【推荐1】某生态研究小组为了从纤维素分解菌中获取纤维素酶，以便将农作物秸秆作为酿酒工业的原料，设计了如下操作流程分离提取较纯的纤维素分解菌。请分析回答问题：

①土壤取样→②选择培养→③梯度稀释→④将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上→⑤挑选菌落。
(1)纤维素分解菌选择培养的培养基中添加的碳源为___________。
(2)图甲所示接种方法主要用于________________，该方法不能用于测定菌体的数目，其原因主要是许多菌落并不是由______________形成的。
(3)图乙中的培养对应于流程图中步骤___________（填写序号）。
(4)若选择培养后预估锥形瓶中细菌细胞数为2×10⁷个/mL，若要在鉴别平板上涂布0.1ml稀释后的菌液，且使得每个平板上长出的菌落在200个左右，则至少应将锥形瓶中的菌液稀释______倍。在鉴别培养基中含有KH₂PO₄和Na₂HPO₄，其作用是：__________。
(5)流程图中步骤⑤的操作中，应挑选___________的菌落。

【推荐2】幽门螺杆菌是栖息在胃黏膜的革兰氏阴性螺旋状杆菌，具有强的脲酶（能降解尿素）活性，其代谢类型属于异养厌氧型（氧气浓度在5%〜8%左右适合，完全无氧或空气环境中无法生存)，这种细菌是慢性胃炎、甚至胃癌发生的元凶。
（1）为了对胃炎患者的胃黏膜提取物稀释样液中幽门螺杆菌进行分离，应将样品稀释液接种于以_________为唯一氮源的固体选择培养基上，接种后的培养皿在___________条件下，倒置于37℃的恒温培养箱中培养。
（2）分离培养幽门螺杆菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，培养基常用的灭菌方法有__________________________。
（3）欲检测上述培养基中是否具有幽门螺杆菌这类细菌的存在，向培养基中添加酚红指示剂，培养基中菌落周围显示红色环带，即表明这类细菌的存在，这种检测过程的机理是_____________。
（4）采用液体培养基培养幽门螺杆菌，为了测定菌液中的菌体数量，一般采用_____________法将一定量的菌液接种到固体培养基上，统计_____________的数量来代表菌体数，这种检测方法测得的结果一般偏_____________（填“大”或“小”)，原因是_____________________________。

【推荐3】物质W是一种含氮有机物，会污染土壤，W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌），回答下列问题。
（1） 若要从土壤中分离出目标菌，所用的培养基应为_____，使用前应用_____法进行严格灭菌；其中的氮源应该是_____。
（2） 在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。

如果要得到目标菌，应该选择_____菌落进一步纯化，选择的依据是__________
（3） 土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，_____
（4） 该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。
①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_____，三处滴加量相同。
②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明_____；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明_____。

【推荐1】【生物-选修1：生物技术实践】泡菜的制作是中国传统发酵技术之一，泡菜的制作离不开乳酸菌，某研究人员用泡菜滤液为材料分离纯化乳酸菌。已知培养基中添加碳酸钙显乳白色而不透明，乳酸能溶解碳酸钙。请回答下列问题：
（1）在配制以上培养基时常用________________法进行灭菌，在纯化分离时应该挑选出有____________的菌落为候选菌。
（2）若要测定滤液中菌体数可在显微镜下用_________________直接计数。若要测定其活菌数量，可选用________________法进行计数，使用该计数方法时研究人员分别在6和培养基平板上接种稀释倍数为10⁴的滤液各0.1ml，培养一段时间后，平板上长出菌落数分别为19、130、166、400、188、116，则该泡菜滤液每1ml样品中活菌数为______________个。
（3）随着新型环保材料聚乳酸（PLA）的开发应用，乳酸的生产再次受到关注。利用固定化技术生产乳酸可以提高乳酸产率。对于细胞的固定化处理，我们常用的方法有___________________。制作固定化细胞时，充分混合均匀的细胞溶液可在饱和溶液中形成凝胶珠。

【推荐2】某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：
（1）对买回来的菌种进行扩大培养，首先制备试管培养基，写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料：__________ 、___________、 __________、__________、________。其中提供氮源的是________________；提供能源的主要物质是______________。
（2）微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的_______。在烧杯中加入琼脂后要不停地____________，防止________________。
（3）将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后将若干个试管捆在一起，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入高压蒸汽灭菌锅中灭菌，压力_____________kPa，温度_____________，时间____________。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应_____________。
（4）使用高压蒸汽灭菌锅时应注意，先向锅内倒入适量的水。把锅内水加热煮沸并将其中原有的______彻底排出后再将锅密闭。

【推荐3】[生物一选修1：生物技术实践]工厂的污水池含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。

（1）加入化合物A的培养基属于____________培养基。化合物A可为目的菌提供生长所需的________等营养物质。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_____________。
(2)微生物培养过程中，防止杂菌污染的关键技术是_____________，为了排除杂菌污染如何设计对照实验___________________。
(3)在农业生产研究中,常需要进行微生物的培养和计数。下图是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一目的,操作上有很多注意事项。请列举两项。

_________________________________________________________________。

【推荐2】实验人员从环境中分离获得白腐菌，以白腐菌的菌丝或孢子制得固定化白腐菌凝胶颗粒。各取25个两种凝胶颗粒分别处理50 mL染料废水，实验结果如下图1。进一步研究不同数量的凝胶颗粒处理50 mL染料废水结果如图2。据图分析回答：

