干扰素是动物和人体细胞受到病毒感染后产生的一种糖蛋白,具有抗病毒、抑制细胞增殖及抗肿瘤作用。利用基因工程技术培育能生产干扰素的植物细胞流程如图所示。请回答下列问题:
______________ 来切割质粒,其目的是_______________ 。质粒被切割后,可用___________________ 酶将其与目的基因连接。
(2)图中的重组质粒,除目的基因、标记基因外,还必须有__________ 。
(3)诱导产生胡萝卜愈伤组织的过程称为___________________ 。③过程所使用的固体培养基,除了无机盐有机营养物质琼脂、植物激素外,还需添加卡那霉素。卡那霉素的作用是________________________ 。在分子水平上通常采用____________ 技术检测干扰素基因是否导入受体细胞。培养产生干扰素的胡萝卜细胞的技术是_____________ 。
(4)干扰素在体外保存相当困难,但如果将其分子中个别氨基酸进行替换,可延长其在体外的保存期。改造思路是从预期_____________ 出发,其直接操作对象是______________ ,此项技术属于______________ (选填“基因”“蛋白质”)工程。
限制酶 | 识别序列和切割位点 |
EcoR | GATTC |
BacHI | GATCC |
Sma I | COcCGG |
Apa I | GGGCCC |
(2)图中的重组质粒,除目的基因、标记基因外,还必须有
(3)诱导产生胡萝卜愈伤组织的过程称为
(4)干扰素在体外保存相当困难,但如果将其分子中个别氨基酸进行替换,可延长其在体外的保存期。改造思路是从预期
更新时间:2023-08-16 17:56:59
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【推荐1】(1)土壤中富含各种微生物,将其浸出液接种到特定培养基上,可得到酵母菌。这一过程叫做______ ,不同培养基的具体配方不同,但一般都含有______ 等营养物质。
(2)要统计土壤样品中某活菌的数目,宜采用______ 法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的______ 就能大约推测出样品中的活菌数。
(3)制作果酒时,将酵母菌加入到葡萄汁中,控制好发酵条件,1Od后得到散发着酒香的成品。请你指出此过程的原理是__________________ 。
(4)胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则,是一种高度______ 的薄壁细胞,胚状体与______ 发育形成的胚有类似的结构,即具有胚芽、胚轴和胚根。
(5)PCR中加入的引物有______ 种,其作用是__________________
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【推荐2】中国科学家屠呦呦从植物黄花蒿中发现并提取青蒿素挽救了数百万人的生命。研究表明,青蒿素易溶于丙酮、乙酸乙酯、氯仿、苯、乙醚及石油醚,几乎不溶于水。
(1)植物芳香油的提取方法有_________ 、________ 和萃取等,应采用________ 法从黄花蒿中提取青蒿素。
(2)可以用青蒿芽通过________ 技术获得大量的用于提取青蒿素的幼苗,该过程的原理是________ ,该过程所需的是MS培养基,在MS培养基中添加有机物时,用________ 作碳源,如果用葡萄糖作碳源会导致植物细胞________ 而影响生长,葡萄糖是否可以作为微生物培养基的碳源?________ (填“是”或“否”)
(1)植物芳香油的提取方法有
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【推荐3】番茄果实在成熟的过程中,多聚半乳糖醛酸酶(PG)合成显著增加, 以降解果胶使细胞壁破损,从而使果实变红变软,但不利于保鲜。科学家利用基因工程得到转基因番茄,大大延长果实保质期。操作流程如下,回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/4/22/2705089952595968/2705953451753472/STEM/0ddfc342c2204bfe8a285c3e3efc7074.png?resizew=543)
(1)利用 RT—PCR 技术即逆转录—多聚酶链式反应制备 PG 基因,最好从番茄的_______ 细胞中提取mRNA,此技术所需要的酶主要有_________ 。
(2)据图可知,转基因番茄主要通过抑制PG 基因的___________ 过程,使PG合成量减少,从而延长果实保质期。
