研究者改造与肠道共生的大肠杆菌,口服该工程菌后激活机体特异性免疫,实现肿瘤的预防和治疗。
(1)部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡(OMV),如图1.OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。细菌溶素A(ClyA)是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白。
研究者利用含图2所示元件的表达载体转化大肠杆菌制备工程菌,ClyA基因的作用是_____ ;Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合,提高树突状细胞_____ OMV的能力。
(2)为研究上述工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应的效果,研究者用健康小鼠进行如下实验:
注:“+”、“-”代表是否饮用;
口服工程菌12小时后其在肠道内存在数量较多。
①第4、5组的操作是_____ 。图3结果说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应,理由是_____ 。
②为进一步验证上述结论,研究者进行如下实验:先加入_____ (填选项前字母)保温后漂洗,再加入_____ (填选项前字母)保温后漂洗,检测荧光细胞的数目,若第5组_____ 为最大值,则上述结论成立。
A.带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物
B.带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体
C.第1-5组小鼠脾脏细胞
③肿瘤患者术后极易复发,研究者重复上表实验,并在第3次口服工程菌后第50天给小鼠注射黑色素瘤细胞。目的是_____ 。
(3)该工程菌的研发为不同肿瘤的精准治疗和预防提供了可能。依据本研究,设计针对肺癌治疗的工程菌表达载体元件:_____ 。
(1)部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡(OMV),如图1.OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。细菌溶素A(ClyA)是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白。
研究者利用含图2所示元件的表达载体转化大肠杆菌制备工程菌,ClyA基因的作用是
(2)为研究上述工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应的效果,研究者用健康小鼠进行如下实验:
组别 | 第0、3、8天口服工程菌 | 每次服用工程菌12小时后,饮用含阿拉伯糖的水 | 结果检测 |
第1组 | 空载体 | + | 第12天,每组随机取5只小鼠等量的脾脏细胞与黑色素瘤细胞共培养,检测杀伤率,结果如图3. |
第2组 | ClyA-Fc | + | |
第3组 | ClyA-OVA | + | |
第4组 | |||
第5组 |
注:“+”、“-”代表是否饮用;
口服工程菌12小时后其在肠道内存在数量较多。
①第4、5组的操作是
②为进一步验证上述结论,研究者进行如下实验:先加入
A.带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物
B.带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体
C.第1-5组小鼠脾脏细胞
③肿瘤患者术后极易复发,研究者重复上表实验,并在第3次口服工程菌后第50天给小鼠注射黑色素瘤细胞。目的是
(3)该工程菌的研发为不同肿瘤的精准治疗和预防提供了可能。依据本研究,设计针对肺癌治疗的工程菌表达载体元件:
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更新时间:2023-04-03 20:04:59
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【推荐1】肿瘤疫苗(OVA)可预防或治疗肿瘤,其原理是将肿瘤抗原导入人体内,激活患者自身的免疫应答,从而达到控制或清除肿瘤的目的。物质P作为安全的纳米材料,常用作疫苗载体。
(1)下列可作为肿瘤抗原的是________。
(2)肿瘤疫苗作为抗原被________________ 摄取并进入溶酶体,被加工处理后,呈递在细胞表面,然后传递给________ 细胞,进而激活B细胞,引发体液免疫;从溶酶体逃逸到细胞质基质的疫苗,被降解成多肽,致使宿主细胞表面某些分子发生变化,被________________ 细胞识别,引发细胞免疫。
(3)物质Q具有干扰溶酶体膜稳定性的作用。将Q引入纳米疫苗(OVAP)后与体外培养的树突状细胞(DC细胞)共孵育,得到结果如图1。
