【推荐1】聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

成分	MgSO4	蛋白质	PVA溶液	水	X物质
用量	5g	10g	1000mL	7g	20g

(1)上表是筛选能高效分解PVA的细菌的培养基配方，X物质最可能为__________。
(2)若将100ml含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释10⁴倍后，取1ml稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为180个，空白对照组平板上未出现菌落，则100ml原菌液中有PVA分解菌__________个。该方法的测量值与实际值相比一般会偏小，其原因是__________。
(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入__________。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路：____________________。

【推荐2】微生物的抗性突变是自发产生的？还是与相应的环境因素有关？有人设计下列实验，以研究探讨该问题。实验选用对链霉素敏感的大肠杆菌K12。培养基3、7、11中含有链霉素，其它培养基中不含链霉素。请据实验回答：
   
（1）将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养，接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养。“印章”位置保持不变。培养皿2、3根据其功能，分别称为______培养基、______培养基。“印章”使用前需作_________处理。
（2）培养基2中的菌落是_________，培养基3中的菌落是______________。
（3）培养基3的A点处有菌落生长，将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中。如图反复几次实验。请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”：_____，原因是_________________________________________。
（4）培养液4、8中的菌液越来越少，但培养皿7、11中的菌落越来越多。你的解释是：___________________。
（5）要分离出单个菌落，除了本实验中的涂布法外，还可以用___________法。
（6）上述不含链霉素培养基通常使用的是_______________，下表是另一种培养基配方，该培养基具有
_________作用。

成分	KH2PO4	Na2 PO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂
含量	1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g

（7）现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如右表所示。根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是___________________。

【推荐1】漆酶是真菌、细菌中的氧化酶，可用于有毒化合物的生物消除。为提高产漆酶菌株（C₁）的产酶量，对其培养条件进行优化研究。
Ⅰ.培养基成分的优化研究：为确定最佳的营养成分组合，科研人员配制了9组以A、B为主要营养成分的培养基，并添加0.04%的愈创木酚（被氧化后形成红褐色）。接种C₁培养后，结果如下表所示。

实验组	营养成分		培养结果（mm）
	A（20g/L）	B(2.84g/L)	显色圈直径
1	葡萄糖	蛋白胨	37
2	葡萄糖	(NH4)2SO4	49
3	葡萄糖	KNO3	23
4	蔗糖	蛋白胨	25
5	蔗糖	(NH4)2SO4	52
6	？	？	32
7	麦芽糖	蛋白胨	58
8	麦芽糖	(NH4)2SO4	56
9	麦芽糖	KNO3	55

（1）实验组6中的成分A、B分别是________。
（2）据培养结果分析，营养成分的最佳组合是实验组_______，阐述理由_________。
Ⅱ.培养基pH值的优化研究：选取最佳营养成分组合，配制成pH值为3.0、5.0、7.0的三种液体培养基，接种等量C₁菌体并培养一段时间，定期取样测定培养基中漆酶量（以酶活力表示），结果如下图所示。

（1）调节培养基的pH值应在_____________（填编号）进行。
①灭菌前②灭菌后倒平板前③倒平板后接种前④接种后
（2）据上图分析，为获得最多的漆酶，C₁的最佳培养方案是_________。
Ⅲ.经一系列培养环境的优化，C₁产漆酶量有所提高。在此基础上，要获得产酶更高的菌株，可采取的育种方法是__________。
（1）下图表示培养和分离某种细菌的部分操作步骤，下列叙述正确的是(      )。

A．步骤①倒平板操作时，倒好后应将其倒过来放置
B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线
C．步骤③三个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落
D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数
（2）借助光学显微镜来观察微生物细胞的结构，发现了一种新的单细胞生物，并欲对其进行分类，下列选项不能作为分类依据的是(         )。
A．核膜的有无B．核糖体的有无       C．细胞壁的有无D．膜上磷脂的有无

【推荐2】尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答:

(1)如图是利用____________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步_______到培养基的表面。除此方法外，常用的微生物接种方法还有________________（写一种）。
(2)如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上进行划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行____，灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是_________。
(3)下面是两种培养基配方
表1：A培养基配方

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂	H2O
1.4 g	2.1 g	0.2 g	10.0 g	1.0 g	15.0 g	1 000 mL

表2：B培养基配方

纤维素粉	Na2NO3	Na2HPO4·7H2O	KH2PO4	MgSO4·7H2O	KCl	酵母浸膏	H2O
5 g	1 g	1.2 g	0.9 g	0.5 g	0.5 g	0.5 g	1 000 mL

①配制培养基的操作步骤：_______________（用字母顺序回答）。
a．倒平板   　b．计算　   c．溶化   　d．称量　   e．灭菌
②在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是_____。
③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述__（A、B）配方的培养基，在该培养基中加入__指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
④据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是___________________
(4)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，取0.2ml稀释液涂布，得到以下统计结果：
甲同学涂布了1个平板，统计的菌落数是260；
乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和246，取平均值232；
丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；
在三位同学的统计中，________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果，每毫升原液中的菌体数是___________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量________。

【推荐1】35~40%的甲醛水溶液（福尔马林）能使蛋白质变性，可作为防腐剂。自然界中有能分解甲醛的细菌和真菌。下图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程。请回答下列问题：

(1)上述图1实验中，培养基灭菌的常用方法为_____。为达到筛选目的，③锥形瓶中的液体培养基和平板内的固体培养基应以_____作为唯一碳源。
(2)在图示③→④的操作中下列选项肯定不需要的是_____（填序号）。

