生物柴油是以动植物油脂以及餐饮垃圾油等为原料,通过化学反应制成的可供内燃机使用的燃料,是一种绿色能源。微生物脂肪酶在催化生产生物柴油中起者重要作用,为筛选产脂肪酶的微生物,科研人员开展了相关研究。请回答下列问题:
(1)产脂肪酶的微生物主要从油污土壤或水体中寻找,原因是______________________ 。
(2)为确保能够分离得到产脂肪酶的微生物,配置的培养基时应选择以_________ 为唯一碳源。
(3)需要对分解脂肪的微生物进行分离和计数,可采用____________ 法接种,从而得到分布均匀的单菌落。为了提高实验结果的可信度,研究人员设置了对照实验
(1)产脂肪酶的微生物主要从油污土壤或水体中寻找,原因是
(2)为确保能够分离得到产脂肪酶的微生物,配置的培养基时应选择以
(3)需要对分解脂肪的微生物进行分离和计数,可采用
对照组 | 作用 | 应出现的现象 |
接种的牛肉膏蛋白胨培养基 | 对照组培养基上的菌落数大于选择培养基上的菌落数 | |
判断选择培养基是否被污染 |
更新时间:2023-08-19 18:48:58
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【推荐1】三孢布拉霉菌能够产生-胡萝卜素,但大都产量较低。研究表明三孢布拉霉菌细胞产生的[H]可将无色的TTC(氯化三苯基四氮唑)还原为红色复合物,且菌体细胞内[H]含量越高,还原能力越强,胡萝卜素合成能力也越强。研究人员筛选高产菌株及提取-胡萝卜素的流程如下图。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/4/29/2710073392496640/2711151949684736/STEM/af08dbe6-a46c-4183-b460-e730a95be54c.png)
(1)图中的步骤①是对三孢布拉霉菌液进行稀释,目的是_____ 在步骤②接种前,应对培养基进行灭菌,常用的方法是_____ 。
(2)为选出高产菌种,研究人员在步骤②接种用的固体培养基中添加了TTC,培养一段时间后,在固体培养基上选取目的菌株进行步骤③时,应该选择_____ 的菌落,原因是_____ 。筛选过程中,多次重复步骤③和步骤④的目的是_____ 。
(3)从该微生物中提取-胡萝卜素时,需要将收集到的菌丝进行粉碎和干燥,这是因为_____ 等因素会影响萃取效率。鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时,通常采用的方法是_____
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/4/29/2710073392496640/2711151949684736/STEM/af08dbe6-a46c-4183-b460-e730a95be54c.png)
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(2)为选出高产菌种,研究人员在步骤②接种用的固体培养基中添加了TTC,培养一段时间后,在固体培养基上选取目的菌株进行步骤③时,应该选择
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【推荐2】蛋白质是生命活动的主要承担者,但蛋白质在高温条件下易变性,研究人员尝试从细菌中分离得到耐高温的蛋白质。回答下列问题:
(1)研究人员在取样后,可将样品用______ (填牛肉膏蛋白胨培养基或麦芽汁琼脂培养基)在______ 条件下培养筛选得到所需菌种,该菌种在后续实验中需频繁使用,可用______ 培养基进行保藏。
(2)欲从细菌中分离得到耐高温蛋白质,一般需进行样品处理、粗分离、______ 和纯度鉴定。蛋白质溶液粗分离时,需进行______ 除去蛋白质溶液中的小分子杂质,该方法的原理是______ 。
(3)利用电泳法对不同的蛋白质进行分离时,各种分子带电性质的差异和分子本身的大小都会影响分子的迁移速度,可在凝胶中加入______ 来保证影响因素的单一性。
(4)凝胶色谱法分离蛋白质和凝胶电泳法鉴定蛋白质时,迁移速度都取决于蛋白质相对分子量的大小,两种方法中迁移速度最快的分别是相对分子量______ 的蛋白质。
(1)研究人员在取样后,可将样品用
(2)欲从细菌中分离得到耐高温蛋白质,一般需进行样品处理、粗分离、
(3)利用电泳法对不同的蛋白质进行分离时,各种分子带电性质的差异和分子本身的大小都会影响分子的迁移速度,可在凝胶中加入
(4)凝胶色谱法分离蛋白质和凝胶电泳法鉴定蛋白质时,迁移速度都取决于蛋白质相对分子量的大小,两种方法中迁移速度最快的分别是相对分子量
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【推荐3】据不完全统计,全世界盐碱地的面积约为9.5亿公顷,其中我国约为9913万公顷,严重的盐碱土壤地区植物几乎不能生存。只有少数生物可以生长在盐碱环境中,研究发现,这些生物体内往往有“嗜盐酶”,这种酶往往有盐耐受性、热耐受性和对有机溶剂的抗性。某生物兴趣小组欲分离嗜盐菌。回答下列问题:
(1)该兴趣小组同学来到青海湖采集菌样,其原因是_________________ 。
(2)采集到湖水后若要从中分离出嗜盐菌,使用的培养基从用途上看属于________________ 培养基。
(3)取1mL湖水,按图稀释后接种(每次稀释10倍),培养一段时间后,平板上长出的菌落数分别为13,163、438、182和195,该过程采取的接种方法是_________________ ,计算每毫升水样中的菌体数量为______________ 个;与血细胞计数板计数法相比,此计数法测得的菌体数偏______ ,其原因是____________________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/9/11/2288306454110208/2288393265602560/STEM/3efc2708f9fe471a8122618c99a94106.png?resizew=346)
(4)若需要长期保存分离得到的嗜盐菌,应采用_______________ 法。
(1)该兴趣小组同学来到青海湖采集菌样,其原因是
(2)采集到湖水后若要从中分离出嗜盐菌,使用的培养基从用途上看属于