①加入细胞悬液的培养板需置于CO2恒温培养箱中培养以提供适宜的______________ 。
②与普通疫苗相比,纳米疫苗更易被DC细胞摄取处理。得出结论的依据是_____________ 。比较2、3组的实验结果,说明_______________ 。
(4)研究者进一步对Q引入后的纳米疫苗进行了体内效果评价。将三类疫苗注射到肿瘤模型小鼠体内,结果如图2。结果说明_____________ 。
(1)下列可作为肿瘤抗原的是________。
A.衰老肿瘤细胞 | B.肿瘤相关蛋白或多肽 |
C.肿瘤细胞内的脱氧核糖 | D.含有肿瘤抗原基因的质粒 |
(3)物质Q具有干扰溶酶体膜稳定性的作用。将Q引入纳米疫苗(OVAP)后与体外培养的树突状细胞(DC细胞)共孵育,得到结果如图1。
①加入细胞悬液的培养板需置于CO2恒温培养箱中培养以提供适宜的
②与普通疫苗相比,纳米疫苗更易被DC细胞摄取处理。得出结论的依据是
(4)研究者进一步对Q引入后的纳米疫苗进行了体内效果评价。将三类疫苗注射到肿瘤模型小鼠体内,结果如图2。结果说明
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【推荐2】调定点学说认为,人体存在体温调定点。假如人的体温调定点是37℃,当体温高于或低于37℃时,机体能通过相关调节使体温恢复到37℃左右。人体的体温调定点并非一成不变,如病菌、病毒感染等不利因素能引起人体产生致热原(EP),EP会引起体温调定点改变进而导致发热。某人受病毒感染引起发烧,下图是他的体温测量记录。
(1)维持人体体温的热量主要来源于_____ ,体温调节中枢位于_____ 。
(2)AB段病人常表现为皮肤血管收缩、骨骼肌颤栗等表现,并常伴有“害冷”的感觉,结合资料分析其原因是:病毒感染产生的致热源(EP)使人体体温调定点升高至40℃左右,低于调定点的体温刺激_____ 产生兴奋,一方面传至大脑皮层产生_____ ;另一方面传至_____ ,再经传出神经引起_____ ,使体温迅速升高。
(3)图中CD段机体通过_____ 细胞对病毒感染细胞发起攻击,并通过_____ 细胞产生的_____ 快速消灭EP,使体温调定点恢复到正常体温。综上所述,体温调节是_____ 调节机制。
(1)维持人体体温的热量主要来源于
(2)AB段病人常表现为皮肤血管收缩、骨骼肌颤栗等表现,并常伴有“害冷”的感觉,结合资料分析其原因是:病毒感染产生的致热源(EP)使人体体温调定点升高至40℃左右,低于调定点的体温刺激
(3)图中CD段机体通过
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【推荐3】糖尿病严重威胁人类健康,其发病机理复杂。图1表示两种糖尿病部分发病机理,而肥胖;高热量饮食是Ⅱ型糖尿病的主要诱因;图2表示游离的脂肪酸(FFA)对糖代谢的影响。请回答下列问题:
(1)图1中b是____________ ,该图所示的两种糖尿病中,____________ (填“Ⅰ型”或“Ⅱ型”)糖尿病可以采用注射胰岛素制剂的方法治疗。
(2)胰岛素抵抗是指靶器官对胰岛素不敏感。机体为克服胰岛素抵抗,胰岛B细胞____________ (填“增加”或“减少”)胰岛素的分泌量,可造成该细胞受损,引发Ⅱ型糖尿病。
(3)游离脂肪酸(FFA)主要来源于皮下和内脏脂肪的分解,引起胰岛素抵抗。请通过图2分析,游离脂肪酸在胰岛素抵抗形成中起的作用是____________ 。
(4)Ⅰ型糖尿病由胰岛B细胞损伤引起,患病率具有种族差异性,患者血液中含有抗胰岛B细胞的抗体和效应T细胞。据此推测:Ⅰ型糖尿病是由基因决定的,针对胰岛B细胞的一种____________ 病;胰岛B细胞的损伤是机体通过____________ 免疫导致的。
(1)图1中b是
(2)胰岛素抵抗是指靶器官对胰岛素不敏感。机体为克服胰岛素抵抗,胰岛B细胞
(3)游离脂肪酸(FFA)主要来源于皮下和内脏脂肪的分解,引起胰岛素抵抗。请通过图2分析,游离脂肪酸在胰岛素抵抗形成中起的作用是
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【推荐1】下图是人体内某些免疫细胞的分化和体液免疫过程,数字表示过程,字母表示细胞或物质。请分析回答:
(1)据图分析,e是___________ ,X是________ ,Y是________ 。
(2)在⑥过程中,b细胞发挥的作用是_________________________________________ 。溶酶体分解抗原的过程在免疫学上属于____________ 免疫。
(3)若X是感染人体的病毒,则X必须在______________ 增殖,此时若想将其彻底消灭,则需经过____________ (填“体液免疫”或“细胞免疫”)。
(4)某患儿胸腺先天性缺失,与正常儿童相比,该患儿缺少哪些免疫功能?__________________ 。
(1)据图分析,e是
(2)在⑥过程中,b细胞发挥的作用是
(3)若X是感染人体的病毒,则X必须在
(4)某患儿胸腺先天性缺失,与正常儿童相比,该患儿缺少哪些免疫功能?
