金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色,从而形成透明圈。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题。
(1)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括碳源、氮源、_______ ,用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是_______ 。
(2)操作中在血平板上的接种方法是_______ ,接种操作前后需要对接种工具进行______ 灭菌。
(3)在制备血平板时需将pH调节至______ (“微酸性”或“微碱性”)后灭菌,待培养基冷却后,再加入适量血液。按培养基功能分类,血平板属于_____ 培养基。
(4)在无菌室内,经多次规范操作、重复实验,血平板上的菌落周围均出现透明圈,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是_____ 。
(1)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括碳源、氮源、
(2)操作中在血平板上的接种方法是
(3)在制备血平板时需将pH调节至
(4)在无菌室内,经多次规范操作、重复实验,血平板上的菌落周围均出现透明圈,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是
更新时间:2023-06-04 13:07:09
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【推荐1】孔雀石绿(简称MG)是广泛使用的有机染料,在自然环境中极难降解,容易引起土壤污染,进而危害人体健康。因此从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶 解度低,含过量MG的固体培养基不透明。
(1)培养基的配制:MG降解菌富集培养基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等,再加__________________ 作为唯一碳源。培养基配制好后,需进行灭菌处理。灭菌是指______________ 。
(2)MG高效降解菌株的富集:如图所示,将1.0g土样接入含上述配制好的培养液的三角瓶中,将三角瓶置于30℃、180r/min摇床中振荡培养1-2天,此操作的目的是__________________________ ,直至培养液变浑浊后,换瓶重复操作2-3次,以达到富集的目的。
(3)MG高效降解菌株的分离和纯化:图中所示的分离纯化细菌的方法是________________ 。实验中初步估测A中细菌细胞数为1.5×109个/mL,若要在图中每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液, 且每个平板上长出的菌落数约为150个,则应将A中的菌液稀释__________ 倍。
(4)MG高效降解菌株的鉴定:将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基(其他营养成分等适宜)上,根据培养基是否出现__________________ ,就可以鉴别出目的菌株,原因是_____________ 。
(1)培养基的配制:MG降解菌富集培养基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等,再加
(2)MG高效降解菌株的富集:如图所示,将1.0g土样接入含上述配制好的培养液的三角瓶中,将三角瓶置于30℃、180r/min摇床中振荡培养1-2天,此操作的目的是
(3)MG高效降解菌株的分离和纯化:图中所示的分离纯化细菌的方法是
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【推荐2】反刍动物,如牛和羊,具有特殊的器官—瘤胃,在瘤胃中生活着多种能分解纤维素的微生物。某科研小组欲从牛瘤胃中分离出纤维素分解菌,实验流程如下:
①从屠宰场获取新鲜瘤胃液,短暂离心后过滤;
②将滤液接种到含羧甲基纤维素钠(一种凝固剂)和染色剂A的培养基上进行培养;
③将从步骤②获取的目标菌落接种到以滤纸条为唯一碳源的液体培养基中,摇床悬浮培养5天,观察滤纸的分解效果;
④取分解效果最好的几片滤纸,将上面的菌种接种到固体培养基上,观察菌落生长情况。回答:
(1)染色剂A为______ ,步骤②接种前需要用______ 法对培养基进行灭菌,步骤②培养的目的是______ 。