(3)要检测感染农杆菌后的番茄细胞染色体 DNA 上是否插入了反向连接 PC 基因,_______ (填“能”或“不能”)用标记的 PG 基因的单链作为探针进行检测,理由是____________________ 。
(4) 在将转化的番茄细胞通过植物组织培养技术形成番茄幼苗过程中,培养基________ (填“要”或“不要”)添加有机营养物质,原因是____________________ 。
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【推荐1】我国科学家通过基因工程生产出了乙型肝炎病毒疫苗为预防乙肝提供了有力的保障。通过基因工程生产乙肝疫苗的过程如下图所示。请回答下列问题:
乙肝病毒
有关基因
细菌
大量生产疫苗
(1)若要获得大量的目的基因,可采用PCR技术进行体外扩增,该技术中使用的引物有_________ 种,所需的酶是___________ 。
(2)进行②过程之前需构建基因表达载体,其中常用的载体是___________ 。为提高②过程的转化效率常采用的方法是______________________ 。
(3)若将上述受体菌换成酵母菌,生产乙肝疫苗的效果会更好,从细胞结构的角度分析,原因是______________________ 。
(4)乙肝病毒可以用于基因工程中可推知乙肝病毒属于___________ (填“DNA”或“RNA”)病毒。乙肝病毒专一侵染肝细胞的原因是______________________ 。
乙肝病毒
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解题方法
【推荐2】人工合成“粮食”又添新技术!我国科学家成功通过电催化结合发酵的方式,用CO2合成了葡萄糖和脂肪酸,其基本流程如图所示。
(1)酿酒酵母是非常重要的真核模式生物。我国科学家已成功将其16条染色体融合成1条染色体,并将这条染色体移植到经____ 处理的酿酒酵母细胞中,得到了仅含1条线型染色体的有活性的酿酒酵母菌株SY14。SY14酵母的染色体DNA上有____ (填“1”、“16”或“多于16”)个RNA聚合酶的结合位点。
(2)酿酒酵母可以利用乙酸来合成葡萄糖,但其本身也会代谢掉一部分葡萄糖,导致产量降低。科学家通过敲除酿酒酵母中代谢葡萄糖的三个关键酶元件基因,废除了酵母的葡萄糖代谢能力,从而提高了产量。基因敲除的方法有多种,其中有些需要构建基因表达载体,构建过程需要利用____ 酶处理来获得重组DNA分子。
(3)在酿酒酵母的发酵过程中,需要随时检测____ ,以了解发酵进程;同时还要及时添加必需的营养成分,严格控制____ 等发酵条件。
(4)发酵罐是发酵工程中常用的生物反应器,其主要作用是____。
(5)整体上用CO2合成葡萄糖尚处于基础研究阶段,距离产业推广仍有很长的路要走,但该研究仍然具有重大意义,试举出两例加以说明____ 。
(1)酿酒酵母是非常重要的真核模式生物。我国科学家已成功将其16条染色体融合成1条染色体,并将这条染色体移植到经
(2)酿酒酵母可以利用乙酸来合成葡萄糖,但其本身也会代谢掉一部分葡萄糖,导致产量降低。科学家通过敲除酿酒酵母中代谢葡萄糖的三个关键酶元件基因,废除了酵母的葡萄糖代谢能力,从而提高了产量。基因敲除的方法有多种,其中有些需要构建基因表达载体,构建过程需要利用
(3)在酿酒酵母的发酵过程中,需要随时检测
(4)发酵罐是发酵工程中常用的生物反应器,其主要作用是____。
A.隔绝外界空气 |
B.模拟微生物细胞代谢所需环境 |
C.杀灭微生物的芽孢 |
D.提供液体环境便于收集发酵液 |
(5)整体上用CO2合成葡萄糖尚处于基础研究阶段,距离产业推广仍有很长的路要走,但该研究仍然具有重大意义,试举出两例加以说明
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非选择题-实验题
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【推荐3】某作物的矮秆和高秆由一对等位基因A/a控制,感病和抗病由另一对等位基因B/b控制,两对等位基因独立遗传。将矮秆感病植株和高秆抗病植株杂交,F1均为矮秆感病,F1自交得F2。为选育既抗倒伏又抗病的优良品种,科研人员利用分子标记辅助选择技术开展研究,对部分样本进行检测并得到如下电泳图。
(1)基因突变可产生等位基因,使用同种限制酶切割基因A和a(或B和b)后进行电泳鉴定,结果如图1,所得条带并不相同,其原因是____ 。
(2)提取F2中样本1、2、3三个单株的DNA,同时扩增A/a和B/b两对等位基因的DNA片段,用限制酶酶切后进行电泳鉴定,结果如图2。F2中样本1、2、3的基因型分别是____ 、____ 和____ 。其中样本____ 最符合科研人员的育种要求。