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【推荐2】T细胞,是由来源于骨髓的淋巴干细胞,在胸腺中分化、发育成熟后,通过淋巴和血液循环而分布到全身的免疫器官和组织中发挥免疫功能的。T细胞按照功能可以分成很多种类,请据此回答问题:
(1)辅助性T细胞的表面有抗原接受器,经过___________ 摄取和处理的病原体会暴露出其特有的抗原,辅助性T细胞接受抗原刺激增殖、分化,并产生淋巴因子。细胞因子的作用是__________ 。
(2)细胞毒性T细胞能通过与靶细胞密切接触,使靶细胞裂解死亡,该免疫过程可消灭___________ 的病原体。
(3)综上所述,T细胞在免疫过程中的作用是___________ 。
(4)调节性T细胞(简称Tregs)是维持机体免疫耐受的重要因素之一。科学实验发现,正常小鼠体内均有胰岛B细胞特异性的细胞毒性T细胞,清除小鼠体内的调节性T细胞后,小鼠出现多食、多饮、多尿和消瘦。
①该小鼠表现出“三多一少”症状的原因是_____________ ;
②该小鼠出现的病症,在免疫学中称为__________ ;
③该实验表明,调节性T细胞的功能是_______________ ;糖尿病可能与___________ 有关。
(1)辅助性T细胞的表面有抗原接受器,经过
(2)细胞毒性T细胞能通过与靶细胞密切接触,使靶细胞裂解死亡,该免疫过程可消灭
(3)综上所述,T细胞在免疫过程中的作用是
(4)调节性T细胞(简称Tregs)是维持机体免疫耐受的重要因素之一。科学实验发现,正常小鼠体内均有胰岛B细胞特异性的细胞毒性T细胞,清除小鼠体内的调节性T细胞后,小鼠出现多食、多饮、多尿和消瘦。
①该小鼠表现出“三多一少”症状的原因是
②该小鼠出现的病症,在免疫学中称为
③该实验表明,调节性T细胞的功能是
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(0.65)
【推荐3】如图1是人体某种调节方式的示意图,图2为某病毒侵入机体被杀伤过程图解,图3为反射弧中神经一肌肉接头的结构及其生理变化示意图,请据图回答问题:
(1)图1中A细胞产生的C物质通过图示途径,最终作用于B细胞。如果A细胞是垂体细胞,B细胞为肾小管和集合管细胞,则C物质为_____________________ 。
(2)如果图1中A细胞是某人胰岛B细胞且功能正常,却在体内检测到含有抗胰岛素受体的抗体,则该人___________ (填“能”或“不能”)通过注射胰岛素有效调节其血糖水平,该疾病从免疫学的角度分析属于______________________ ,______________________ 与靶细胞密切接触,激活靶细胞内溶酶体酶,导致靶细胞裂解死亡,通过该细胞进行免疫的方式称为______________________ 。
(3)图3中传来神经冲动的神经属于反射弧中的___________ 神经。
(4)根据图3分析可知,重症肌无力的病因是患者免疫系统把Ach受体当作抗原,造成Ach不能与Ach受体正常结合,导致___________ 转换过程受阻。
(1)图1中A细胞产生的C物质通过图示途径,最终作用于B细胞。如果A细胞是垂体细胞,B细胞为肾小管和集合管细胞,则C物质为
(2)如果图1中A细胞是某人胰岛B细胞且功能正常,却在体内检测到含有抗胰岛素受体的抗体,则该人
(3)图3中传来神经冲动的神经属于反射弧中的
(4)根据图3分析可知,重症肌无力的病因是患者免疫系统把Ach受体当作抗原,造成Ach不能与Ach受体正常结合,导致
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名校
【推荐1】下图为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,EcoR Ⅰ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8 Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离,1Kb=1000个碱基对长度。请据图回答:
(1)质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是_____________ 、____________ 。
(2)如果是两两重组,可能有__________ 种长度的重组结果。
(3)基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤。现运用_____ 酶切质粒,完全酶切后进行电泳观察,若出现长度为1.1kb和______ kb,或者_____ kb和________ kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计)。
(4)将筛选含有目的基因的重组质粒导入大肠杆菌的载体可以是__________ 。
A.质粒 B.动物病毒 C.噬菌体 D.植物病毒
