【推荐1】20世纪70年代Fred sanger 发明了双脱氧终止法对DNA进行测序，其原理如图：在4支试管中分别加入4种脱氧核苷三磷酸（dNTP）和1种双脱氧核苷三磷酸（ddNTP） ； ddN'TP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸，在4支试管中DNA链将会分别在A、G、C、T位置终止，并形成不同长度的DNA片段，这些片段可被电泳分开并显示出来。下列说法中错误的是（　　）
   

A．这种测序方法需要引物和耐高温的 DNA聚合酶

B．电泳图谱中的箭头所指的DNA片段以鸟嘌呤结尾

C．测得未知 DNA的序列为5'-GATTCGAGCTGA- 3'

D．ddNTP 与dNTP竞争的延长位点是核苷酸链的3'端

【推荐2】荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当相关酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。下列叙述正确的是（　　）

A．引物是单链DNA，引物的碱基序列均相同

B．DNA合成方向是从子链的3′端向5′端

C．达到设定荧光强度所经过的循环次数与其起始模板数量无关

D．该项技术结合逆转录可用于检测某种细胞中不同基因的转录水平

【推荐3】引物在极大程度上决定了 PCR 的成败，下列关于引物的说法不正确的有（       ）

A．PCR 和生物体内的DNA合成都需要引物，PCR 引物一般是单链DNA

B．若引物的 CG碱基含量相对较高，PCR 退火步骤的温度需要适当升高

C．在 PCR 的退火步骤，两种引物分别结合在模板链的3'端和5'端

D．若初始有 10个胰岛素基因，PCR 中进行10轮循环，至少需要20 460个引物分子

【推荐1】下列技术依据DNA分子杂交原理的是（ ）
①用DNA分子探针诊断疾病
②重组DNA导入受体细胞
③亲子鉴定
④目的基因与运载体结合形成重组DNA分子

A．②③

B．①③

C．③④

D．①④

【推荐2】日本下村修、美国沙尔菲和钱永健在发现绿色荧光蛋白（GFP）等研究方面做出突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。依据GFP的特性，你认为该蛋白在生物工程中的应用价值是（       ）

A．作为标记基因，研究基因控制蛋白质的合成

B．作为标签蛋白，研究细胞的转移

C．注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠

D．标记噬菌体外壳，示踪DNA路径

【推荐3】通过PCR的定点诱变技术获得的改良基因两侧的碱基序列和大肠杆菌的质粒（有氨苄青霉素抗性基因、LacZ基因及一些酶切位点）结构如下图所示，研究者欲将改良基因导入大肠杆菌的质粒中保存。下列叙述正确的是（       ）

A．使用PCR技术扩增时需要一个引物、多个dNTP及Mg2+等

B．实现质粒和改良基因的高效连接应选用限制酶SmaI

C．构建重组质粒需用到的酶有XmaⅠ、NheⅠ和DNA连接酶

D．在含氨苄青霉素和β-半乳糖苷的培养基上，白色菌落的大肠杆菌含重组质粒

【推荐1】为使玉米获得抗除草剂性状，科研人员进行了相关操作(如图所示)。含有内含子的报鉴基因不能在原核生物中正确表达，但能在真核生物中正确表达，其正确表达产物能催化无色物质 K 变为蓝色物质。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，残留的农杆菌会导致未转化的愈伤组织也可在含除草剂的培养基中生长。下列叙述错误的是（       ）
   

A．T-DNA 可将基因G转移并整合到愈伤组织细胞的染色体DNA 上

B．利用物质 K 和抗生素进行筛选1，可获得蓝色的农杆菌菌落

C．利用物质 K 和除草剂进行筛选 2，易于获得抗除草剂的转基因植株

D．题中愈伤组织重新分化为芽、根等器官的过程中，需要添加植物激素

【推荐2】筛选是生物学研究中常用的技术手段。下列叙述正确的是（       ）

A．利用农杆菌转化法培育转基因植物时，需要在重组质粒上设计不同的标记基因对农杆菌和植物细胞进行筛选

B．用鉴别培养基和选择培养基对微生物进行筛选时，一般需要加入抗生素抑制杂菌的生长

C．单倍体育种中，需要通过表现型对单倍体植株进行筛选再用秋水仙素处理

D．制备单克隆抗体时，第一次和第二次筛选的目的和原理相同

【推荐3】苏云金杆菌中的CrylAC基因编码一种蛋白质，该蛋白质可杀死鳞翅目昆虫。研究者将CrylAC基因转入玉米中，T0转基因植株与普通玉米杂交获得T1，对T1进行抗虫鉴定，结果发现抗虫玉米与非抗虫玉米的比值为3:1。下列说法正确的是（       ）

A．导人的CrylAC基因位于同源染色体上

B．CrylAC基因遗传遵循分离和自由组合定律

C．T0玉米自交，子代的性状分离比为3:1

D．通过显微注射法可以形成转基因玉米

【推荐1】在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kanr）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞和组织才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答，叙述正确的是（       ）

①A过程需要的酶主要有限制性内切核酸酶和DNA连接酶
②B过程需要加入卡那霉素进行选择培养
③C过程为脱分化过程，培养基中只需加入营养物质、琼脂
④D过程可以用放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因作为探针进行分子水平的检测
⑤D过程可以用虫感染植株进行个体水平的检测

A．①②③⑤	B．①②④⑤
C．①③④⑤	D．②③④⑤

【推荐2】某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在绿色荧光蛋白（GFP）基因上，获得了L1-GFP融合基因，并将其插入质粒P0，构建了基因表达载体P1，L1基因两端分别含，限制酶BamHI和EcoRI的酶切位点，GFP基因两端含Kpn1和Sau3AI的酶切位点，这四种限制酶及其识别序列和切割位点如下。下列说法错误的是（       ）

限制酶	识别序列和切割位点	限制酶	识别序列和切割位点
BamHI	—G↓GATCC—	KpnI	—GGTAC↓C—
EcoRI	—G↓AATTC—	Sau3AI	—↓GATC—

A．为构建L1-GFP融合基因，用BamHI和Sau3AI分别切割L1基因和GFP基因

B．为构建基因表达载体P1，质粒PO上要有EcoRI和Sau3AI识别序列

C．GFP基因属于标记基因，可用于检测细胞中目的基因是否表达

D．基因工程的核心工作是基因表达载体的构建

【推荐3】“筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列说法错误的是（       ）

A．培育转基因抗虫棉时，需要从分子水平及个体水平进行筛选

B．单倍体育种时，需要对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养

C．制备单克隆抗体时，需要从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞

D．胚胎移植前，需要对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选