(3)取1mL湖水,按图稀释后接种(每次稀释10倍),培养一段时间后,平板上长出的菌落数分别为13,163、438、182和195,该过程采取的接种方法是
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(4)若需要长期保存分离得到的嗜盐菌,应采用
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【推荐1】金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色,从而形成透明圈。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题。
(1)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括碳源、氮源、_______ ,用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是_______ 。
(2)操作中在血平板上的接种方法是_______ ,接种操作前后需要对接种工具进行______ 灭菌。
(3)在制备血平板时需将pH调节至______ (“微酸性”或“微碱性”)后灭菌,待培养基冷却后,再加入适量血液。按培养基功能分类,血平板属于_____ 培养基。
(4)在无菌室内,经多次规范操作、重复实验,血平板上的菌落周围均出现透明圈,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是_____ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/6/5/76f7833c-aa8f-4f73-bdca-861fcb909048.png?resizew=409)
(1)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括碳源、氮源、
(2)操作中在血平板上的接种方法是
(3)在制备血平板时需将pH调节至
(4)在无菌室内,经多次规范操作、重复实验,血平板上的菌落周围均出现透明圈,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是
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【推荐2】甲胺磷是一种广谱、高效、剧毒的有机磷杀虫剂,曾被长期大量使用,引起水体、土壤污染,严重破坏了环境生态平衡,同时危害到人畜健康。利用微生物降解甲胺磷农药是解决使用甲胺磷带来的环境污染的有效途径。回答下列问题:
(1)筛选获得甲胺磷降解菌:选择长期使用甲胺磷农药的农田的土壤为样品,将获得的样品用无菌水稀释后接种于添加了________ 的选择培养基上进行培养,可以分离出能分泌甲胺磷降解酶的细菌。甲胺磷被降解后平板上会出现透明圈,应挑取____________ 的单菌落在选择性固体培养基上进行重复划线、分离和纯化。
(2)测定甲胺磷降解率:选择三种菌株对甲胺磷进行降解,降解情况如图所示,其中降解甲胺磷效果最好的菌株是________ ,该菌株培养时间与甲胺磷降解率的关系为_________ 。________ ,然后设计合成引物,通过________ 技术扩增出甲胺磷降解酶基因。后经一系列过程,获得高表达的降解甲胺磷工程菌。
(4)转基因工程菌在自然界的扩散可能会带来生态风险。为此,科研人员利用以下材料,设计了可被诱导而自毁的甲胺磷工程菌。所需材料和结构有:
①质粒
②IPTG(一种模拟异乳糖的试剂,可去除lac启动子中的阻遏物以诱导基因表达)
③lac启动子
④核酸水解酶基因
其具体设计思路是将______ (填序号)构建成重组载体,导入工程菌。需自毁时外源增加_____ (填序号)进行诱导,引发甲胺磷工程菌自毁。
(1)筛选获得甲胺磷降解菌:选择长期使用甲胺磷农药的农田的土壤为样品,将获得的样品用无菌水稀释后接种于添加了
(2)测定甲胺磷降解率:选择三种菌株对甲胺磷进行降解,降解情况如图所示,其中降解甲胺磷效果最好的菌株是
(4)转基因工程菌在自然界的扩散可能会带来生态风险。为此,科研人员利用以下材料,设计了可被诱导而自毁的甲胺磷工程菌。所需材料和结构有:
①质粒
②IPTG(一种模拟异乳糖的试剂,可去除lac启动子中的阻遏物以诱导基因表达)
③lac启动子
④核酸水解酶基因
其具体设计思路是将
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【推荐3】中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H,以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液,含较多蔗糖)为原料,在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料,期望提高甘蔗的整体利用价值,工艺流程如图。请回答问题。________ ,并不断提高其浓度,经多次传代培养(指培养一段时间后,将部分培养物转入新配的培养基中继续培养)以获得目标菌株。培养过程中宜采用________________ 法对样品中的活菌进行接种和计数,以评估菌株增殖状况。若某次取样中,对菌液稀释了105倍后,在每个平板上涂布菌液的体积为0.1ml,平板上的平均菌落数为220个,则菌液中H菌的细胞数为 ________ 个/L。菌落数目需要每隔一段时间统计一次,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样做的目的是________________ 。
(2).发酵装置中搅拌器的作用是_______________ 。
(3).基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性,研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统,其培养基盐浓度设为60g/L,pH为10,菌株H可正常持续发酵60d以上。分析该系统不需要灭菌的原因是___________________ 。
(2).发酵装置中搅拌器的作用是