(2)步骤③中,应选择步骤②中______ 的菌落进行接种,原因是______ 。
(3)根据步骤④的实验结果,课题组得出牛瘤胃中有多种纤维素分解菌的结论,支持他们结论的实验结果应该是______________________ 。
(4)研究发现,玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供______ 。
(5)称取1.0g某样品转入99mL无菌水中,再经100倍稀释后获得低密度菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在多个固体培养基上,若经培养后平均长出了46个纤维素分解菌菌落,则每克样品中约含纤维素分解菌______ 个。
①从屠宰场获取新鲜瘤胃液,短暂离心后过滤;
②将滤液接种到含羧甲基纤维素钠(一种凝固剂)和染色剂A的培养基上进行培养;
③将从步骤②获取的目标菌落接种到以滤纸条为唯一碳源的液体培养基中,摇床悬浮培养5天,观察滤纸的分解效果;
④取分解效果最好的几片滤纸,将上面的菌种接种到固体培养基上,观察菌落生长情况。回答:
(1)染色剂A为
(2)步骤③中,应选择步骤②中
(3)根据步骤④的实验结果,课题组得出牛瘤胃中有多种纤维素分解菌的结论,支持他们结论的实验结果应该是
(4)研究发现,玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供
(5)称取1.0g某样品转入99mL无菌水中,再经100倍稀释后获得低密度菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在多个固体培养基上,若经培养后平均长出了46个纤维素分解菌菌落,则每克样品中约含纤维素分解菌
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【推荐3】某生态研究小组为了从纤维素分解菌中获取纤维素酶,以便将农作物秸秆作为酿酒工业的原料,设计了如下操作流程分离提取较纯的纤维素分解菌。请分析回答问题:
①土壤取样→②选择培养→③梯度稀释→④将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上→⑤挑选菌落
(1)纤维素分解菌选择培养的培养基中添加的碳源为________________ ;除了碳源外,培养基中还应该含有的营养成分有________________________________ 。
(2)图甲所示接种方法主要用于____________________________ ,该方法不能用于测定菌体的数目,其原因主要是许多菌落并不是由______________________________ 形成的。
(3)图乙中的培养对应于流程图中步骤__________ (填写序号)。
(4)若选择培养后预估锥形瓶中细菌细胞数为2×107个/mL,若要在鉴别平板上涂布0.1ml稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,则至少应将锥形瓶中的菌液稀释_________ 倍。在鉴别培养基中含有KH2 PO4和Na2 HPO4,其作用是①_________________________ ;②_______________________________ 。
(5)图乙中出现的无透明带的菌落,其代谢类型最可能是______________ 。
(6)流程图中步骤⑤的操作中,应挑选产生了__________________ 的菌落。
①土壤取样→②选择培养→③梯度稀释→④将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上→⑤挑选菌落
(1)纤维素分解菌选择培养的培养基中添加的碳源为
(2)图甲所示接种方法主要用于
(3)图乙中的培养对应于流程图中步骤
(4)若选择培养后预估锥形瓶中细菌细胞数为2×107个/mL,若要在鉴别平板上涂布0.1ml稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,则至少应将锥形瓶中的菌液稀释
(5)图乙中出现的无透明带的菌落,其代谢类型最可能是
(6)流程图中步骤⑤的操作中,应挑选产生了
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【推荐1】为了检测牛奶中是否含有某种微生物,配制的培养基的配方如下,请分析回答下列问题(注:伊红美蓝是由两种染色剂组成的细胞染料):
(1)根据配方,该培养基可用来培养____________ (填细菌、霉菌或细菌与霉菌),其所含氮源的功能是______________________________________ 。
