【推荐1】[生物——选修1：生物技术实践]
根据所学微生物的实验室培养和应用知识，完成下列问题。
（1）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有___________________ 、________和高压蒸汽灭菌。
（2）锥形瓶接种过程应在酒精灯火焰附近进行，防止________污染培养基。对无菌操作时用到的玻璃器皿要用________的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的。
（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的________稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到________的表面，进行培养。
（4）平板划线操作（如右图所示）时要做到以下几点：

①第一次划线及每次划线之前都需要对接种环进行 ________，待接种环冷却后才能伸入菌液，以免   ____________。
②划线时最后一区不要与第一区___________
③划线用力大小要适当，防止用力过大将____划破。
（5）土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成________，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。统计样品中的分解尿素的活菌一般用________法，具体的操作流程是土壤取样→______→微生物的培养与观察细菌的计数。
（6）统计的菌落往往比活菌的实际数目低，这是因为_____________。

【推荐2】亚硒酸钠对细菌的生长有明显的毒害作用，土壤中的一些富硒细菌可将其还原为红色单质硒（硒是一种生命活动必需的微量元素）。下图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。

请回答下列问题：
(1)微量元素除影响生物的生命活动外，还有___等其他功能（答出1点）。
(2)获得纯净培养物的关键是___。在取②中的培养液接种到③的培养基表面的过程中，用到的器具除了烧杯、酒精灯之外，还有___（答出两点）。③中培养基加入了亚硒酸钠，从功能上看，③中的培养基属于___培养基，培养之后在④中出现___现象，说明培养基中获得了富硒细菌。
(3)研究小组利用稀释涂布平板法获得的菌落来计算富硒细菌的数目，其依据的原理是___。将10克土壤样品加入90mL无菌水中，逐级稀释后在4个平板上均涂布稀释倍数为10⁵的土壤样品液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为422、156、178和191，则每克土壤中的细菌数量约为___个。

【推荐3】为建设社会主义新农村，解决农村生产生活垃圾处理的问题，南实高三某班给出了如下处理方案：
(1)该班同学想通过富集培养从土壤中筛选出降解玉米秸秆的复合菌：
①为避免杂菌污染，取样时应注意什么？_______（至少答出1点具体措施）。
②富集培养的目的是_________。
(2)化工废水经专业化处理，无污染物后才能排入河流。调查发现，某湖泊附近有一家化工厂，长期向湖偷排工业废水，造成湖中沉积了大量污染物，其中环境污染物M（一种含有C、H、O、N的有机物）难以降解。为了从中分离获得能降解M的细菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

成分	无机盐	淀粉	M	琼脂	水
培养基甲	+	+	+	-	+
培养基乙	+	+	+	+	+

①据表判断，其中成分M是作为唯一________起作用，培养基_____（填“甲”或“乙”）可用于分离能降解M的目的菌。
②在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁵的土壤样品溶液0．1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191．该过程中采取的接种方法是________，1mL原土壤样液中的细菌数量为__________个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的活细菌数较少的原因是__________。

【推荐1】酶是细胞合成的生物催化剂，几乎所有的生命活动都离不开酶。随着生物科学技术的发展，酶已经走出实验室，走进人们的生产和生活。然而，酶的商品化生产和应用并非易事。请回答下面有关酶的问题：
(1)在果汁生产过程中，果胶酶能够提高果汁的出汁率和澄清度，原因是果胶酶能够_______________。为了使果胶酶得到充分利用，需要控制好果胶酶的用量，随着酶的用量增加，________不再改变时，说明酶的用量已经足够。在果汁生产中，除了酶和水果的用量外，影响果汁产量的因素还有___________（答出两点）。
(2)加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，其中应用最广泛、效果最明显的酶制剂是________。应用酶制剂还需要考虑酶活力，1U表示1个酶活力单位，是指在温度为______℃，其他条件，如pH等均为最适的情况下，在1min内转化1mmol的底物所需的酶量。
(3)固定化酶在生产实践中也得到了应用，固定化酶技术是指_____________。一般来说，固定化酶比较适合采用的方法是_______。在工业生产中若要分离出不同的酶，可以采用凝胶色谱法，该方法分离蛋白质的基本原理是______________。