(5)为了筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌,首先将大肠杆菌在培养基上培养,得到如图示1的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含_________ 的培养基上培养,得到如图2的结果(空圈表示与图1对照无菌落的位置),挑选目的菌的位置为____________ 。
(6)PvuⅠ能识别的序列和切点是–G↓GATCC–请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图____________ 。
(1)质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是
(2)如果是两两重组,可能有
(3)基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤。现运用
(4)将筛选含有目的基因的重组质粒导入大肠杆菌的载体可以是
A.质粒 B.动物病毒 C.噬菌体 D.植物病毒
(5)为了筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌,首先将大肠杆菌在培养基上培养,得到如图示1的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含
(6)PvuⅠ能识别的序列和切点是–G↓GATCC–请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图
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解题方法
【推荐2】科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。该过程所用的质粒A与含生长激素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示,其中切割位点相同的酶不重复标注。限制性核酸内切酶BamHI、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。请回答下列问题。
(1)图1质粒中没有标注出来的基本结构是___ 。启动子的作用是___ 。
(2)限制酶作用的化学键名称是___ 。将图2中的DNA用Sau3AⅠ完全酶切后,反应管中有____ 种DNA片段。若BamHI酶切的DNA末端与Sau3AⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位用Sau3AⅠ___ (填“能”、“不能”或“不一定能”)切开,连接部位用BamHI___ (填“能”、“不能”或“不一定能”)切开。
(3)在构建基因表达载体时,为防止目的基因的反向连接,应选用限制酶___ 切割质粒,选用限制酶___ 切割含目的基因的DNA片段。
(4)将转化后的大肠杆菌涂布在含有相应抗生素的培养基上,得到如图3所示的结果(圆点表示菌落,影印平板法是一种能达到在一系列培养皿的相同位置上出现相同遗传型菌落的接种培养方法)。培养基A中添加的抗生素是___ ,培养基B中添加的抗生素是___ ,对比分析培养基A和培养基B上所形成的菌落,___ (填数字)菌落中的大肠杆菌导入了重组质粒。
(1)图1质粒中没有标注出来的基本结构是
(2)限制酶作用的化学键名称是
(3)在构建基因表达载体时,为防止目的基因的反向连接,应选用限制酶
(4)将转化后的大肠杆菌涂布在含有相应抗生素的培养基上,得到如图3所示的结果(圆点表示菌落,影印平板法是一种能达到在一系列培养皿的相同位置上出现相同遗传型菌落的接种培养方法)。培养基A中添加的抗生素是
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解题方法
【推荐3】八氢番茄红素合酶(其基因用psy表示)和胡萝卜素脱饱和酶(其基因用crtI表示)参与β-胡萝卜素的合成。pmi为磷酸甘露醇异构酶基因,它编码的蛋白质可使细胞在特殊培养基上生长。科学家将psy和crtI基因转入水稻,使水稻胚乳中富含β-胡萝卜素,由此生产出的大米称为“黄金大米”。请根据以上信息回答下列问题。
【这项研究成果发表在《自然·生物技术》(Nature Biotechnology)杂志上】
(1)科学家在培育“黄金大米”时,将crtI和psy基因导入含pmi基因的质粒中,构建了质粒pSYN12424。该项研究的目的基因是______________ ,标记基因是______________ ,质粒pSYN12424的作用是________________________________________ 。
(2)在构建质粒载体时,目的基因序列中能否含有用到的限制酶的识别序列?___________ 。为什么?___________ 。
(3)请查找相关资料,了解科学家为什么要培育“黄金大米”以及当前关于“是否要推广‘黄金大米’”的各种争论。你还可以提出自己的看法,并与同学交流讨论___________ 。
【这项研究成果发表在《自然·生物技术》(Nature Biotechnology)杂志上】
(1)科学家在培育“黄金大米”时,将crtI和psy基因导入含pmi基因的质粒中,构建了质粒pSYN12424。该项研究的目的基因是
(2)在构建质粒载体时,目的基因序列中能否含有用到的限制酶的识别序列?