(1)从野外采集白腐菌前，先向待采集土壤喷洒适量的染料废水的目的是______。某同学在进行白腐菌分离纯化实验时，划线某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成第一条划线无菌落可能的操作失误是______、______。将收集到的菌丝或者孢子加入到适量的海藻酸钠溶液中混匀，抽取5mL混合液，滴加到CaCl₂溶液中，该过程中CaCl₂溶液的作用是______。
(2)现要处理100L皮革生产过程中产生的染料废水。从实验结果分析，应选用______凝胶颗粒，添加______个凝胶颗粒后，保持______天以上，以达到最好的净化效果。
(3)与向染料废水中直接接种白腐菌相比，在工业生产中使用固定化白腐菌凝胶颗粒的优点主要是______。

【推荐3】酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：

(1)配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，及时对培养基进行分装，并进行__________________________灭菌。
(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入在培养皿的_____________上做好标记的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约为_____________的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后_____________培养。
(3)挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。操作时，在第二次及以后的划线，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________ 。下列关于相关操作叙述合理的有________。
a.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株供应。
(4)步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和__________供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞的计数板计数5个中格中的细胞数，理论上_________色细胞的个数应不少于____________才能达到每毫升5×10⁹个活细胞的预期密度。

【推荐1】自生固氮细菌能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮细菌菌株，并对其固氮能力进行了研究。请回答下列问题：
（1）要从土壤样品中分离出自生固氮细菌，在获得土壤浸出液后，将浸出液加入到_________(选择、鉴定）培养基中培养，目的是___________，然后再吸取适量的培养液，采用稀释涂布平板法涂布于_________(选择、鉴定）培养基上继续培养。
（2）为了进一步筛选高效固氮细菌，研究人员将上述获得的等量的四种固氮细菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后，对固氮菌进行计数并定量测定培养液中的含氮量，结果如表：

	甲菌	乙菌	丙菌	丁菌
菌量（个/ml)	2.1×105	2.5×105	1.8×105	2.0×105
含氮量（K)	3.32	4.38	5.34	5.32

由上述结果可知，_________菌的固氮效率最高，原因是___________________。
（3）固氮基因重组到水稻、小麦等经济作物细胞中，让植物本身直接固氮，这样可以免施或少施氮肥。这样就要先提取出固氮细菌的DNA，某研究小组甲同学设计了一个提取DNA的方案：破碎细菌细胞，将初步过滤的细菌细胞匀浆加入到2mol/LNaCl溶液中，过滤，则DNA留在___________(填“沉淀”或“滤液”）中。经过一系列操作后，析出的DNA可用_____________试剂进行鉴定。

【推荐2】赖氨酸是人类和哺乳动物的必需氨基酸之一，机体不能自身合成，必须从食物中补充。在谷类食物如高粱中赖氨酸含量很低。天冬氨酸激酶（AK）和二氢吡啶羧酸合酶（DHPS）是赖氨酸合成途径中两种重要的酶，并协同控制植物中游离赖氨酸的合成速率。图1为野生高粱细胞内赖氨酸合成与分解的部分过程，其中LKP和SDH是赖氨酸分解代谢的关键酶。
(1)全世界每年对赖氨酸有巨大的需求，主要利用谷氨酸棒状杆菌等微生物通过发酵工程生产。除了优化菌种外，控制_________________________等适宜的条件也能有效提高赖氨酸产量。
(2)请结合图1和题干等相关知识，从基因工程或者从蛋白质工程方面考虑，再提出一种提高高粱赖氨酸含量的思路____________________。

在培养谷氨酸棒状杆菌过程中发现A细菌对谷氨酸棒状杆菌有抑制作用。为探究此菌抑制谷氨酸棒状杆菌生长的原理，实验组将A菌接种在A₁平板上，B₁平板中央接种直径为0.5cm的谷氨酸棒状杆菌菌落，把两个培养皿对扣，菌株无接触，5d后观察菌株生长情况，结果如图2。
(3)对照组处理为A₂平板__________________，B₂平板______________________。
(4)根据实验结果推测，A菌可能产生某种挥发性物质抑制谷氨酸棒状杆菌的生长，做出此判断的理由是___________________。
(5)除上述原因外，研究人员认为A菌的发酵液中可能也存在抑制谷氨酸棒状杆菌生长的物质。他们将A菌发酵液离心后，取上清液过滤，获得无菌滤液进行如下实验。

组别	实验处理	接种	检测
甲组	a	将直径为0．5cm的谷氨酸棒状杆菌菌落接种在平板中心，在恒温培养箱内培养。	测量b，计算抑菌率。
乙组	无菌水+固体培养基

请补充完善该实验方案。a____________________b _________________________

【推荐3】某生物兴趣小组分离提纯土壤，得到某种细菌，然后将其接种到无菌的三角瓶中进行培养。请回答下列问题：
（1）培养细菌时往往将pH值调至_____，微生物接种方法常见有_____（任写两种），无论哪种接种技术核心都是_____。培养液中出现_____现象，就说明有大量细菌产生。
（2）该实验小组成功分离出某品种的细菌后，用移液器设定1mL的接种量并分别接种于三个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，放置在摇床上培养，设定摇床转速分别为210r/min、230r/min、250r/min，检测结果如图所示。从图中数据你可以得出什么结论：_____。由此可知该生物的代谢类型为_____（填“需氧型”或“厌氧型”或“兼性厌氧型”）。

（3）某同学为探究该种细菌能否利用尿素作为氮源，请简要写出实验思路：_____。
实验结果表明，该菌不能利用尿素作为氮源，根本原因为_____。