(2)该微生物在同化作用上的代谢类型是______________ 型,其在培养基上产生的单个菌落在生态学中被称为___________ 。
(3)接种好的培养皿在恒温箱中培养时要倒置,目的是______________________________________ 。
(4)有同学为统计消毒后的牛奶中该微生物的含量,取5ml牛奶样液进行了下图操作,每个平板中的统计结果为87、83、85,则经过消毒后的牛奶中该微生物的含量大约是________ 个·mL-1。用该方法统计样本菌落数时__________ (填是或否)需要设置空白对照组,目的是:__________________________________ 。
蛋白胨 | 乳糖 | 蔗糖 | K2HPO4 | 伊红 | 美蓝 | 蒸馏水 |
10 g | 5 g | 5 g | 2 g | 0.4 g | 0.065 g | 1 000 mL |
将培养基pH调至7.2 |
(1)根据配方,该培养基可用来培养
(2)该微生物在同化作用上的代谢类型是
(3)接种好的培养皿在恒温箱中培养时要倒置,目的是
(4)有同学为统计消毒后的牛奶中该微生物的含量,取5ml牛奶样液进行了下图操作,每个平板中的统计结果为87、83、85,则经过消毒后的牛奶中该微生物的含量大约是
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【推荐2】 赤霉素广泛分布于植物生长旺盛的部位,光敏色素(接收光信号的蛋白质)分布在植物的各个器官中。为研究赤霉素和光敏色素在水稻幼苗发育中的作用,科研人员将野生型、光敏色素A的突变体、光敏色素B的突变体的水稻种子播种在含不同浓度赤霉素合成抑制剂(PAC)的固体培养基上,在光照条件下培养8天后,测量幼苗地上部分高度和主根长度,得到如下图所示结果。请分析回答:
(1)研究人员将种子播种在固体培养基上,而不是播种在培养液中,其原因是播种于固体培养基表面能为种子萌发提供_________ ,同时也有利于幼苗扎根。
(2)根据图一,光照条件下,PAC处理对水稻地上部分的生长具有________ 作用,而光敏色素_________ 突变体传递的光信号减弱了PAC的该效果。
(3)根据图二,PAC浓度为10-7mol∙L-1和10-5mol∙L-1时对野生型水稻幼苗主根生长分别起______ 、___ 作用,PAC处理对水稻主根生长影响的特点是_____ 。
(4)赤霉素在绿叶菜、根菜、果菜类等蔬菜生产中应用广泛,使用赤霉素应该注意_________ 。
(1)研究人员将种子播种在固体培养基上,而不是播种在培养液中,其原因是播种于固体培养基表面能为种子萌发提供
(2)根据图一,光照条件下,PAC处理对水稻地上部分的生长具有
(3)根据图二,PAC浓度为10-7mol∙L-1和10-5mol∙L-1时对野生型水稻幼苗主根生长分别起
(4)赤霉素在绿叶菜、根菜、果菜类等蔬菜生产中应用广泛,使用赤霉素应该注意
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【推荐3】国家标准规定每毫升鲜奶产品中大肠杆菌数不得超过个,鲜奶中大肠杆菌的数目可用滤膜法来测定,流程为:用滤膜过滤1ml待测牛奶→牛奶中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基(EMB培养基)上培养→统计菌落数目。
(1)制备培养基:培养基中能够同时提供氮源和碳源的是_____________ (填“蛋白胨”“乳糖”或“”),从培养基功能上划分,EMB培养基属于_____________ 。
(2)为检测该培养基灭菌是否彻底,对于该培养基应采用的检测方法是_____________ 。
(3)培养与统计:在适宜的条件下培养一段时间后,应选择颜色为_____________ 的菌落数进行统计,结果如下:
(4)培养12h和24h的大肠杆菌菌落特征有何差异?_____________ 。
(5)根据表中的数据不能判断该鲜奶样品中的大肠杆菌数是否超标,请说明理由:_____________ 。
(1)制备培养基:培养基中能够同时提供氮源和碳源的是
(2)为检测该培养基灭菌是否彻底,对于该培养基应采用的检测方法是
(3)培养与统计:在适宜的条件下培养一段时间后,应选择颜色为
培养时间 | 12h | 24h | ||||||
平板 | 对照组 | 1 | 2 | 3 | 对照组 | 1 | 2 | 3 |
大肠杆菌菌落数(个) | 0 | 132 | 121 | 145 | 0 | 132 | 121 | 145 |
其他细菌菌落数(个) | 112 | 253 | 222 | 244 | 112 | 253 | 222 | 244 |
(4)培养12h和24h的大肠杆菌菌落特征有何差异?