(3)请查找相关资料,了解科学家为什么要培育“黄金大米”以及当前关于“是否要推广‘黄金大米’”的各种争论。你还可以提出自己的看法,并与同学交流讨论
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【推荐1】针对新冠病毒(SARS-CoV-2)的重组蛋白疫苗、核酸疫苗(包括 DNA 疫苗和RNA 疫苗)等疫苗都在研发当中。下图为其中一种疫苗的研发思路,图中①~⑦表示过程,虚线箭头表示 NcoⅠ、SphⅠ、NheI、BamHⅠ的酶切位点(四种酶的识别序列详见表),标记基因 SUC2 控制合成蔗糖酶,使 P 型酵母菌能利用培养基中的蔗糖生存。
(1)图中①过程需要使用_____ 酶先得到 cDNA,再使用PCR 技术扩增得到S 基因。
(2)为使③过程顺利进行,需使用限制酶_____ 切割质粒B。
(3)图中表示筛选的过程是_____ (填编号),为达到利用标记基因筛选的目的,普通的P 型酵母菌应该满足的代谢特点是_____ 。
(4)重组疫苗注入志愿者体内后, S 蛋白基因指导合成的 S 蛋白作为_____ ,刺激机体产生能与之相结合的抗体,抗体的分泌量可作为检测疫苗对志愿者免疫效果的指标。参加临床试验的志愿者需要满足的条件之一是_____ (填“有”或“无”)SARS-CoV-2 感染史,理由是_____ 。
(5)新型冠状病毒感染的常规检测方法是通过实时荧光 PCR 鉴定。实时荧光 PCR 扩增目的基因,需额外添加荧光标记探针(一小段单链 DNA,可与目的基因中部序列特异性结合)。当探针完整时,不产生荧光。在PCR 过程中,与目的基因结合的探针被TaqDNA 聚合酶水解,R 与 Q 分离后,R 发出的荧光可被检测到(如图甲),通过实时荧光 PCR 检测新型冠状病毒感染时,检测到的荧光强度变化如图乙。
①与指数增长期相比,线性增长期目的基因数量的增长率下降,原因有_____ 。
②Ct 值的含义:在PCR 扩增过程中,每个反应管内的荧光信号达到设定的荧光阈值时所经历的扩增循环数。因此,当样本中初始模板越多时,Ct 值就_____ 。
③某新型冠状病毒核酸检测说明书标明,Ct≤37 判定为阳性,Ct>40 或无Ct 值判定为阴性。图乙所示新型冠状病毒核酸检测结果应判定为_____ 。
④阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染。可能产生假阴性的因素有_____ 。
a、取样太早,样本中病毒量少,达不到实时荧光PCR 检测阈值
b、样本被污染,RNA 酶将病毒 RNA 降解
c、病毒发生变异
限制酶 | NcoⅠ | SphⅠ | NheI | BamHⅠ |
识别序列和切割位点 | C↓CATGG | GCATG↓C | G↓GATCC | G↓CTAGC |
(1)图中①过程需要使用
(2)为使③过程顺利进行,需使用限制酶
(3)图中表示筛选的过程是
(4)重组疫苗注入志愿者体内后, S 蛋白基因指导合成的 S 蛋白作为
(5)新型冠状病毒感染的常规检测方法是通过实时荧光 PCR 鉴定。实时荧光 PCR 扩增目的基因,需额外添加荧光标记探针(一小段单链 DNA,可与目的基因中部序列特异性结合)。当探针完整时,不产生荧光。在PCR 过程中,与目的基因结合的探针被TaqDNA 聚合酶水解,R 与 Q 分离后,R 发出的荧光可被检测到(如图甲),通过实时荧光 PCR 检测新型冠状病毒感染时,检测到的荧光强度变化如图乙。
①与指数增长期相比,线性增长期目的基因数量的增长率下降,原因有
②Ct 值的含义:在PCR 扩增过程中,每个反应管内的荧光信号达到设定的荧光阈值时所经历的扩增循环数。因此,当样本中初始模板越多时,Ct 值就
③某新型冠状病毒核酸检测说明书标明,Ct≤37 判定为阳性,Ct>40 或无Ct 值判定为阴性。图乙所示新型冠状病毒核酸检测结果应判定为
④阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染。可能产生假阴性的因素有
a、取样太早,样本中病毒量少,达不到实时荧光PCR 检测阈值
b、样本被污染,RNA 酶将病毒 RNA 降解
c、病毒发生变异
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【推荐2】假结核耶尔森氏菌(细菌Y)在与其他细菌的竞争中常占据优势,推测与其tcel基因和tcil基因的表达有关。
(1)细菌Y的核糖体可与尚未转录完成的__________ 结合进行蛋白质的翻译。