【推荐2】胡萝卜素是一种常用的食用色素，可从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：

（1）筛选酵母菌R时，需要用到________（功能）培养基。若该培养基属于固体培养基，则通常含有的凝固剂是___________。
（2）提取的胡萝卜素可通过___________法进行鉴定。
（3）培养酵母菌R时，温度一般控制在___________。采用___________法接种时需先灼烧接种环。
（4）果胶酶包括___________、果胶分解酶和果胶酯酶等；分离血红蛋白溶液时，离心后自上而下第三层的红色透明液体是______________________。

【推荐3】回答下列（一）、（二）小题
（一）分析以下在食品工业中有关制作果汁、利用果汁酿制果酒、果醋相关工艺及原理的内容：
（1）为提高果汁出汁率和降低浊度，可在榨汁时加入果胶酶和________酶以分解果胶，这些酶可通过培养________等微生物菌体中提取。
（2）在果酒酿造过程中，为促进酵母菌大量繁殖，需先往发酵罐中通入________，然后密闭，有利于获得更多的酒精产物。由于果汁无法高温灭菌，往往含有醋杆菌，但在酿酒时醋杆菌往往不会大量繁殖，主要原因是：________。
（3）要测定果酒中酒精含量，需先将澄清果酒用活性炭处理，目的是________：然后利用重铬酸钾和酒精显色成灰绿色，根据下图的吸收光谱，可用特定量的酒精和重铬酸钾反应，选择波长________nm光的来测定________，通过和标准曲线对照，获得酒精含量。

（4）果酒制果醋时，发酵罐内先填充经________处理的木材刨花，后加入醋杆菌和________。
（二）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
（1）将野外采集的某植物叶片经消毒处理后，去除下表皮，再将其置于经_________处理的较高渗透压的混合酶液中以获得原生质体，去除下表皮的目的是使酶液________，保证酶解充分。植物原生质体的获取过程中一般使用________（填“相同”或“不同"）浓度的甘露醇溶液。
（2）为培育抗虫的转基因植物，将含抗虫基因的DNA和质粒用________酶处理后形成重组质粒，将重组质粒导入上述植物原生质体。原生质体培养过程中，原先________形的原生质体再生细胞壁后形状会明显改变，在液体培养基适宜环境的诱导下分化为________，最后再生出完整的植株。
（3）为了检测抗虫基因是否存在于该转基因植物的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该植物不同组织细胞中的________作为PCR模板。
A．mRNAB．总RNAC．DNAD．mRNA或DNA

【推荐1】细胞固定化技术是现代生物工程领域的重要研究项目之一，固定化酵母可应用于酿酒。回答下列问题：
（1）海藻酸钠可作为固定化酵母细胞的包埋剂，其特点是______。溶化后的海藻酸钠需要______后再加入已活化的酵母细胞。活化是指______。
（2）工业上酒精发酵使用的固定化酵母细胞需要避免杂菌污染，因此细胞的固定化是在______的条件下进行的。对使用的接种环一般采用的灭菌方法是______。
（3）某小组将固定化酵母、等量的游离酵母（已活化）分别置于250mL浓度为10%的蔗糖溶液中，在28℃的条件下进行发酵，定时检测发酵液糖度的变化。循环3次使用固定化酵母和游离酵母，得到下图所示实验结果。