(5)根据表中的数据不能判断该鲜奶样品中的大肠杆菌数是否超标,请说明理由:
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【推荐1】炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病,炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。
(一)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。
(二)细菌鉴定:实验流程如下图所示
(1)对配制的液体培养基需采取______________ 方法灭菌;实验所用液体培养基的碳源为____________ (填“无机碳”或“有机碳”)。在提供主要营养物质的基础上,培养基还需要满足炭疽杆菌生长对_____ 、____ 以及特殊营养物质的要求。
(2)挑选可疑菌落制片后,用___________ 观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。
(3)接种可疑菌后,35℃培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是_______________ ,对照组试管中应加入_______________ ,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的_______ 比对照组低,则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。
(4)对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有___________ 、_________ 。
(一)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。
(二)细菌鉴定:实验流程如下图所示
(1)对配制的液体培养基需采取
(2)挑选可疑菌落制片后,用
(3)接种可疑菌后,35℃培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是
(4)对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有
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【推荐2】产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株,科研人员开展了相关研究。请回答下列问题:
(1)常规微生物实验中,下列物品及其灭菌方法错误 的是__________ (填编号)。
(2)称取1.0g某土壤样品,转入99mL_________ 中,制备成菌悬液,经_____________ 后,获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上,其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落,则该样本中每克土壤约含酵母菌_______________ 个。
(3)为了进一步提高酵母菌产酶能力,对分离所得的菌株,采用射线辐照进行_______ 育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以________ 唯一碳源的固体培养基上,培养一段时间后,按照菌落直径大小进行初筛,选择直径_______ 的菌落,纯化后获得A、B两突变菌株。
(4)在处理含油废水的同时,可获得单细胞蛋白,实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能,进行了培养研究,结果如图。据图分析,应选择菌株__________ 进行后续相关研究,理由是____________________ 。
(1)常规微生物实验中,下列物品及其灭菌方法
编号 | ① | ② | ③ | ④ |
物品 | 培养基 | 接种环 | 培养皿 | 涂布器 |
灭菌方法 | 高压蒸汽 | 火焰灼烧 | 干热 | 臭氧 |
(2)称取1.0g某土壤样品,转入99mL
(3)为了进一步提高酵母菌产酶能力,对分离所得的菌株,采用射线辐照进行
(4)在处理含油废水的同时,可获得单细胞蛋白,实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能,进行了培养研究,结果如图。据图分析,应选择菌株
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【推荐3】生活垃圾中含有大量纤维素,随着人们生活水平的提高,纤维素在垃圾中的比例也不断增大,其积累过多会使环境负担加剧,可利用纤维素酶或纤维素分解菌将其分解。回答下列问题:
(1)研究和应用微生物的前提是____________ 。培养微生物时,所选择的培养基需要满足两个基本条件:一方面要为人们需要的微生物提供____________ ;另一方面要确保____________ ,并将需要的微生物分离出来。
(2)制备培养基时除了加入特定的营养物质以外,还要加入一定量氯化钠,以____________ 。纯化的菌株临时保藏需要先接种到____________ 上,在合适的温度下培养,长成菌落后放入4℃冰箱中保藏。