(3)样本1单株自交的后代中,具有优良性状的植株占比为____ 。
(4)与传统育种相比,上述分子标记辅助选择技术能节省育种时间的原因是____ 。
(1)基因突变可产生等位基因,使用同种限制酶切割基因A和a(或B和b)后进行电泳鉴定,结果如图1,所得条带并不相同,其原因是
(2)提取F2中样本1、2、3三个单株的DNA,同时扩增A/a和B/b两对等位基因的DNA片段,用限制酶酶切后进行电泳鉴定,结果如图2。F2中样本1、2、3的基因型分别是
(3)样本1单株自交的后代中,具有优良性状的植株占比为
(4)与传统育种相比,上述分子标记辅助选择技术能节省育种时间的原因是
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非选择题-解答题
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【推荐1】已知SHH基因与角化囊肿的发生有关。如图为科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况, 图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因;LacZ基因在SHH基因插入后不表达。据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/1/28/2646033839644672/2659999034925056/STEM/c3047014-c1b3-431b-8d61-f340277423e1.png)
(1)图中①过程用的工具酶为______________ ;②过程中需用_______________ 处理大肠杆菌细胞,使之成为_______________ 细胞。
(2)图中的重组载体需要含有_______________ 才能保证SHH基因正常转录。Ampr在此过程中的作用是________________________________ 。
(3)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与_______________ 形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/1/28/2646033839644672/2659999034925056/STEM/c3047014-c1b3-431b-8d61-f340277423e1.png)
(1)图中①过程用的工具酶为
(2)图中的重组载体需要含有
(3)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与
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【推荐2】科学家利用乳腺生物反应器首次从小鼠的乳汁中获得了一种医用蛋白——组织型纤溶酶原激活物(tPA),其部分流程如图所示,其中BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ代表相应限制酶的切割位点且三种限制酶产生的黏性末端不同。回答下列问题:_____ 。图示过程需要选用的限制酶是_____ 。科学家将tPA基因与小鼠乳清酸蛋白(WAP)基因的启动子等调控元件重组在一起构建基因表达载体,其目的是_____ 。
(2)过程①常用的方法是_____ ,细胞②表示_____ 。重组载体中tPA基因的下游应该具有终止子,终止子的作用是_____ 。
(3)tPA是一种糖蛋白,可以静脉注射用于溶解血块,一般不用“工程菌”来生产tPA,推测其主要原因是_____ 。
(2)过程①常用的方法是
(3)tPA是一种糖蛋白,可以静脉注射用于溶解血块,一般不用“工程菌”来生产tPA,推测其主要原因是
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【推荐3】矮小症是临床儿科常见疾病之一,患儿的身高通常低于正常身高2个标准差以上,随着近些年来社会经济的不断发展,矮小症的临床就诊也越来越多。回答下列问题:
(1)激素是人体细胞与细胞之间进行联系的信息分子,请依据所学知识完成下表与激素有关的内容:
(2)正常人体内的甲状腺激素源源不断地产生,但含量并未持续增加,其原因主要包括两个方面:_______ 。
(3)人生长激素是一种蛋白类激素,具有促进骨骼、内脏和全身生长的作用,起初只能从人体中提取,远远不能满足临床用药需求。现可通过基因工程的方法生产人生长激素,生产途径如图所示。