(2)研究者用获取的基因分别构建重组质粒。将转化后的大肠杆菌在相同且适宜的环境中进行培养、计数,绘制出大肠杆菌生长曲线。如图1。
转化前需先将大肠杆菌处理为____________ 细胞,对照组大肠杆菌导入___________ 。据图1结果推测tcel蛋白对大肠杆菌______ (填“具有”或“没有”)毒性,tcil蛋白可中和tcel蛋白的毒性。
(3)研究者利用野生型细菌Y及其不同突变体进行了如下实验:在固体培养表面放置一张能隔离并吸附细菌滤膜,滤膜不影响菌体吸收培养基中的营养物质。将一种菌(下层菌)滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜,滴加等量的另一种菌(上层菌),共同培养48h后,将两张滤膜上菌体刮下计数,计算上层菌与下层菌数量的比值,得到图2结果:
实验中的____________________ 等均需灭菌处理;对菌体进行计数的方法是:先将菌体进行_________________ ,再_______________ 到固体培养基表面,待菌落数稳定时计数。
(4)tcel蛋白能与细菌表面的B蛋白识别并结合。研究者设计基因表达载体转化获得工程菌,生产出能发出绿色荧光的tcel蛋白,将该蛋白与野生型细菌Y及其B蛋白突变体菌接触后,结果证实tcel蛋白可通过B蛋白进入靶细胞内发挥作用。进一步研究表明tce1蛋白具有DNA水解酶活性。综合上述研究,阐明细菌Y在与其他细菌的竞争中占据优势的原因。_______
(1)细菌Y的核糖体可与尚未转录完成的
(2)研究者用获取的基因分别构建重组质粒。将转化后的大肠杆菌在相同且适宜的环境中进行培养、计数,绘制出大肠杆菌生长曲线。如图1。
转化前需先将大肠杆菌处理为
(3)研究者利用野生型细菌Y及其不同突变体进行了如下实验:在固体培养表面放置一张能隔离并吸附细菌滤膜,滤膜不影响菌体吸收培养基中的营养物质。将一种菌(下层菌)滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜,滴加等量的另一种菌(上层菌),共同培养48h后,将两张滤膜上菌体刮下计数,计算上层菌与下层菌数量的比值,得到图2结果:
实验中的
(4)tcel蛋白能与细菌表面的B蛋白识别并结合。研究者设计基因表达载体转化获得工程菌,生产出能发出绿色荧光的tcel蛋白,将该蛋白与野生型细菌Y及其B蛋白突变体菌接触后,结果证实tcel蛋白可通过B蛋白进入靶细胞内发挥作用。进一步研究表明tce1蛋白具有DNA水解酶活性。综合上述研究,阐明细菌Y在与其他细菌的竞争中占据优势的原因。
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名校
【推荐3】在电影中,蜘蛛侠能产生高强度的蜘蛛丝,其实在现实中,基因工程也创造出了“蜘蛛羊”,该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白,高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域。请回答相关问题:
(1)为保证实验成功,产生蛛丝蛋白的基因需要从________ (基因组/部分基因/cDNA)文库中获取,并与________________ 等调控组件重组在一起,与载体相连构建成为表达载体,再通过________ 等方法,将表达载体导入羊的________ ,获得重组细胞。
(2)将获得的重组细胞培养成早期胚胎后,移植到经过________ 处理的受体母羊子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全搞清楚,所以在早期胚胎的培养中,往往还需要添加________ 。若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”,可将早期胚胎进行________ 处理。
(3)若所得到的“蜘蛛羊”(已知表达载体已进入细胞)乳汁中没有检测到蛛丝蛋白,科学家为判断问题所在,应该用________ 的方法,检测蛛丝蛋白基因是否整合到了染色体上。
(1)为保证实验成功,产生蛛丝蛋白的基因需要从
(2)将获得的重组细胞培养成早期胚胎后,移植到经过
(3)若所得到的“蜘蛛羊”(已知表达载体已进入细胞)乳汁中没有检测到蛛丝蛋白,科学家为判断问题所在,应该用
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