A．高压蒸汽灭菌锅

B．酒精灯

C．接种环

D．无菌水

(3)某同学尝试过程③→④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示。该同学的接种方法是_____。推测该同学接种时可能的操作失误是_____。
(4)为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响，进行了相关实验并得到下图所示结果。由图可知，要使菌株完全降解甲醛，甲醛的初始浓度必须_____；当甲醛的初始浓度增高至1600mg/L时，48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱，甚至失去降解能力，其原因可能是_____。

【推荐2】牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况，也影响奶制品的运输和贮藏；牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。

（1）巴氏消毒的方法是____________。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图操作。用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中，如此重复3次，将10mL生牛奶稀释到10^-4浓度后，取0.1mL滴在培养基上。
（2）将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布，应选择的涂布工具是_________。该涂布工具最合适的灭菌方法是____________。
A．火焰灼烧        B．高温高压灭菌     C．酒精擦拭              D．紫外线照射
（3）图示方法为稀释培养法，按此方法培养得到的3个培养皿中菌落数分别为250个、230个、240个，则生牛奶中每毫升含细菌数为________个。
（4）消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死，若用稀释培养法检测消毒后牛奶是否含有细菌，则在操作步骤上应作什么改动？__________________。
（5）检测食品中大肠杆菌数量，可评价食品是否受到污染。下表培养基配方中，大肠杆菌能够生长的是______，理由是__________________。

（6）从生牛奶取样培养得到的菌落中，混有各种杂菌，从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加入____________，具有_____________特征可以鉴别大肠杆菌。

【推荐3】啤酒是以大麦芽、啤酒花、水为主要原料，经酵母发酵作用酿制而成的饱含二氧化碳的低酒精度酒。啤酒中的低分子糖和氨基酸很容易被吸收利用，在体内产生大量的热量，被称为“液体面包”。图1是啤酒生产工艺流程简图。

(1)图中焙烤的目的是降低麦芽水分，并____，然后去根制成成品麦芽。将粉碎的麦芽等原料用温水分别在糊化罐、糖化罐中混合，调节温度以制造麦汁，加水糊化之前粉碎成品麦芽的目的是____。
(2)发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节。麦汁冷却后再加入啤酒酵母使其发酵，冷却的目的是____。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程；并及时添加必需的营养物质组分，其目的是____；还要严格控制____等发酵条件（至少写出 3个），以获得所需的发酵产物。
(3)现代发酵工程使用的大型发酵罐均具有计算机控制系统，能使发酵全过程处于最佳状态，图2为发酵罐示意简图。发酵过程有机物分解释放的能量会引起发酵罐温度升高，常用冷却水对发酵罐进行温度的调节，冷却水进入口和排出口分别是____（填图2中的标号，下同）。酵母菌酒精发酵过程中要“先通气后密封”，通过空气入口____来控制溶解氧。发酵还需要用排气管调节罐压，原因是____。
(4)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为____，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用____的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有____等。（答出两种方法即可）
(5)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是____。（答出两点即可）
(6)研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中____可能是高密度培养的限制因素。发酵工程的中心环节是____。
(7)菌株H还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等）来生产PHA，说明其能分泌____。

【推荐1】根据微生物分离和培养的知识，回答下列问题:
(1)利用尿素为唯一氮源能筛选目的菌的原因是________________________________。
(2)在纯化微生物的过程中，进行平板划线时，划线结束后仍然要灼烧接种环，目的是________________________。若用稀释涂布平板法进行接种，在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液的量一般不超过0.1 mL，其原因是_______________。
(3)计数时最好取培养适宜时间，形态数目稳定的菌落数作为实验结果，一方面是由于培养时间较短，会________________，另一方面是由于培养时间过长，______________________。
(4)从尿素分解菌的液体培养基中获得脲酶粗提取液，将粗提取液装入透析袋中，置于pH适宜的磷酸缓冲液中进行透析处理，这样就可以除去其中相对分子质量_______(填“较大”或“较小”)的杂质。采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化脲酶时，加入SDS的作用是_____________________。

【推荐2】自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。以下是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。
(1)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用__________________的培养基进行分离，这种培养基属于________培养基(按功能分类)。
(2)若取土样6 g，应加入________mL的无菌水配制成稀释10倍的土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成10¹～10⁷不同稀释倍数的土壤溶液。将10³～10⁷倍稀释的稀释液分别吸取0.2 mL加入固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为_______________。将接种的培养皿放置在37 ℃恒温培养箱中培养24～48 h，观察并统计菌落数，结果如表，其中________倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为___________个。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目________(填“低”或“高”)。

稀释倍数		103	104	105	106	107
菌落数/个	1号平板	478	367	277	26	5
	2号平板	496	354	261	20	8
	3号平板	509	332	254	29	3

(3)若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是____________________________________________________。
将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格(体积为0.1 mm³)有25个中方格的计数板为例进行计算，设5个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为10² ，那么原菌液的菌群密度为____________个/mL。

【推荐3】回答有关微生物培养有关的问题：
（1）厨房中的厨余垃圾多为湿垃圾，湿垃圾处理的有效方法之一是用微生物对其进行降解。如图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。

A.配制培养基后需进行灭菌处理，常用的灭菌方法是_________。培养基中加入碳源是_______。
B.据图，菌落①与菌落②周围产生了透明圈，产生透明圈的原因是______________。
（2）某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方为：蛋白胨10克、葡萄糖5克、蔗糖5克、KH₂PO₄2克、显色剂（伊红美蓝）0.2g、琼脂12克，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到l000mL。根据用途划分，该培养基属于____培养基，若要分离能分解尿素的细菌，需对培养基作出的两项调整是__________。
（3）对同一浓度的脲酶生产菌稀释液，分别用血细胞计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量____（填“多于“、“等于”或“小于”）后者，其原因是__________。