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题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:252 题号:18383972
普通棉花中含β-甘露糖苷酶(GhMnaA2)基因,能在纤维细胞中特异性表达,产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解,棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种,科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体,利用农杆菌转化法导入棉花细胞,成功获得转基因棉花品种,具体过程如图所示。回答下列问题:

(1)①和②过程中所用的限制性内切酶分别是__________
(2)基因表达载体除了图示组成外,还应有_____(答出2点即可)。
(3)③过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切正义基因表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、9.45kb四种长度的DNA片段,则用NotI酶切反义基因表达载体获得的DNA片段的长度应是__________
(4)④过程中利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中,整合到棉花细胞染色体DNA的区段是_____,转化后的细胞再通过_____形成植株。
(5)导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对,从而抑制_____过程,其意义是_____

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非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐1】科研人员将四种“关键基因”(Oct3/4、Sox2、KIf4、c-Myc)通过特定病毒导入到小鼠的成纤维细胞,诱导其发生转化,得到具有多项分化潜能的ips细胞。回答下列问题:
(1)将“关键基因”导入受体细胞时所选用的病毒与诱导动物细胞融合时所选用的病毒区别是___。上述四种“关键基因”影响成纤维细胞中基因的______
(2)诱导成纤维细胞转化的过程类似于植物组织培养的_____过程,而在培养胡萝卜组织块时,最好选用____部分通过该过程形成_____组织。
(3)在成纤维细胞的培养过程中,需要____________,以保证无菌无毒的环境,采用_____(培养容器),将其置于_____的混合气体培养箱中进行培养。
2021-01-15更新 | 88次组卷
非选择题-解答题组 | 适中 (0.65)
【推荐2】I.复椰子树属棕榈复椰子属,树高15~30米,树干通直,直径约30厘米,叶呈大扇形,长7米,宽2米,雌雄异株。复椰子的雌花从授粉到果实成熟需要10~13年之久,种子发芽期也需3年,而且要求烈日照晒。由于复椰子树种子形状奇特,体积庞大(重达20千克,直径30厘米)有些人将它用作容器,如今复椰子树已濒临灭绝。复椰子果肉煮汤饮服,有治疗久咳和止血的功效。有人想到了一个好的方法,制造“人工种子”,解决复椰子树的种子形成时间漫长的问题。其操作流程如下:

   

(1)图中的外植体是_____,先用_____冲洗,再消毒。常用的消毒剂是_____(写两种)。
(2)人工种皮除了有保护作用以外,还要有_____性,以满足胚状体代谢的需要。为了保证胚状体在适宜条件下成功发芽发育成幼苗,而不会腐败变质,人工胚乳除加入适量的养分(如水、无机盐、有机碳源)外,还可以适当添加农药、抗生素、有益菌等。为了促进胚状体的生长发育,还可以向人工种皮中加入一些_____(植物激素/植物生长调节剂/生长素类似物)。
II.科研人员构建了可表达 WRK10-MYC融合蛋白的重组农杆菌 Ti质粒并成功转化植物细胞得到转基因植株,该质粒的部分结构如图2所示,其中 Kan 为卡那霉素抗性基因,Hyg 为潮霉素抗性基因,MYC标签序列编码标签短肽 MYC,WRK10 蛋白为转录因子。

   

(3)位于 Ti 质粒不同位置的卡那霉素抗性基因和潮霉素抗性基因的作用分别是_____。图中启动子的方向与对应基因转录的方向一致,从编码链的角度分析 P1 和 P2方向不同的原因是_____
(4)已知利用LP 和 RP扩增结果为大带,BP 和 RP扩增结果为小带。可用图中三引物进行两次PCR 的方法鉴定转基因植物后代中的纯合转基因植株。T-DNA 插入植物染色体DNA分子后会抑制原插入位点两侧引物的扩增产物的出现,则纯合转基因植株 PCR 检测结果为_____(填“大带”或“大带和小带”或“小带”)。
2024-06-07更新 | 14次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐3】为了获得抗蚜虫棉花新品种,研究人员将雪花莲凝集素基因(GNA)和尾穗苋凝集素基因(ACA)通过一定方法形成GNA—ACA融合基因,并将该融合基因与载体(pBI121)结合获得重组载体,如图所示,然后导入棉花细胞。图中KpnⅠ、BsaBI、XhoⅠ为不同限制酶。分析并回答下列问题:

(1)据图分析,为获得GNA—ACA融合基因,可使用限制酶_________和DNA连接酶处理基因GNA和ACA。
(2)图中把GNA—ACA融合基因重组到质粒的过程是基因工程的核心步骤,即_________的构建,其目的是__________,构建的该结构除了图中载体(pB1121)所含有的结构外,还应包括_________(答出3点)等结构。
(3)成功获取含GNA—ACA融合基因的棉花细胞后,可通过植物组织培养技术获取转基因棉花植株,其依据的原理是_________,将含有GNA—ACA融合基因的棉花细胞培养成一株完整植株的基本程序是_________(用流程图表示)。
2023-03-18更新 | 263次组卷
共计 平均难度:一般