(3)若要使用酶解法使纤维素水解为葡萄糖,至少需要____________ 三种酶共同参与。有同学设想可用固定化酶技术来分解垃圾中的纤维素,利用该技术可以使酶的____________ ,降低成本。
(4)在进行微生物筛选过程中,对培养基的灭菌常用____________ 法,影响该方法效果的因素有__________ (至少答出2条)等因素。
(1)研究和应用微生物的前提是
(2)制备培养基时除了加入特定的营养物质以外,还要加入一定量氯化钠,以
(3)若要使用酶解法使纤维素水解为葡萄糖,至少需要
(4)在进行微生物筛选过程中,对培养基的灭菌常用
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【推荐1】奶牛乳腺炎是奶牛养殖业中最常见且对奶牛危害最严重的一种复杂乳腺综合疾病,会导致奶牛出现妊娠率降低、流产率升高等,影响奶牛的繁殖性能。现欲对导致奶牛乳腺炎的病原体进行分离鉴定。回答下列问题:
(1)乳样采集:采样前对奶牛乳区进行________ ,随后采集多乳区混合生鲜乳样品于无菌离心管中,置冰盒暂存,用于细菌分离培养。
(2)细菌分离培养及鉴定:将乳样摇匀后进行_______ ,取一定体积不同浓度乳样接种于平板上,使用涂布器涂抹均匀涂布器的灭菌操作是________ 。接种后的平板于恒温培养箱中培养一定时间,肉眼观察菌落的_____ ,挑取典型的菌落进行划线纯化,并对典型单个菌落进行染色,在油镜下进行镜检,初步判定细菌类属。
(3)病原菌药敏实验:鉴定发现,导致奶牛乳腺炎的主要病原微生物为乳房链球菌。抑菌物质抑制受试菌生长的最低浓度,即最小抑菌浓度(MIC)。现要进行乳房链球菌药敏实验,将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种________ 的琼脂平板上。纸片中所含药物溶解后不断向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度,平板上会出现抑菌圈。抑菌圈的大小反映________ ,其形成原因是________ ,并与该药对受试菌的(MIC)呈_________ (填“正相关”或“负相关”)。
(1)乳样采集:采样前对奶牛乳区进行
(2)细菌分离培养及鉴定:将乳样摇匀后进行
(3)病原菌药敏实验:鉴定发现,导致奶牛乳腺炎的主要病原微生物为乳房链球菌。抑菌物质抑制受试菌生长的最低浓度,即最小抑菌浓度(MIC)。现要进行乳房链球菌药敏实验,将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种
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【推荐2】对硝基苯酚(PNP)是-种硝基苯酚类化合物,呈黄色,对植物、动物、微生物均有毒性。某科研小组开展“从污水处理厂的活性污泥中分离降解对硝基苯酚的微生物”的活动。据此回答下列问题:
(1)制备活性污泥浸出液时,为避免菌体浓度过高需用_____ 对浸出液进行处理。
(2)活性污泥浸出液采用__________ 法接种到以_____ 作为唯一碳源的培养基中;从功能上划分,该培养基属于_______________ 培养基。
(3)对硝基苯酚分解菌的筛选标准是培养基中出现__________ 菌落。该小组在培养基中还发现了其他菌落,经测定为硝化细菌,试分析硝化细菌能在该培养基上生长的原因是__________ 。
(4)长期保存筛选出的对硝基苯酚分解菌可以采用_________ .法。
(1)制备活性污泥浸出液时,为避免菌体浓度过高需用
(2)活性污泥浸出液采用
(3)对硝基苯酚分解菌的筛选标准是培养基中出现
(4)长期保存筛选出的对硝基苯酚分解菌可以采用
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【推荐3】乐果是一种广泛使用的有机磷农药,对被乐果污染的土壤进行微生物修复一直是科学家研究的热点。现在从土壤中筛选能有效降解乐果的微生物,请回答下列问题:
(1)用于筛选的样品应来自_________ 的土壤。为避免杂菌污染,取样和稀释土样时应注意:_______________ 。
(2)微生物驯化是指在培养过程中,逐步加入某种物质,让其逐渐适应,得到对此种物质耐受或能降解此种物质的微生物的过程。该实验中,所用驯化培养基中含有蛋白胨10g、氯化钠1g、磷酸二氢钾1g、水1L、葡萄糖1g和不同浓度的乐果。上述驯化培养基按功能分属于_________ 培养基。培养基冷凝后要将平板倒置,既可防止__________ ,又可避免_________ 。驯化后含有微生物的菌液通过_________ 法进行接种,从分离得到的单菌落中挑取待筛选的菌株。研究人员通常根据菌落的_________ 特征来初步区分不同种的微生物。
(3)若要进一步鉴定不同种的待测菌株对乐果的降解能力,请写出简要的实验思路:____________ 。
(1)用于筛选的样品应来自
(2)微生物驯化是指在培养过程中,逐步加入某种物质,让其逐渐适应,得到对此种物质耐受或能降解此种物质的微生物的过程。该实验中,所用驯化培养基中含有蛋白胨10g、氯化钠1g、磷酸二氢钾1g、水1L、葡萄糖1g和不同浓度的乐果。上述驯化培养基按功能分属于
(3)若要进一步鉴定不同种的待测菌株对乐果的降解能力,请写出简要的实验思路:
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