁸个，则稀释倍数是________。
(4)因有些微生物也能降解色素，为了确定筛选分离得到的微生物是产生纤维素酶的纤维素分解菌，还需要进一步测定，最好的方法是________。
A．对分解的纤维素进行定量测定
B．对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定
C．对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定
D．对纤维素分解菌进行定量测定

【推荐1】苹果树腐烂病由真菌感染引起，是限制苹果产量的重要因素之一，目前该病以化学防治为主。为了开发生物防治的途径，研究者拟从土壤中分离筛选出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌。实验流程如图1：

（1）分离筛选土壤中的芽孢杆菌        
图1中①取5g土壤加入____________ mL无菌水中充分振荡得到10^-1的土壤悬液。进行系列稀释后用___________法进行接种，每个浓度重复3次。将接种后的平板________，以防止冷凝水滴落造成污染。37℃条件下培养24小时，根据__________特征鉴别出芽孢杆菌并进一步纯化。
（2）筛选能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌
图1中，应取直径为5mm的____________的菌落移置于A处，B处接种______。培养3～5天，测量并计算抑菌率。筛选出抑菌率最高的菌株，抑菌效果如图2。请将抑菌率的计算公式补充完整：抑菌率（%）= _____   /(D-5)×100%（用图2中的字母表示）

（3）测定筛选出的抗菌菌株对感染了苹果树腐烂病菌枝条的抑菌率        
实验过程如表1，请在空白处补充相关内容。_______

在相同且适宜的条件下培养，7天后测量并计算抑菌率。实验结果如表2。

由表中数据可知：发酵原液对苹果树腐烂病菌有明显的抑制作用。依据是随着发酵滤液稀释倍数的不断增加，__________。
（4）请你说出与化学防治相比，生物防治的优势是__________。

【推荐2】水质的细菌检查是应用微生物学的任务之一。其实验步骤如下：
(一）采样
①自来水：打开水龙头，放水3〜5min，关闭水龙头用酒精棉球灼烧水龙头，再开水龙头1〜2min后，用无菌瓶取水样。
②湖水（取样操作略）
(二）水中细菌总数测定
①自来水：汲取lmL水样→注入无菌培养皿→加入（45〜50℃)的牛肉膏蛋白胨培养基→旋转混匀→静止凝固→放置培养→观察计数。
②湖水：稀释水样（其他操作同①）。
请回答下列问题：
（1）进行上述实验需要用___________法和__________法依次对使用的玻璃仪器和培养基进行灭菌，使用_________(填物质）对操作者手进行消毒。
（2）本实验使用的培养基含有水、碳源、_________、___________和_________等成分。
（3）取样时用酒精棉球灼烧水龙头的作用是防止_______进入样品，影响实验结果。将培养基加入培养皿时应在___________旁进行操作；在向培养皿加入培养基前，要使装有培养基的容器瓶口迅速通过_______；在放置培养操作时，应将平板（培养皿）___________放置；对湖水样品的稀释范围以达到培养后每个平板中菌落数在____________之间最为适合。

【推荐3】国家生活饮用水卫生标准规定：接种1 mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，在37℃下经24 h培养，所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题：
（1）用无菌三角瓶取水样前，取样器（玻璃制品）需使用_____________法灭菌。
（2）该小组通过滤膜法测定细菌总数，将30 mL水样平均分成3份进行过滤，再将3份滤膜分别放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养，培养时应将平板倒置，其原因是______________。
（3）在37℃下经24 h培养，结果如下表：

	平板1	平板2	平板3
菌落数（个）	370	350	380

据上表结果判断，所取水样测定结果_____（填“符合”或“不符合”）饮用水的标准。
（4）该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目，可将滤膜放在含__________培养基上，计算培养基上______（颜色）菌落的数目。
（5）制作果汁时可加入果分解胶酶、果胶酯酶或____________以分解果胶，提高果汁出汁率和澄清度。生产果胶酶可从黑曲霉中提取，下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是____(A.蛋白胨和酵母提取物培养基B.尿素固体培养基C.MS培养基 D.添加蔗糖的豆芽汁培养基）。