根据上述结果分析，与游离酵母相比，固定化酵母应用于酿酒的优势是______和______。

【推荐2】回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答果酒与果醋制作有关的问题：
（1）用干酵母作为发酵菌酿制果酒时，需先将适量干酵母放在小烧杯中，加入少量温水（<40℃）和一小撮蔗糖制成________，待其出现________，表明干酵母已活化。
（2）酵母菌在生长繁殖和进行发酵时，会产生少量尿素，尿素会与酒精反应生成有害物质，可用脲酶处理予以分解，但在实际生产过程中不宜直接将脲酶加入酒体中，原因有________（答出1点），可将脲酶和海藻酸钠混合，用注射器滴入凝结液中形成珠粒，这种固定化酶的方法称为________。
（3）用果酒酿制果醋时，发酵瓶中先装八分满的经________处理的锯末，然后加入含有醋杆菌的________使醋杆菌附着在锯末上，成为固定化醋杆菌。采用固定化醋杆菌而不是固定化酶进行醋酸发酵的主要原因是________。
（4）为进一步测定果醋中还原糖的含量，可以在发酵产物中加入还原糖显色剂，用光电比色法测定显色产物的光密度值，并将测定值与________比对，计算其含量。
（二）回答与转基因植物的培育和植物克隆有关的问题：
木瓜环斑病毒（PRV）是一种对木瓜危害极大的病毒，科学家通过基因工程技术将抗环斑病毒基因（PRSV）导入木瓜中表达出抗环斑病蛋白，从而获得抗环斑病的木瓜。
（1）构建重组DNA分子时，使用两种限制性核酸内切酶处理，优点是可防止目的基因和切割后的载体DNA自身环化及________。为使PRSV高效表达，需要对重组载体上目的基因相关的________序列进行修饰。
（2）获取活性强的农杆菌菌液，通过冰浴、离心、去上清液等相应处理，加入适量预冷的含15%甘油的________溶液，制成感受态农杆菌细胞。转化后的农杆菌要正常培养一段时间，才能置于含特定抗生素的培养基上筛选，正常培养一段时间的目的是________。优先选用木瓜________（受伤的/完好的）叶片与含重组质粒的农杆菌共培养完成转化，促使其不断分裂形成愈伤组织。
（3）试管苗需锻炼后才可移栽至大田，移栽时需先洗去________以免栽后发霉。
（4）为了快速获得稳定遗传的抗环斑病木瓜，可选择________培养获得的细胞系作为受体细胞。

【推荐3】蒲江丑柑味道清甜，果肉清脆化渣，产量高，除了将其直接投放市场外，还对其进行了一系列产品的配套开发，如果汁、果酒、果醋等。回答下列相关问题：
(1)利用丑柑果肉可以生产果汁，为提高出汁率和澄清度，可向果汁中加入果胶酶。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括____________________；生产果汁剩下的橘皮通常采用压榨法提取精油而不是用水蒸气蒸馏法，原因是____________________。
(2)在利用果汁制作果酒的过程中，为了提高酵母菌的发酵效率，工作人员对酵母菌进行了固定化，过程如下：

上述流程中，①为配制____________________溶液，该溶液的作用是_____________。
(3)上述固定化酵母细胞的方法称为____________法，选择此方法的原因是____________________。
(4)在利用果酒制作果醋的过程中，工作人员又向发酵装置中添加一定量的果汁（不影响菌种的活性）后，检测发现乙醇的利用速率迅速下降，原因是____________________。

【推荐1】生物技术与社会现象、生产实际联系密切，请回答下列关于生物技术实践的问题。
（1）在果酒果醋的自然发酵过程中，酵母菌的来源是_________，发酵装置内加入果汁后要留出约1/3的空间，目的是________。酒精发酵后转入醋酸发酵前，除改变温度外，还需调整的发酵条件是______。
（2）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种：

图一中的②、③过程需重复几次，目的是进一步_______。某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图二所示，推测该同学接种时可能的操作失误是____________。
（3）制备固定化酵母细胞时要将干酵母活化，并将溶化好的_____溶液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中，以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的________溶液中，观察凝胶珠的形成。
（4）DNA粗提取与鉴定实验中，对最后得到絮状物进行鉴定时，先取两支试管，分别加入等量的2mol/L的NaCl溶液溶解絮状物，再向试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀，后续进一步的操作是_____，比较两支试管中溶液的颜色。

【推荐3】山西陈醋酿造的流程图如下。回答下列问题：

(1)酿醋时会在高粱中混一些豌豆，高粱和豌豆可为微生物培养提供营养物质，高粱中的淀粉可为微生物生长提供________源，豌豆中的________等为微生物生长提供氮源。
(2)图示两种发酵按先后顺序在发酵缸中添加的微生物分别是________、________，二者在结构上的最主要区别是________。
(3)醋酸是好氧细菌，当________都充足时，能将糖分分解为醋酸；当缺少糖源时，则将________转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸。图中醋酸发酵时需控制温度为________℃，酿醋师傅们需要不断的搅拌原料，原因是________。
(4)淋醋过程还需加入茴香、花椒、大料等香辛料，作用为________。