①利用PCR技术扩增生长激素基因时,需要的2种引物是根据_______ 设计的,还需要模板、4种脱氧核苷酸和_______ 。构建重组质粒时,最好选用限制酶EcoRI、BamHI的原因是_______ 。
②途径1构建重组质粒时须把生长激素基因与_______ 的启动子等调控组件重组在一起。途径2要筛选出含重组质粒的大肠杆菌,需把转化后的大肠杆菌培养在含____ 的固体培养基中,待菌落长出后再“印”到含_____ 的固体培养基中,培养一段时间后,对比两种培养基上菌落的分布,挑出符合需要的菌落。与途径2相比,通过途径1获得生长激素的优势是_______ 。
(1)激素是人体细胞与细胞之间进行联系的信息分子,请依据所学知识完成下表与激素有关的内容:
激素 | 产生腺体或细胞 | 运输方式 | 共同作用 | 相应的缺乏症 |
生长激素 | a. | 通过体液运输 | c. | 侏儒症 |
甲状腺激素 | b. | d. |
(3)人生长激素是一种蛋白类激素,具有促进骨骼、内脏和全身生长的作用,起初只能从人体中提取,远远不能满足临床用药需求。现可通过基因工程的方法生产人生长激素,生产途径如图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/9/24/fbce4051-22ba-4442-ae59-5de812801573.png?resizew=590)
①利用PCR技术扩增生长激素基因时,需要的2种引物是根据
②途径1构建重组质粒时须把生长激素基因与
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【推荐1】干扰素是用于治疗病毒感染和癌症的免疫活性蛋白质,若人的干扰素基因在大肠杆菌内表达,产生的抗病毒性较低且保存困难,若将第17位的半胱氨酸改造为丝氨酸,则生产出的干扰素的抗病毒性是原来的100倍,且可在70℃条件下保存半年,下图是构建干扰素工程菌的过程示意图。回答下列问题。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/7/8/2501541127520256/2502039194894336/STEM/bec5610b37dd4e4f9006d9bf4da40e65.png?resizew=331)
(1)③过程将B导入大肠杆菌,需用____________ 对大肠杆菌进行处理,使其处于_________ 态。
(2)要检测B是否导入大肠杆菌,将③过程后的大肠杆菌先接种于含_________ 的培养基上,然后将在该培养基上生长的大肠杆菌接种在含_______ 的培养基上,在前者培养基上能生长而在后者培养基上不能生长的是导入B的工程菌。
(3)基因工程自20世纪70年代兴起之后,在短短40年间得到了飞速发展,目前成为生物科学核心技术,在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面展示出美好的前景,据相关资料回答下列有关问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/7/8/2501541127520256/2502039194894336/STEM/5a43f6cf2d5b40c78e0069c37a0ddb73.png?resizew=273)
上面是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因),甲、乙表示相关结构或细胞。PstI酶和SmaI酶切割基因后将产生不同的黏性末端。图中甲代表的是____________ ,可用____________ 和____________ 提取鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接,用此二酶切割质粒产生的DNA片段有____________ 种。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/7/8/2501541127520256/2502039194894336/STEM/bec5610b37dd4e4f9006d9bf4da40e65.png?resizew=331)
(1)③过程将B导入大肠杆菌,需用
(2)要检测B是否导入大肠杆菌,将③过程后的大肠杆菌先接种于含
(3)基因工程自20世纪70年代兴起之后,在短短40年间得到了飞速发展,目前成为生物科学核心技术,在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面展示出美好的前景,据相关资料回答下列有关问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/7/8/2501541127520256/2502039194894336/STEM/5a43f6cf2d5b40c78e0069c37a0ddb73.png?resizew=273)