(3).基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性,研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统,其培养基盐浓度设为60g/L,pH为10,菌株H可正常持续发酵60d以上。分析该系统不需要灭菌的原因是
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【推荐1】为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/23/74930bbb-b558-486d-b002-2ef1373d41d3.png?resizew=289)
(1)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过_______ 灭菌。
(2)示意图A和B中,________ 表示的是用平板划线法接种培养后得到的结果。能够得到单菌落的是图示________ 。
(3)图B的接种工具是_____ ,如果图B中的菌种是某细菌,则一般稀释倍数为________ 倍。
(4)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量,将1 mL水样稀释100倍,在4个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,4个平板上的菌落数分别为29、39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为_____ 个。
(5)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是振荡培养能提高培养液中_____ 的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/23/74930bbb-b558-486d-b002-2ef1373d41d3.png?resizew=289)
(1)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过
(2)示意图A和B中,
(3)图B的接种工具是
(4)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量,将1 mL水样稀释100倍,在4个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,4个平板上的菌落数分别为29、39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为
(5)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是振荡培养能提高培养液中
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【推荐2】尿素作为主要的化肥种类之一,也是一种重要的化工原料。目前处理含尿素废水的方法有3种:化学热力学水解法、微生物水解法及脲酶水解法。某研究小组欲从土壤中筛选能高效分解尿素的细菌(目标菌)。回答下列问题。
(1)给农作物施用尿素,主要是为了给植物提供___________ 元素,过量施用随水土流失后易造成水体污染,这种现象叫水体富营养化。为了筛选能分解尿素的细菌, 在配制培养基时需要添加KH2PO 4和Na2HPO4, 其作用有___________ (答出两点即可),运用固定化脲酶技术处理含尿素废水时应采用___________ 法对脲酶进行固定化。
(2)要从土壤中分离目标菌,关键的实验思路是___________ 。理由是___________ 。
(3)为对分离得到的菌种作进一步的鉴定,常在固体培养基中加入酚红试剂,若菌落周围出现___________ ,可以初步鉴定该种细菌为目标菌,其原理是___________ 。现上述变化,选出分解尿素能力强的菌种的思路是___________ 。
(1)给农作物施用尿素,主要是为了给植物提供
(2)要从土壤中分离目标菌,关键的实验思路是
(3)为对分离得到的菌种作进一步的鉴定,常在固体培养基中加入酚红试剂,若菌落周围出现
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(0.65)
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【推荐3】随着人们生活质量的提高,餐饮含油脂废水的排放量大量增加,合理处置油脂废水也成为新的课题。已知芽孢杆菌中有多种分解油脂产酸的菌种,科研人员欲采用下列流程筛选出能高效分解油脂的微生物。
菌种取样→分离培养→菌株的筛选→形态特征观察和生理生化反应鉴定回答下列问题:
(1)选取饭店附近排污渠的含油脂废水作为样本,采样约10g,立即装于试管内,此试管使用前需要经过________ 处理。
(2)样品分离培养前,一般需要将菌液进行________ 处理,然后吸取0.2ml菌液涂布到营养琼脂培养基平板上,置于37℃恒温培养箱内培养24h,记录菌落总数。将分离出的菌株按照菌落________ 等表观特征初步分类。
(3)上述步骤筛选出的菌株分别接种到含“花生油”的琼脂培养基平板上,37℃恒温培养箱中培养24h,筛选出油脂降解菌,培养基中“花生油”为菌种繁殖提供________ 。在该培养基还需要加入中性红染料(中性红为脂溶性染料,遇酸为红色,遇碱为黄色),挑选菌株要挑选显________ 降解圈的菌株,并且选颜色较________ (填“深或浅”)的为宜。
(4)实际操作中,由于油脂易聚集成液滴,常在培养基中加入2-3滴乳化剂使油脂分散均匀,鉴定效果更好,试分析原因________________ 。
菌种取样→分离培养→菌株的筛选→形态特征观察和生理生化反应鉴定回答下列问题:
(1)选取饭店附近排污渠的含油脂废水作为样本,采样约10g,立即装于试管内,此试管使用前需要经过
(2)样品分离培养前,一般需要将菌液进行
(3)上述步骤筛选出的菌株分别接种到含“花生油”的琼脂培养基平板上,37℃恒温培养箱中培养24h,筛选出油脂降解菌,培养基中“花生油”为菌种繁殖提供
(4)实际操作中,由于油脂易聚集成液滴,常在培养基中加入2-3滴乳化剂使油脂分散均匀,鉴定效果更好,试分析原因
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