上面是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因),甲、乙表示相关结构或细胞。PstI酶和SmaI酶切割基因后将产生不同的黏性末端。图中甲代表的是
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解题方法
【推荐2】抗凝血酶Ⅲ在人体中主要由肝脏合成,是存在于血浆中的一种重要的抗凝血因子。研究者将人的抗凝血酶Ⅲ基因导入奶山羊细胞,获得乳汁中含有大量人抗凝血酶Ⅲ的转基因克隆奶山羊。已知β-酪蛋白广泛存在于哺乳动物的乳汁中。回答下列问题:
(1)获取人抗凝血酶Ⅲ基因:从人的肝细胞中提取mRNA,再通过___ 获取cDNA,利用PCR扩增目的基因。根据人抗凝血酶Ⅲ基因上游及下游的碱基序列,设计2种特异性引物,在PCR过程中,两个引物是___ 的结合位点,也是子链延伸的起点,dNTP在此过程中的作用是___ 。
(2)基因表达载体的构建:重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β-酪蛋白基因启动子、人抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子等结构组成,其中___ 决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。
(3)成纤维细胞的转化:取幼龄雌性动物的组织,经酶处理后获得成纤维细胞悬液,放在动物细胞培养液中培养,从幼龄动物取材的原因是___ 。然后用___ 法将基因表达载体导入成纤维细胞。
(4)转基因奶山羊的获得:从奶山羊中获取卵母细胞,将阳性转基因成纤维细胞注入___ ,通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。常通过___ (填物理方法)激活重构胚,培养获得早期胚胎,胚胎移植前,需要用孕激素对受体母羊进行同期发情处理。
(5)克隆羊的鉴定:取少量克隆羊组织细胞提取DNA,将用___ 处理后的产物进行电泳,检测目的基因是否成功导入。待克隆羊成年并产奶,收集奶样,可用___ 技术鉴定克隆羊是否成功表达人抗凝血酶Ⅲ。若最终获得的抗凝血酶Ⅲ不能很好地发挥其功能,可利用___ 工程进行改造。
(1)获取人抗凝血酶Ⅲ基因:从人的肝细胞中提取mRNA,再通过
(2)基因表达载体的构建:重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β-酪蛋白基因启动子、人抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子等结构组成,其中
(3)成纤维细胞的转化:取幼龄雌性动物的组织,经酶处理后获得成纤维细胞悬液,放在动物细胞培养液中培养,从幼龄动物取材的原因是
(4)转基因奶山羊的获得:从奶山羊中获取卵母细胞,将阳性转基因成纤维细胞注入
(5)克隆羊的鉴定:取少量克隆羊组织细胞提取DNA,将用
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【推荐3】干扰素是动物体内合成的一种蛋白质,可以用于治疗病毒感染和癌症。人的干扰素基因在大肠杆菌细胞中进行表达,产生的干扰素,其抗病毒活性只有天然产品的十分之一,且体外保存相当困难。研究发现,若将第17位的半胱氨酸改变为丝氨酸,生产出的干扰素的抗病毒活性是原来的100倍,并且在-70℃的条件下,可以保存半年,给广大患者带来福音。回答下列问题:
(1)从上述资料可知,若要改变干扰素的功能,可以考虑对干扰素的_______________ 进行改造。
(2)对干扰素进行改造,应该直接对__________ (填“干扰素分子”或“干扰素基因”)进行操作来实现,原因是__________ 。
(3)与蛋白质工程相比较,基因工程在原则上只能生产___________ 的蛋白质,不一定符合生产和生活的需要,而蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系为基础,通过__________ 或__________ 得到符合要求的__________ ,再通过___________ (填生理过程)实现相应蛋白质的合成,满足生产和生活需要。
(1)从上述资料可知,若要改变干扰素的功能,可以考虑对干扰素的
(2)对干扰素进行改造,应该直接对
(3)与蛋白质工程相比较,基因工程在原则上只能生产
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